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細胞培養常見問題及其解決2015/08/24

細胞培養常見問題及其解決1、如何選用特殊細胞系培養基？培養某一類型細胞沒有固定的培養條件。在MEM中培養的細胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之，MEM做粘附細胞培養、RPMI-1640做懸浮細胞培養是一個好的開始。2、何時須更換培養基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數據上之更換時間，按時更換培養基即可。3、可否使用與原先培養條件不同之培養基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基，若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存

原代細胞鑒定方法2015/08/12

原代細胞鑒定動物組織是由多種類型的細胞組成的，包括表皮細胞、成纖維細胞、內皮細胞等。分離出的細胞是否是實驗所需類型的細胞則需要進行鑒定，除了基本的形態學觀察外zui常用的就是免疫組織化學檢測。操作步驟：1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。2.用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。3.0.5%TritonX-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。4.3%H2

生物試劑銷售中心教您細胞活力如何檢測2015/08/12

生物試劑銷售中心教您細胞活力如何檢測在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞，總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力。由組織中分離細胞一般要檢查活力，以了解分離的過程對細胞是否有損傷作用；復蘇后的細胞也要檢查活力，了解凍存和復蘇的效果。細胞懸液制備后，zui常用活體染料臺盼藍對細胞染色，進行細胞計數。正常細胞胞膜完整，臺盼藍不能透過活細胞正常完整的細胞膜，故活細胞不著色；而喪失活性或細胞膜不完整的細胞胞膜通透性增加，臺盼藍能進入細胞內而使細胞著色（藍色）。操作步驟：1.配制4%臺盼藍母液：稱取

Invitrogen脂質體2000的操作流程及注意事項2015/08/07

Invitrogen脂質體2000的操作流程及注意事項Invitrogen脂質體2000的操作流程及注意事項*，Invitrogen脂質體2000是廣大老師所熟知的轉染試劑，其特點：轉染步驟快速簡便（1）DNA-陽離子脂質體試劑的復合體可以直接加入到細胞培養基中，有血清也不怕。（2）轉染后不需要除去Lipofectamine2000試劑，無需換培養基。我們介紹一下Invitrogen脂質體2000的操作流程、注意事項等。一、操作流程事實上Lipofectamine系列產品操作流程都是又快又簡單：

NK-92細胞培養說明2015/07/29

NK-92細胞NK-92細胞；中文名稱：人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞GeneralInformation:Organism:Homosapiens,humanTissue:peripheralbloodCultureProperties:Suspension，multicellaggregatesMorphology:lymphoblastBiosafetyLevel:2CultureMethod:CompleteGrowthMedium:MEMα(Gibco11900-024)+10

如何辨別胎牛血清真假！2015/07/02

如何辨別胎牛血清真假！市場上的胎牛血清種類繁多，魚龍混雜，很多科研工作者，特別是剛接觸細胞培養的人，難以分辨血清質量的優劣。生物試劑銷售中心（上海）生物科技有限公司為您總結如下：一、外觀拿到血清，zui先接觸的是血清外觀，對于缺少細胞培養經驗的人來說，外觀的判斷尤為重要。1、顏色根據血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現出黃色或紅色，我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/dl，實際上，血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響，這個指標的意義在于能體現出采血過程的嚴謹規范程度，良好的操作能降低血清的溶

復蘇細胞注意事項2015/06/18

復蘇細胞注意事項：1.收到細胞后當天換液，全部更換成客戶自己的新鮮培養基，放進培養箱，第二天再消化。2.邊觀察邊消化，根據細胞的形態，終止消化時間，采取以半分鐘間隔吹打細胞邊緣，如可吹打下來，即終止消化。客戶摸索*消化時間。3.隨細胞有一份細胞操作說明書，請客戶仔細查看。4.記得加1%雙抗，降低被污染的概率。另外盡早凍存留種，以備后用。5.售后時間為一周，于細胞本身的質量問題，而因乙方自己不當操作（不規范操作，消化過度，不加雙抗導致的污染等）導致的細胞問題不在售后范疇。6.收到細胞后，如細胞狀態

胎牛血清功能、參數以及儲存2015/06/02

胎牛血清主要功能：1）提供維持細胞指數生長的激素2）酸堿緩沖液作用3）提供蛋白酶抑制劑，使細胞傳代時細胞不受傷害4）細胞貼壁、鋪展在塑料基質上所需因子來源5）提供結合蛋白，結合或調控維生素、脂類、金屬和其他激素的結合物質的活力；與有毒金屬和熱原質結合，解毒作用。胎牛血清標準參數：1）內毒素：標準為不高于5EU/ml，含量*預示著已經污染2）總蛋白含量：胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml3）血紅蛋白：標準為不高于20mg/dl血清種類：1）胎牛血清（FBS）：八月齡胎牛心臟穿刺取血分離血清2）

預防細胞污染的注意事項2015/05/26

預防細胞污染的注意事項1.實驗進行前，超凈臺用紫外燈照射30~60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面，并開啟超凈臺風機運轉20min左右再開始實驗操作。2.實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內；實驗用品用完應移出超凈臺，以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。3.每次操作只處理一種細胞；即使不同細胞使用相同的培養基也不要共享同一瓶培養基，避免細胞間的交叉污染。4.操作時小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，

細胞計數2015/05/26

細胞計數原理：當待測細胞懸液中細胞均勻分布時，通過測定一定體積懸液中的細胞的數目即可換算出每mL細胞懸液中的細胞數量。操作步驟：1.將計數板及蓋玻片擦拭干凈，并將蓋玻片蓋在計數板上。2.輕輕吹打細胞懸液，使細胞均勻分布。吸出少許細胞懸液滴在細胞入口，使細胞懸液充滿蓋玻片和計數板之間，靜置1~2min，使細胞沉降。注意蓋玻片下不要有氣泡，也避免細胞懸液進入旁邊的槽中。3.在顯微鏡下對A/B/C/D四個大格內的細胞進行計數，壓在大格四周邊線上的細胞只計數壓在2條邊線上的細胞（如右側和下方）。若鏡下有

細胞活力檢測2015/05/26

細胞活力檢測在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞，總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力。由組織中分離細胞一般要檢查活力，以了解分離的過程對細胞是否有損傷作用；復蘇后的細胞也要檢查活力，了解凍存和復蘇的效果。細胞懸液制備后，zui常用活體染料臺盼藍對細胞染色，進行細胞計數。正常細胞胞膜完整，臺盼藍不能透過活細胞正常完整的細胞膜，故活細胞不著色；而喪失活性或細胞膜不完整的細胞胞膜通透性增加，臺盼藍能進入細胞內而使細胞著色（藍色）。操作步驟：1.配制4%臺盼藍母液：稱取4g臺盼藍，加少量蒸餾水

原代細胞鑒定2015/05/26

原代細胞鑒定動物組織是由多種類型的細胞組成的，包括表皮細胞、成纖維細胞、內皮細胞等。分離出的細胞是否是實驗所需類型的細胞則需要進行鑒定，除了基本的形態學觀察外zui常用的就是免疫組織化學檢測。操作步驟：1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。2.用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。3.0.5%TritonX-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。4.3%H2

HT-22細胞復蘇注意事項2015/05/26

HT-22細胞，即為小鼠海馬神經元細胞，試劑銷售提供高品質HT-22細胞，培養條件：GIBCO(高糖DMEM+10%胎牛血清)。HT-22細胞復蘇注意事項：1.收到細胞后當天換液，全部更換成客戶自己的新鮮培養基，放進培養箱，第二天再消化。2.邊觀察邊消化，根據細胞的形態，終止消化時間，采取以半分鐘間隔吹打細胞邊緣，如可吹打下來，即終止消化。客戶摸索*消化時間。3.隨細胞有一份細胞操作說明書，請客戶仔細查看。4.記得加1%雙抗，降低被污染的概率。另外盡早凍存留種，以備后用。5.售后時間為一周，于細

胃癌細胞系AGS培養說明2015/05/07

胃癌細胞系AGS培養說明細胞名稱胃癌細胞系AGS種屬人組織來源胃生長狀態貼壁生長細胞形態上皮樣培養條件培養基類型：RPMI1640（HycloneSH30809.01B)培養基FBS（BOVOGEN胎牛血清貨號：SFBS-B):10%抗生素：雙抗培養條件：37℃，CO2:5%傳代方法收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態：如果沒長滿，將培養瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮培養液，繼續培養。如果細胞已經長滿（約80%-90%）則傳代后繼續培養。貼壁細胞傳代方法：1棄去培養基，用不含鈣、鎂

細胞換液、復蘇及凍存2015/04/17

細胞換液、復蘇及凍存用10％胎牛DMEM培養液，37℃下置于5％CO2培養箱中。待細胞融合至80％，用0．25％胰酶消化傳代后接種(細胞密度5XlO4)于培養瓶或孔板，待細胞融合至約70％后用于實驗。細胞株培養方法如下：1.貼壁細胞換液：1）吸光培養瓶中的培養液。2）用1xD-hank`s洗一次。3）加入適量的新鮮培養液，接種于新的培養瓶內，放入培養箱內培養。2.懸浮細胞換液1)吸光培養瓶中的培養液放入15ml離心管中離心1500rpm5min。2)細胞沉淀用1xD-hank`s洗一次。3)加入

TPC-1人乳頭瘤狀甲狀腺癌細胞說明書2015/04/02

Designations:BiosafetyLevel:MediumSerum:Organism:Source:Homosapiens(human)Organ:thyroidDisease:papillomaMorphology:GrowthProperties:Propagation:epithelialadherent&SeePropagationTPC-11細胞庫ThebasemediumforthiscelllineisformulatedRPMI-1640Medium.Tomaketh

試劑銷售細胞產品目錄2015/04/01

如您有細胞株需求，請來電/:：王HTCC編號細胞名稱種屬正常細胞系：1L-02(人肝細胞)人2QSG-7701(人胚肝細胞,進口胎牛血清)人3ChangLiver(CCL13，張氏肝細胞)人4LX-2(肝星形細胞,進口胎牛血清培養)人5HSC-T6(鼠肝星形細胞,進口胎牛血清)大鼠6CFSC-8B(鼠肝星形細胞,進口胎牛血清)大鼠7CFSC-2G(鼠肝星形細胞,進口胎牛血清)大鼠8WB-F344(肝上皮樣干細胞,進口胎牛血清)大鼠9Min6(胰島?細胞,進口胎牛血清培養)小鼠10C2C12(鼠肌

293細胞和293T細胞的區別2015/03/30

細胞名稱293和293T種屬人組織來源293細胞是轉染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞系，293T細胞由293細胞派生，同時表達SV40大T抗原，含有SV40復制起始點與啟動子區的質?？梢詮椭啤Ｓ肅a3(PO4)2轉染效率可高達50%。蛋白表達水平高，轉染后2-3天用堿性磷酸酶分析可較容易地檢測到表達的蛋白。瞬時轉染293T細胞是過表達蛋白并獲得細胞內及細胞外（分泌的或膜）蛋白的便捷方式。形態特點上皮細胞致瘤性+產物或抗原大T抗原染色體核型亞三倍體人細胞系。染色體眾數為64，30%的細胞有64條染

人結腸癌細胞系 信息表2015/03/25

細胞信息表細胞名稱結腸癌細胞種屬人生長狀態貼壁生長培養條件培養基類型：DMEM（HycloneSH30243.01)培養基FBS（SCL澳洲胎牛血清(貨號:S20100A)):10%抗生素：雙抗培養條件：37℃，CO2:5%傳代方法收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態：如果沒長滿，將培養瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮培養液，繼續培養。如果細胞已經長滿（約80%-90%）則傳代后繼續培養。貼壁細胞傳代方法：1棄去培養基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。2加1ml0.25%的胰酶（

人淋巴細胞分離液使用說明2015/03/23

人淋巴細胞分離液使用說明本品為帶有乳光或微乳光的滅菌水溶液。主要成分是葡聚糖與泛影酸葡甲胺。適用于從血液及組織勻漿中分離所需細胞，在醫療和醫學生物中廣泛應用。其他人及動物多種比重細胞分離液。注：因不同種屬不同比重分離液的細胞離散系數及細胞帶電不同，所以用戶應提供所需分離液的比重、動物的種屬及被分離細胞的名稱。使用方法例：取抗凝血1ml，與Hank’s液1:1混勻后，小心加于2ml的細胞分離液之液面上，以2000轉/分離心(半徑15cm水平轉子)15分鐘，收集界面上的細胞，放入含Hank’s液4-