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蛋白質(zhì)的分離和純化2015/01/05

蛋白質(zhì)的分離和純化（一）根據(jù)配體特異性的分離方法－親和色譜法親和層析法（aflinitychromatography）是分離蛋白質(zhì)的一種極為有效的方法，它經(jīng)常只需經(jīng)過一步處理即可使某種待提純的蛋白質(zhì)從很復(fù)雜的蛋白質(zhì)混合物中分離出來，而且純度很高。這種方法是根據(jù)某些蛋白質(zhì)與另一種稱為配體（Ligand）的分子能特異而非共價地結(jié)合。其基本原理：蛋白質(zhì)在組織或細(xì)胞中是以復(fù)雜的混合物形式存在，每種類型的細(xì)胞都含有上千種不同的蛋白質(zhì)，因此蛋白質(zhì)的分離（Separation），提純（Purification

細(xì)胞凋亡檢測方法2015/01/05

細(xì)胞凋亡檢測方法細(xì)胞凋亡與壞死是兩種*不同的細(xì)胞凋亡形式，根據(jù)死亡細(xì)胞在形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)上的差別，可以將二者區(qū)別開來。細(xì)胞凋亡的檢測方法有很多，下面介紹幾種常用的測定方法。一、細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測根據(jù)凋亡細(xì)胞固有的形態(tài)特征，人們已經(jīng)設(shè)計了許多不同的細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測方法。1光學(xué)顯微鏡和倒置顯微鏡（1）未染色細(xì)胞：凋亡細(xì)胞的體積變小、變形，細(xì)胞膜完整但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象，細(xì)胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細(xì)胞出現(xiàn)皺縮、變圓、脫落。（2）染色細(xì)胞：常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細(xì)胞的染色質(zhì)濃縮、

CST抗體（2）2015/01/04

CST抗體（2）CellSignalingTechnology,Inc(CST)是美國的生物公司和細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究的，提供特色的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)檢測用抗體及磷酸化抗體、ELISA試劑盒、激酶等產(chǎn)品。CST總部位于美國波士頓，毗鄰哈佛、麻省理工等學(xué)府的雄厚人才資源，擁有專業(yè)的生產(chǎn)和研發(fā)隊伍，發(fā)表的文章多次收錄在Nature,Cell,JournalofImmunology等雜志上。其高質(zhì)量的產(chǎn)品和專業(yè)的研發(fā)精神已被客戶推崇為“細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究的金標(biāo)準(zhǔn)”！CST抗體（2）6393SSignalSilence

CST抗體（1）2015/01/04

CST抗體（1）試劑銷售專業(yè)代理CST抗體，貨期2-3周，服務(wù)好，原裝！另有abcam抗體，Santacruz抗體，millipore抗體供應(yīng)，均原裝，價格公道，上海試劑銷售！CST抗體（1）CellSignalingTechnology,Inc(CST)是美國的生物公司和細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究的，提供特色的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)檢測用抗體及磷酸化抗體、ELISA試劑盒、激酶等產(chǎn)品。CST總部位于美國波士頓，毗鄰哈佛、麻省理工等學(xué)府的雄厚人才資源，擁有專業(yè)的生產(chǎn)和研發(fā)隊伍，發(fā)表的文章多次收錄在Nature,Cell

各種細(xì)胞的培養(yǎng)經(jīng)驗2014/12/31

HePG2細(xì)胞和L-02細(xì)胞的傳代：HePG2細(xì)胞屬人肝腫瘤的恒生細(xì)胞株，L-02細(xì)胞則是人胎肝細(xì)胞株，二者所使用的培養(yǎng)基可以是一樣的，即zui常見的DMEM。一干使用低糖的。細(xì)胞長滿培養(yǎng)瓶時既要傳代。使用胰酶消化即可。用D-Hank's液配制成0.25%的胰酶。使用前37度預(yù)熱，細(xì)胞經(jīng)PBS清洗兩遍后，每個中號培養(yǎng)瓶加0.7ml的胰酶，胰酶的量可根據(jù)自己培養(yǎng)瓶的大小而定，原則就是能夠蓋滿瓶底。加入胰酶以后，為使酶的活性zui大，將培養(yǎng)瓶蓋擰緊后放回培養(yǎng)箱中，3分鐘左右即用含血清的培養(yǎng)基終止消化

單克隆抗體2014/12/31

單克隆抗體基本概念抗體主要由B淋巴細(xì)胞合成。每個B淋巴細(xì)胞有合成一種抗體的遺傳基因。動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細(xì)胞系，含遺傳基因不同的B淋巴細(xì)胞合成不同的抗體。當(dāng)機體受抗原刺激時，抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細(xì)胞。被激活的B細(xì)胞分裂增殖形成該細(xì)胞的子孫，即克隆由許多個被激活B細(xì)胞的分裂增殖形成多克隆，并合成多種抗體。如果能選出一個制造一種專一抗體的細(xì)胞進行培養(yǎng)，就可得到由單細(xì)胞經(jīng)分裂增殖而形成細(xì)胞群，即單克隆。單克隆細(xì)胞將合成一種決定簇的抗體，稱為單克隆抗體（monoc

Santa cruz抗體 各種型號2014/12/30

Santacruz抗體各種型號試劑銷售專業(yè)代理Santacruz抗體，abcam抗體，CST抗體，millipore抗體，貨期短，質(zhì)量優(yōu)，售后服務(wù)好，因為專業(yè)，所以值得信賴！！56980388Santacruz抗體各種型號sant-sc-01c-Fms/CSF-1R（2-4A5）200µg/mlsant-sc-02PEc-Fms/CSF-1R（3-4A4）PE100testsin2mlsant-sc-03EGFR（1005）200µg/mlsant-sc-03-GEGFR（1005）-G200µ

胎牛血清的主要指標(biāo)！2014/12/29

主要技術(shù)指標(biāo)目前國內(nèi)血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是2005版的《中華人民共和國藥典》，主要指標(biāo)有以下幾點：1、內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)為不高于5EU/ml。內(nèi)毒素是細(xì)菌破碎后細(xì)胞壁的成分，因此內(nèi)毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產(chǎn)一系列過程中的無菌操作情況。目前，國產(chǎn)血清基本都能達到這一要求，很多進口胎牛血清內(nèi)毒素含量反而更高，如Gibco26140，只要求不高于50EU/ml，高出我國標(biāo)準(zhǔn)10倍，即使是16000，也要10EU/ml，血清質(zhì)量也未見影響。可見，內(nèi)毒素含量偏高不影響質(zhì)量，除非含量*，預(yù)示著已經(jīng)污染。2、總蛋白含

HIV2014/12/26

HIVHIV病毒主要攻擊人體的T淋巴細(xì)胞系統(tǒng)；一旦侵入機體細(xì)胞，病毒將會和細(xì)胞整合在一起終生難以消除；病毒基因變化多樣；廣泛存在于感染者的血液、精液、陰道分泌物、唾液、尿液、乳汁、腦脊液、有神經(jīng)癥狀的腦組織液，其中以血液、精液、陰道分泌物中濃度zui高；對外界環(huán)境的抵抗力較弱，對乙肝病毒有效的消毒方法對艾滋病病毒消毒也有效；感染者潛伏期長、死亡率高體外生存人類免疫缺陷病毒在人體外生存能力極差，不耐高溫，抵抗力較低，離開人體不易生存，常溫下只可生存數(shù)小時至數(shù)天。HIV對熱敏感。在56℃條件下30分

T淋巴細(xì)胞分離技術(shù)2014/12/26

T淋巴細(xì)胞分離技術(shù)免疫細(xì)胞的分離、純化和鑒定*節(jié)免疫細(xì)胞的分離、純化技術(shù)各種免疫細(xì)胞的分工與協(xié)作，共同完成免疫應(yīng)答及其調(diào)控，因此，各種免疫細(xì)胞的分離及其功能測定對于了解其在免疫應(yīng)答中的作用及相互關(guān)系有著重要意義。免疫細(xì)胞分離的方法有很多，主要是根據(jù)細(xì)胞的理化性狀、功能，以及細(xì)胞表面標(biāo)志等的差異而設(shè)計的。粘附分離法、尼龍毛柱分離法、羰基鐵分離法等主要根據(jù)細(xì)胞的屬性（如粘附）和功能不同，旨在將粘附和非粘附或粘附力較小的細(xì)胞分離開。有人證實免疫細(xì)胞在玻璃或塑料平面上的粘附能力分別為：巨噬細(xì)胞或單核細(xì)胞

牛血清的質(zhì)量檢測2014/12/25

牛血清的質(zhì)量檢測（一）化學(xué)檢測（1）滲透壓（280-340mOsmol/kg）：使用凝固點降低的方法檢測滲透壓，使用國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)溶液對我們的滲透壓儀器進行校準(zhǔn)；（2）PH值（7.0-7.5）：同樣使用國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)溶液對pH計進行校準(zhǔn)；（3）蛋白含量：（電容法）樣品被加到醋酸纖維素介質(zhì)中并在緩沖溶液體系內(nèi)遷移，條帶經(jīng)染色、清潔、干燥后用密度儀進行掃描以檢測***和球蛋白組分的相對濃度。***、球蛋白和血紅蛋白隨著牛年齡的增加血清中總蛋白含量相應(yīng)增加，總的血清蛋白含量

膠原蛋白在人體中的作用2014/12/25

知道嗎？人的皮膚里80%是膠原蛋白，膠原蛋白在皮膚中象一張彈力網(wǎng)，撐起皮膚，使皮膚光滑、緊致、有彈性，膠原蛋白是人*的“青春存款”。膠原蛋白在皮膚中具有良好的支撐力，能讓皮膚看起來非常豐潤。此外，它吸收環(huán)境四周水分的能力很強；覆蓋在皮膚上時，又可以防止水分從表面蒸發(fā)，保濕效果非常顯著。受月經(jīng)、生育、紫外線的影響，女人一過25歲，膠原蛋白急劇流失，皮膚衰老加快，加上紫外線照射以及體內(nèi)的氧化作用，都可能破壞膠原蛋白的結(jié)構(gòu)，讓它失去原有的彈性，這就是皺紋和臉部皮膚松弛出現(xiàn)的原因。同時人體其它組織器官也

細(xì)胞培養(yǎng)用血清保存方法與解凍常見問題2014/12/24

細(xì)胞培養(yǎng)用血清保存方法與解凍常見問題1)保存血清的方法?我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。然而，若存放于4℃時，請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。2)如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?我們建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。3)血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，

細(xì)胞系與細(xì)胞株2014/12/24

細(xì)胞系與細(xì)胞株細(xì)胞系（cellline）指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。人的乳腺癌細(xì)胞細(xì)胞株（CellStrain）：通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物。細(xì)胞系指可連續(xù)傳代的細(xì)胞。原代培養(yǎng)物在傳代時就成為細(xì)胞系，能連續(xù)培養(yǎng)下去的細(xì)胞系成為連續(xù)細(xì)胞系，不能連續(xù)培養(yǎng)下去的細(xì)胞系成為有限細(xì)胞系。通過一定的選擇和純化方法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞稱為細(xì)胞株。可以連續(xù)多次傳代的細(xì)胞株稱為連續(xù)細(xì)胞株，

免疫血清制備方法2014/12/23

免疫血清制備方法：免疫血清的制備是一項常用的免疫學(xué)實驗技術(shù)。價、高特異性的免疫血清可作為免疫學(xué)診斷的試劑(如用于制備免疫標(biāo)記抗體等)，也可供特異性免疫治療用。免疫血清的效價高低取決于實驗動物的免疫反應(yīng)性及抗原的免疫原性。如以免疫原性強的抗原刺激高應(yīng)答性的機體，常可獲得價的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫時，則需同時加用佐劑以增強抗原的免疫原性。免疫血清的特異性主要取決于免疫用抗原的純度。因此，如欲獲得高特異性的免疫血清，必須予先純化抗原。此外，抗原的劑量、免疫途徑及注射抗原的時間間隔等，也是

細(xì)胞的復(fù)蘇及凍存方法2014/12/23

細(xì)胞的復(fù)蘇及凍存方法一.細(xì)胞復(fù)蘇與培養(yǎng)將液氮或-80℃保存的腫瘤細(xì)胞于37℃水浴，快速溶化，用8.0ml培養(yǎng)基混勻已融化的腫瘤細(xì)胞懸液，于1500轉(zhuǎn)/分，離心3分鐘。棄上清，再吸取8.0ml培養(yǎng)基質(zhì)混勻細(xì)胞沉淀，再1500轉(zhuǎn)/分，離心3分鐘，棄上清，細(xì)胞沉淀用1.0ml培養(yǎng)基混勻，備用。另取一個75cm2方瓶，加入14.0ml培養(yǎng)基質(zhì)，將上述制備的含腫瘤細(xì)胞懸液（1.0ml）加入此方瓶中，于37℃，5%CO2孵育箱中培養(yǎng)。若此腫瘤細(xì)胞懸浮生長，大約3－4天細(xì)胞基質(zhì)會變黃，5.0ml細(xì)胞懸液可傳代

細(xì)胞活性測定原理2014/12/22

根據(jù)活細(xì)胞線粒體內(nèi)的脫氫酶可將試劑中的有效成分轉(zhuǎn)變?yōu)橛蓄伾腇ormazan，并可被酶標(biāo)儀檢測，間接反應(yīng)活細(xì)胞數(shù)量。對于細(xì)胞增殖、凋亡、生長受抑等可通過細(xì)胞數(shù)量間接得知的生物學(xué)改變，采用細(xì)胞活性測定可以提供可應(yīng)用和參考的數(shù)據(jù)。應(yīng)用：用于生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模藥物篩選、細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性、藥敏實驗等一般流程：1）細(xì)胞種于96孔板中，按照客戶需要進行各種處理2）加入檢測試劑并按試劑要求操作3）酶標(biāo)儀檢測不同波長處樣本的吸光值4）數(shù)據(jù)統(tǒng)計基礎(chǔ)準(zhǔn)備：l檢測用細(xì)胞2處理方法和處理試劑后期結(jié)果實驗原

GAPDH內(nèi)參抗體2014/12/22

GAPDH抗體推薦—高性價比GAPDH內(nèi)參抗體的選擇在WesternBloting實驗中，可能存在總蛋白濃度測定不準(zhǔn)確，或者蛋白質(zhì)樣品在電泳前上樣時產(chǎn)生的樣品間的操作誤差；這些誤差可以通過測定每個樣品中實際轉(zhuǎn)到膜上的內(nèi)參，比如內(nèi)參GAPDH的含量來進行校正。GAPDH（甘油醛-3-磷酸脫氫酶）是參與糖酵解的一種關(guān)鍵酶，由4個30-40kDa的亞基組成，分子量146kDa，檢測條帶大約在36kDa。GAPDH基因幾乎在所有組織中都高水平表達，廣泛用作Westernblot蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)化的內(nèi)參。如何選

胚胎干細(xì)胞的應(yīng)用2014/12/19

胚胎干細(xì)胞的應(yīng)用胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的性，但于發(fā)育成組織、器官，在體外是不能誘導(dǎo)出個體的。但早期囊胚如果分開是可以發(fā)育成一個個體的，就是同卵雙胞胎的來歷。胚胎干細(xì)胞是具有性的，這可以肯定。目前的技術(shù)只能做到體外誘導(dǎo)組織器官，以供人造器官移植。這時的細(xì)胞好像已經(jīng)有了一點遷移。在此引用一下百科...：胚胎干細(xì)胞具有多能性（Pluripotency），特點是可以通過細(xì)胞分化(Cellulardifferentiation)成多種組織（所有組織，包括生殖系細(xì)胞）的能力，但無法獨自發(fā)育成一個個體（利用四倍體

干細(xì)胞分選技術(shù)2014/12/19

干細(xì)胞分選技術(shù)干細(xì)胞是一類具有自我復(fù)制和分化潛能的細(xì)胞，包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞。新近研究表明干細(xì)胞可以為臨床細(xì)胞替代治療和移植治療提供新的細(xì)胞來源，有廣闊應(yīng)用前景。干細(xì)胞的分類根據(jù)干細(xì)胞的來源、發(fā)育階段、分化趨勢將它們分為兩大類：ES細(xì)胞和成體干細(xì)胞（或稱之為特定組織干細(xì)胞，如造血干細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞等）。ES細(xì)胞：ES細(xì)胞是從附置前早期胚胎內(nèi)細(xì)胞團或附置后胚胎原始生殖細(xì)胞分離克隆的一類具有自我更新能力和發(fā)育性的，并能產(chǎn)生分化后代能力的早期胚胎細(xì)胞，包括畸胎瘤干細(xì)胞(EC細(xì)胞