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細(xì)胞培養(yǎng)基本要求2015/03/20
1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,無菌室及無菌操作臺(tái)(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后,才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后,再進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株之操作。2.無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時(shí)
細(xì)胞血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基的配制以及區(qū)別2015/03/18
細(xì)胞血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基的配制以及區(qū)別細(xì)胞培養(yǎng)基是如何配制的?培養(yǎng)細(xì)胞的*培養(yǎng)基由基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加劑(如血清或無血清培養(yǎng)用的某些確定的激素及生長(zhǎng)因子)組成,培養(yǎng)基的配方一直在改進(jìn),其中包括抗生素和抗有絲分裂劑等等?;A(chǔ)培養(yǎng)基絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液基礎(chǔ)上,添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。zui廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是邁健基礎(chǔ)培養(yǎng)基和邁健培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)添加物的混合物,其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而邁健培養(yǎng)基也包括非必須氨基酸,維生素的范圍亦很廣,另外常規(guī)含有無機(jī)鹽
試劑銷售淺談血清與血漿的差異2015/03/16
在維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)中,循環(huán)血液起著關(guān)鍵作用。血液成份的變化在疾病診斷與療效判斷中十分重要。因此,采用血清、血漿或全血,是一個(gè)涉及臨床醫(yī)療與科研質(zhì)量的重要問題。WHO于2002年邀請(qǐng)41位專家進(jìn)行專題研討,并發(fā)表了一個(gè)報(bào)告,比較詳盡地評(píng)述了血清、不同抗凝劑制備的血漿和全血在常用臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用,并介紹了各種血標(biāo)本相關(guān)指標(biāo)的穩(wěn)定條件。近20年來,許多學(xué)者在這一領(lǐng)域已進(jìn)行了大量工作。雖然我國(guó)也有人開始注意這一問題,但還不夠重視。例如,血糖測(cè)定,WHO推薦使用EDTA抗凝全血,肝素抗凝全血需謹(jǐn)慎應(yīng)用;
活性25-(OH)維生素D2D3檢測(cè)2015/03/13
活性25-(OH)維生素D2D3檢測(cè)維生素D——決定人體體質(zhì)情況的重要指標(biāo),衡量體內(nèi)鈣吸收的重要標(biāo)準(zhǔn)。人體內(nèi)存在十多種維生素D主要存在維生素D2D3兩種形式,在肝臟和腎臟轉(zhuǎn)化成為有生物活性的25-羥基維生素D和1,25-二羥基維生素D。由于25-羥基維生素D是人體內(nèi)維生素D的主要儲(chǔ)存形式,因此,通過檢測(cè)25-羥基維生素D可以確定總體維生素D的情況,評(píng)價(jià)鈣吸收水平,較好協(xié)助臨床疾病的診斷和監(jiān)測(cè),并確定鈣和維生素D的補(bǔ)充方案。隨時(shí)監(jiān)測(cè)人體內(nèi)維生素D遠(yuǎn)離各種維D缺乏癥D缺乏尤顯嚴(yán)重,可能引發(fā)各種疾病,
關(guān)于血球計(jì)數(shù)板的使用及問題討論2015/03/12
關(guān)于血球計(jì)數(shù)板的使用及問題討論一、血球計(jì)數(shù)板的使用原理顯微鏡直接計(jì)數(shù)法是將小量待測(cè)樣品的懸浮液置于一種特別的具有確定面積和容積的載玻片上(又稱計(jì)菌器),于顯微鏡下直接計(jì)數(shù),然后推算出含菌數(shù)的一種方法。血球計(jì)數(shù)板是常用的計(jì)菌器之一。血球計(jì)數(shù)板是一種專門用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物的一種儀器,由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四條下凹的槽,構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)較寬,其中間又被一短橫槽隔為兩半,每半邊上面刻有一個(gè)方格網(wǎng)。方格網(wǎng)上刻有9個(gè)大方格,其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室。這一大方格的長(zhǎng)
H446(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)2015/03/10
H446(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)詳細(xì)介紹:小細(xì)胞肺癌(SCLC)是肺癌的一個(gè)未分化癌分型,在肺癌中病發(fā)比例約為20~25%。小細(xì)胞肺癌分為局限期和廣泛期,大多數(shù)小細(xì)胞肺癌診斷時(shí)已為廣泛期,局限期zui多占1/3。該病男性多發(fā)于女性;患病位置以大支氣管(中心型)居多。臨床特點(diǎn)為:腫瘤細(xì)胞倍增時(shí)間短,進(jìn)展快,常伴內(nèi)分泌異?;蝾惏┚C合征。小細(xì)胞肺癌一般起源于較大支氣管,大多為中央型肺癌。小細(xì)胞癌分化程度低,生長(zhǎng)快,較早出現(xiàn)淋巴道轉(zhuǎn)移和侵入血管經(jīng)血道廣泛轉(zhuǎn)移到身體遠(yuǎn)處器官組織,因此在各類肺癌中,小細(xì)胞癌的預(yù)
大鼠不對(duì)稱二甲基精氨酸(ADMA)Elisa試劑盒2015/03/10
大鼠不對(duì)稱二甲基精氨酸(ADMA)Elisa試劑盒本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中不對(duì)稱二甲基精氨酸(ADMA)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠不對(duì)稱二甲基精氨酸(ADMA)水平。用純化的大鼠不對(duì)稱二甲基精氨酸(ADMA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入不對(duì)稱二甲基精氨酸(ADMA),再與HRP標(biāo)記的羊抗鼠抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色
ELISA的基本原理和幾種方法2015/03/06
基本原理1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)用于IgG定量測(cè)定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測(cè)定方法。這一方法的基本原理是:①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),把受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步
血清型和抗原抗體系統(tǒng)是什么意思?2015/03/05
血清型和抗原抗體系統(tǒng)是什么意思?血清型:蘇云金桿菌種下分類的一種血清學(xué)方法,根據(jù)菌體細(xì)胞鞭毛抗原(H抗原)的特異性和生理生化特性將蘇云金桿菌區(qū)分位同的血清型,向下再分為各個(gè)亞種。抗原,是指能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生(特異性)免疫應(yīng)答,并能與免疫應(yīng)答產(chǎn)物抗體和致敏淋巴細(xì)胞在體內(nèi)外結(jié)合,發(fā)生免疫效應(yīng)(特異性反應(yīng))的物質(zhì)??乖幕咎匦杂袃煞N,一是誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的能力,也就是免疫原性,二是與免疫應(yīng)答的產(chǎn)物發(fā)生反應(yīng),也就是抗原性。抗體指機(jī)體的免疫系統(tǒng)在抗原刺激下,由B淋巴細(xì)胞或記憶細(xì)胞增殖分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的、可
血清檢查IGG和IGM的區(qū)別2015/03/05
血清檢查IGG和IGM的區(qū)別IgG抗體是抗體中分子量zui小的一種,可通過胎盤輸給胎兒,保護(hù)了嬰兒zui初六個(gè)月內(nèi)免受感染。該抗體產(chǎn)生晚,維持時(shí)間長(zhǎng),消失慢,濃度高。血中檢測(cè)到可作為遠(yuǎn)期感染指標(biāo)。IgM抗體是抗體中分子量zui大的一種,不能通過胎盤輸給胎兒??贵w產(chǎn)生zui早,一經(jīng)感染,快速產(chǎn)生,在感染初期抗感染起作用。但維持時(shí)間短,消失快。當(dāng)IgM消失,IgG才開始上升,血中檢測(cè)到可作為近期感染指標(biāo)。你結(jié)果只說明曾經(jīng)感染過,無近期感染??梢殞殹l`長(zhǎng)類動(dòng)物主要有四種免疫球蛋白IgG、IgM、I
檢測(cè)口蹄疫血清抗體的方法2015/03/04
檢測(cè)口蹄疫血清抗體的方法(一)口蹄疫正向間接紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)(間接血凝試驗(yàn))該試驗(yàn)是以口蹄疫O、A、C、Asia-1型病毒和豬水泡病病毒的細(xì)胞培養(yǎng)物(細(xì)胞毒)經(jīng)PEG濃縮,蔗糖密度梯度超離后純化的病毒抗原分別致敏戊二醛鞣酸處理的綿羊紅細(xì)胞,而制成的血凝抗原,用于快速檢測(cè)動(dòng)物血清中的口蹄疫和豬水泡病特異抗體水平。該法簡(jiǎn)易、快速、特異、直觀、是當(dāng)前測(cè)抗的實(shí)用方法。1.試驗(yàn)材料V型96孔110。醫(yī)用血凝滴定板、玻璃板(與血凝板大小相同)、微量移液器(10~100微升)、塑料咀、微量振蕩器、1毫升/5毫升
關(guān)于血清的一些討論2015/01/30
關(guān)于血清的一些討論1、血清的主要成分和功能牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖具有重要甚至是難以替代的作用,它含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成分。主要有以下成分和功能:A、血清中的主要物質(zhì)—蛋白質(zhì)如白蛋白等具有緩沖細(xì)胞培養(yǎng)液酸堿度、維持滲透壓的作用。B、轉(zhuǎn)鐵蛋白、甲狀腺素結(jié)合蛋白等結(jié)合蛋白,有識(shí)別維生素、脂類、金屬和其它激素等,并能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,從而起到解毒作用。C、纖維粘連素、胎牛血清中的胎球蛋白、貼壁因子等能促進(jìn)細(xì)胞貼壁、鋪展。D、多肽類如血小板促生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮細(xì)胞
人雌二醇(E2)ELISA試劑盒說明書2015/01/30
人雌二醇(E2)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中雌二醇(E2)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人雌二醇(E2)水平。用純化的人雌二醇(E2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入雌二醇(E2),再與HRP標(biāo)記的雌二醇(E2)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雌二醇(E2)呈
一抗和二抗的選擇2015/01/29
一抗的選擇檢測(cè)任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇,為縮小抗體的選擇范圍選中合適的抗體,需要考慮如下幾種因素:分析試驗(yàn)應(yīng)用的類型l樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)l樣本的種屬l抗體宿主的種類l抗體的標(biāo)記和檢測(cè)l1.分析試驗(yàn)應(yīng)用的類型一般抗體說明書都列出該抗體經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證過適用于何種分析類型,如:可以應(yīng)用于WBIHCICCELASA分析等,如果抗體說明書沒有提及的應(yīng)用類型,并不意味著該抗體不適用于此種分析應(yīng)用類型,而僅是說明尚未經(jīng)過此種分析試驗(yàn)驗(yàn)證,如果抗體不適用某些分析試驗(yàn),則會(huì)在抗體說明書上標(biāo)注出來不適于某
糖化酶活力測(cè)定(直接滴定法)2015/01/28
糖化酶活力測(cè)定(直接滴定法)原理采用可溶性淀粉為底物,在一定的pH值與溫度下,使之水解為葡萄糖(還原糖),以直接滴定法測(cè)定。試劑及儀器(1)堿性酒石酸銅鉀溶液(使用時(shí)等體積混合甲、乙溶液):甲液:稱取15.693g硫酸銅(Cu2SO4·5H2O),0.05g次甲基藍(lán),用水溶解并稀釋定容至1000mL;乙液:稱取50g酒石酸鈉鉀,54g氫氧化鈉,用水溶解并稀釋定容至1000mL(2)0.1%標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液:準(zhǔn)確稱取1g無水葡萄糖(預(yù)先在100-1050C烘干),用水溶解,加5mL濃鹽酸,用水定容至
膠原酶2015/01/27
無菌條件下,切取動(dòng)物軟骨組織剪碎為1立方毫米大小;加入0.25%胰蛋白酶37℃水浴消化15~20分鐘;離心10分鐘(1000轉(zhuǎn)/分),棄去胰酶再換成0.2%Ⅱ型膠原酶37℃水浴消化30分鐘至2小時(shí),期間每15分鐘混勻一次或者不停攪拌(用磁力攪拌器)至液體渾濁為止,加胎牛血清數(shù)滴終止消化,加1640培養(yǎng)液5~10ml混勻;用100目金屬網(wǎng)過濾,濾液離心10分鐘(1000轉(zhuǎn)/分),棄去上清夜,再加含10%胎牛血清1640培養(yǎng)液5ml放入培養(yǎng)瓶進(jìn)行孵育培養(yǎng).一型膠原酶,酶:組織塊=2:1。37度下消化
多西他賽與吉非替尼對(duì)人肺癌細(xì)胞的作用2015/01/26
多西他賽與吉非替尼對(duì)人肺癌細(xì)胞的作用多西他賽和吉非替尼均是晚期非小細(xì)胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)的一線和二線治療藥物,日前兩者療效都達(dá)平臺(tái)期。除尋找新的靶向治療靶點(diǎn)外,如何進(jìn)一步提高化療和表皮生長(zhǎng)因子酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKIs)的療效是晚期NSCLC面臨的問題?;熕幬锱cEGFR-TKIs作用的機(jī)制不同,理論上兩者同時(shí)應(yīng)用可能有增效作用。細(xì)胞學(xué)研究顯示,EGFR-TKIs聯(lián)合化療藥物能明顯增強(qiáng)對(duì)NSCLC細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用,起到“1+12”的作用
AdvCell®骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞血清培養(yǎng)基2015/01/23
AdvCell?骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞血清培養(yǎng)基AdvCell?骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞血清培養(yǎng)基根據(jù)哺乳類生物干細(xì)胞的生長(zhǎng)需要,包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機(jī)和無機(jī)化合物、激素、生長(zhǎng)因子、微量礦物質(zhì)、胎牛血清以及其他補(bǔ)給成分。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,無病毒和支原體,性能穩(wěn)定,使用該培養(yǎng)基能使干細(xì)胞在理想營(yíng)養(yǎng)平衡狀態(tài)下進(jìn)行多代擴(kuò)增而不發(fā)生分化(至少在10代以內(nèi))。★產(chǎn)品內(nèi)容名稱產(chǎn)品號(hào)規(guī)格貯藏條件運(yùn)輸AdvCell?骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基AdvCell?BoneMarrowMesenchymalStemCell
細(xì)胞培養(yǎng)液簡(jiǎn)介2015/01/23
細(xì)胞培養(yǎng)液細(xì)胞培養(yǎng)液簡(jiǎn)介雖然細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)早在19世紀(jì)末就開始了,但用于培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)液主要是動(dòng)物的血清或淋巴液。被人稱為細(xì)胞培養(yǎng)之父的RossHarrison就是利用青蛙的淋巴液來培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞的。這樣的培養(yǎng)液不但性質(zhì)不穩(wěn)定,而且只能進(jìn)行非常小規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng)。*個(gè)人工配制的培養(yǎng)液是由Lewis&Lewis在1911年由海水、血清、胚胎提取物和鹽和蛋白胨為原料配制成的。但是人們對(duì)于培養(yǎng)液中的化學(xué)成分并不清楚。直到1948年,F(xiàn)isher才研制成了*個(gè)化學(xué)成分清楚的細(xì)胞培養(yǎng)液CMRL1006。實(shí)驗(yàn)室
淺析細(xì)胞質(zhì)遺傳的多樣性2015/01/22
淺析細(xì)胞質(zhì)遺傳的多樣性摘要:繁榮的地球分分秒秒都在孕育和誕生新的生命,生命遺傳的方式也是多種多樣的。遺傳方式主要分為核內(nèi)遺傳和核外遺傳(也叫細(xì)胞質(zhì)遺傳),細(xì)胞質(zhì)遺傳的主要方式是母系遺傳,但同時(shí)也存在著不同于母系遺傳的細(xì)胞質(zhì)遺傳方式,即父系遺傳和雙親遺傳。本文主要講述了細(xì)胞質(zhì)遺傳的發(fā)現(xiàn)以及研究細(xì)胞質(zhì)遺傳的新方法并舉例論證了父系遺傳和母系遺傳方式的存在。關(guān)鍵字:細(xì)胞質(zhì)遺傳母系遺傳父系遺傳雙親遺傳一、細(xì)胞質(zhì)遺傳的定義及發(fā)現(xiàn)在核外遺傳中,其中由細(xì)胞質(zhì)成分如質(zhì)體、線粒體引起的遺傳現(xiàn)象叫細(xì)胞質(zhì)遺傳。細(xì)胞質(zhì)遺
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