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單克隆制備的基本原理2014/12/02
單克隆制備的基本原理一、單克隆抗體的概念抗體(antibody)是機體在抗原刺激下產生的能與該抗原特異性結合的免疫球蛋白。常規的抗體制備是通過動物免疫并采集抗血清的方法產生的,因而抗血清通常含有針對其他無關抗原的抗體和血清中其他蛋白質成分。一般的抗原分子大多含有多個不同的抗原決定簇,所以常規抗體也是針對多個不同抗原決定簇抗體的混合物。即使是針對同一抗原決定簇的常規血清抗體,仍是由不同B細胞克隆產生的異質的抗體組成。因而,常規血清抗體又稱多克隆抗體(polyclonalantibody),簡稱多抗
抗體芯片技術2014/12/02
抗體芯片技術蛋白質是一切生命活動的基礎,受基因表達的調控,因而以檢測樣品中的mRNA為基礎的cDNA芯片是當今研究中倍受關注的研究手段。但是,由于存在著轉錄后加工、翻譯調控以及翻譯后加工等多種調節機制,基因的表達,或者說mRNA的水平并不必然代表蛋白質產物的水平。因此,以微陣列技術對生物樣品作整體蛋白質表達分析的蛋白芯片在后基因組時代越來越受重視??贵w芯片(AntibodyMicroarray,抗體微陣列),是蛋白質芯片的一種,是檢測生物樣品中蛋白表達模式的新方法。這種新技術使得研究人員可以在一
人凝血因子Ⅷ(FⅧ) ELISA 試劑盒說明書2014/12/01
人凝血因子Ⅷ(FⅧ)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中凝血因子Ⅷ(FⅧ)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中人凝血因子Ⅷ(FⅧ)水平。用純化的人凝血因子Ⅷ(FⅧ)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入凝血因子Ⅷ(FⅧ),再與HRP標記的凝血因子Ⅷ(FⅧ)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終
抗體保存指南2014/12/01
抗體保存得當與否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當,大部分抗體活性都可以維持數月甚至數年。本指南以abcam抗體保存方法為主,同樣也可以應用到其他絕大部分公司的抗體產品!請謹記!無論何時請按照說明書推薦的保存條件正確保存抗體!1.收到抗體后請務必在12000rpm離心20-30s后再打開管蓋進行分裝和保存!Abcam的抗體使用非常特殊的儲存管,只有在12000rpm離心20-30s才能將附著在管壁或蓋內的抗體全部離心下來。即使是在10000rpm離心也會導致離心不*,導致出現抗體
血清病2014/11/28
血清病是一種典型的Ⅲ型變態反應性疾病。機體對進入體內的異種血清各抗原成分或作為半抗原的某些藥物與體內蛋白結合形成的抗原性復合蛋白,均可產生抗體。當形成的抗體量略少于體內尚消失的抗原時,可形成沉積于血管壁上的免疫復合物,繼而激活補體系統,生成血管性物質、中性粒細胞趨化因子等,造成局部充血與水腫,中性粒細胞的浸潤和溶酶體內蛋白分解酶的釋放,導致組織的炎癥與損傷。構成血清病免疫復合物的抗體球蛋白主要是IgG,但如IgE較多,則發病時血清通透性的增加更加明顯??捎泻眍^水腫、低血壓甚至過敏性休克等。凡抗原
人白細胞介素-8(IL-8)ELISA試劑盒說明書2014/11/28
人白細胞介素-8(IL-8)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中白細胞介素8(IL-8)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人白細胞介素-8(IL-8)水平。用純化的人白細胞介素-8(IL-8)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細胞介素-8(IL-8),再與HRP標記的羊抗人抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并
人程序性死亡分子-1(PD-1)ELISA試劑盒說明書2014/11/28
人程序性死亡分子-1(PD-1)ELISA試劑盒說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人程序性死亡分子-1(PD-1)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人程序性死亡分子-1(PD-1)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用
世界抗體公司介紹2014/11/27
Santa公司是世界上zui大的抗體生產廠家,目前可提供的抗體種類多達兩萬多種,幾乎覆蓋了目前生命科學研究的各個領域,其每種抗體又有多個克隆可以選擇,還提供一些對應蛋白標準品及相關產品,如ABC試劑盒,各種標記二抗,Western試劑盒,蛋白分子量Marker,核抽提物等,為免疫學研究工作提供了極大的方便。Abcam公司是世界有名的抗體王國,以、齊全的產品、完善的網絡支持功能和強大的隊伍得到客戶的認可和贊譽。并在2004年獲得了對于生物界公司的英女王獎,擁有很好的度和口碑。產品具有以下特點:1、
如何選擇抗體(試劑銷售)2014/11/27
如何選擇抗體(上海試劑銷售科技有限公司)檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇,同時在后繼試驗中也會有不同的檢測方案,因此在選擇二抗的時候要綜合考慮一抗的類型及后繼檢測方案的要求,其中如何根據一抗的種屬來源和類型選擇二抗尤為重要。1.一抗的種屬來源:二抗應選用與使用的一抗相同的物種來源,例如:如果你的一抗是小鼠源的單克隆抗體,二抗則選抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是從兔血清里制備的兔源多克隆抗體,則相應的二抗需要選擇抗兔的二抗。即根據一抗的物種來源選擇相應的抗該物種的
人17-酮類固醇(17-KS) ELISA試劑盒說明書2014/11/26
人17-酮類固醇(17-KS)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中17-酮類固醇(17-KS)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人17-酮類固醇(17-KS)水平。用純化的人17-酮類固醇(17-KS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入17-酮類固醇(17-KS),再與HRP標記的17-酮類固醇(17-KS)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TM
血清離子常規2014/11/25
1.血清鎂(Mg):化驗介紹:鎂是人體必需的元素,與機體的糖、脂肪和核酸代謝有密切的關系。人體所需要的鎂來源于食物,由小腸吸收,腎臟排出。腎臟能夠有效的保留鎂,當體內的鎂缺少時,腎的排鎂量極少。參考值:達旦黃法:成人1.7-2.8mg/dL兒童1.4-1.9mg/dL甲基溴麝香草酚藍比色法:1.64-2.52mg/dL臨床意義:血清鎂增高:見于急慢性腎功能衰竭、甲狀腺機能減退、甲狀旁腺機能減退、阿狄森氏病、多發性骨髓瘤和嚴重脫水等。血清鎂降低:見于鎂的來源不足,如長期禁食、嘔吐、腹瀉、消化不良等
血清保存注意事項2014/11/25
血清保存注意事項(1)需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1月.由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱,必須預留定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂.(2)一般廠商提供的血清無菌,無需再過濾除菌.如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接過濾血清.(3)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿
人C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒說明書2014/11/24
人C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒說明書預期應用ELISA法定量測定人血清、血漿、細胞培養物上清或其它相關液體中C-Peptide含量。人C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心酶標免疫分析法測定標本中C-Peptide水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入C-Peptide抗原、生物素化的抗人C-Peptide抗體、HRP標記的親和素,經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化
人血小板裂解液替代胎牛血清大規模擴增人臍帶間充質干細胞2014/11/21
人血小板裂解液替代胎牛血清大規模擴增人臍帶間充質干細胞上海試劑銷售實驗室摘要背景:目前國內外大多數實驗仍采用經典的培養基和胎牛血清進行臍帶間充質干細胞培養,血清培養潛在的不安全因素限制了未來臨床應用的可行性。目的:以人血小板裂解液替代胎牛血清培養、鑒定人間充質干細胞,以期進一步應用于臨床低密度擴增人間充質干細胞。方法:人血小板裂解液通過反復凍融、離心、過濾、濃縮等方法制備。以IMDM為基礎培養基,添加5%濃縮血小板裂解液作為實驗組培養基;以添加體積分數10%胎牛血清為對照組培養基。采用酶消化法分
細胞株與細胞系的區別2014/11/21
細胞株與細胞系的區別傳代培養的細胞是細胞系中學就到這個地步吧細胞株就是從細胞系篩選出來的有特殊屬性的比如無線增值的一、體外培養細胞的種類和命名體外培養細胞的名稱,隨培養細胞技術的發展和細胞種類的增多而演變。zui早采用的名稱為細胞株(Cellstrain),以后又出現細胞系(CellLine)一詞,兩者曾一度混用致概念不明確,導致文獻中也很混亂。我國也曾有類似情況,在我國尚未制定出統一名詞前,本書用的名詞基本參考Schaeffer,W.I.(1979)和國內有關會議、以及國內外雜志常用名詞為準。
血清——天然培養基2014/11/20
天然培養基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養基,如血漿、血清、淋巴液、雞胚浸出液等。組織培養技術建立早期,體外培養細胞都是利用天然培養基。但是由于天然培養基制作過程復雜、批間差異大,因此逐漸為合成培養基所替代。目前廣泛使用的天然培養基是血清,另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是*。血清種類,目前用于組織培養的血清主要是牛血清,培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養細胞的原因:來源充足、制備技術成熟、經過長時間的應用考驗人們對其有比較深入的理
血漿與血清的區別2014/11/20
血漿與血清的區別血清血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿zui大的區別。而在凝血反應中,血小板釋放出許多物質,各凝血因子也都發生了變化。這些成分都留在血清中并繼續發生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區別之處。但大量未參
血清素2014/11/19
血清素重吸收抑制劑就是5-羥色胺重吸收抑制劑,簡稱SSRIs,百憂解(鹽酸氟西汀)的實質,是新一類的效果好而副作用較小的抗抑郁藥物。是體內產生的一種神經傳遞素;不存在于食物中。但有著作表明有營養物質可參與合成血清素,這些營養物質包括色氨酸(一種氨基酸),Ω-3脂肪酸,鎂和鋅。血清素是調節神經活動的一種重要物質。有些肌體組織當受到某些藥物作用時,可以釋放出5-羥色胺,例如一個利血平分子可以使受作用的組織釋放出幾百個5-羥色胺分子,因而產生利血平的一系列生理作用。作為自體活性物質,約90%合成和分布
細胞培養注意事項2014/11/19
細胞培養注意事項培養室內的無菌操作細胞培養實驗所需的物品、器材應進行嚴格的滅菌或購買無菌的一次性物品。玻璃瓶可擰松瓶蓋滅菌(指高壓蒸汽滅菌,以下同)或用鋁箔紙包住瓶口,和瓶蓋分別滅菌。其它玻璃和金屬器材用鋁箔紙包裹進行滅菌。玻璃吸管應塞上棉花球滅菌,然后置于烘箱中烘干。不適于進行高壓滅菌的瓶塞等其它物品,可浸泡在70%酒精中進行滅菌,然后在超凈工作臺上吹干。細胞培養液和其它不適于高壓滅菌的溶液,應通過過濾(采用0.22μm的孔徑的濾膜)滅菌。無菌培養室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖地面一次,并用
大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA 試劑盒說明書2014/11/18
大鼠免疫球蛋白M(IgM)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,組織及相關液體樣本中免疫球蛋白M(IgM)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠免疫球蛋白M(IgM)水平。用純化的抗-大鼠IgM抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入大鼠免疫球蛋白M(IgM),再與HRP標記的羊抗鼠抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成
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