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單層細(xì)胞的傳代2022/12/5
原理去除培養(yǎng)基,加人胰蛋白酶短暫作用,孵育,以培養(yǎng)基分散細(xì)胞,計(jì)數(shù),稀釋并再接種。材料與儀器A549細(xì)胞WI-38MRC-5胰蛋白酶D-PBS70%乙醇噴壺生長培養(yǎng)基吸管離心管培養(yǎng)瓶移液器吸耳球吸水紙...
大鼠肝細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn)2022/12/5
原理經(jīng)肝門靜脈或肝門靜脈分支插管,用無鈣緩沖液灌洗肝15min,再用酶溶液灌洗15min。收集和洗滌細(xì)胞,計(jì)數(shù)有活力的肝細(xì)胞。材料與儀器L-15Leibovitz培養(yǎng)液HamF12培養(yǎng)液胞培養(yǎng)液HMM...
蛋白質(zhì)合成實(shí)驗(yàn)2022/12/5
材料與儀器步驟材料無菌細(xì)胞培養(yǎng),如1X104~1X106個細(xì)胞,24孔板3H-亮氨酸。無血淸培養(yǎng)基中2MBq/ml(~50uCi/ml)(特異活性并不重要,因?yàn)樗鼘⒂膳囵B(yǎng)基中的亮氨酸濃度決定)非無菌S...
分離ARVM細(xì)胞2022/12/5
材料與儀器鼠KH緩沖液混合氣體對流工作臺或?qū)恿魇匠瑑襞_乙酉迷罩冷凝器循環(huán)水浴和水浴搖床圈型架蠕動泵臺式醫(yī)用離心機(jī)無菌燒杯ColorpHastpH試紙步驟一、ARVM細(xì)胞分離的準(zhǔn)備工作1.準(zhǔn)備如下設(shè)備及...
分離雞胚背根神經(jīng)節(jié)2022/12/2
材料與儀器酶溶液DRG離心管培養(yǎng)皿解剖顯微鏡步驟解剖前在15ml離心管中配制酶溶液,置37℃水浴特用。2.解剖胚胎,解剖全過程保持組織濕潤。(1)殺死胚胎,去腿,放于100mm培養(yǎng)皿。(2)用鈍頭剪刀...
分離培養(yǎng)細(xì)胞2022/12/2
原理骨豁肌源性成肌細(xì)胞能夠培養(yǎng)從幾種成年動物骨骼肌分離的成肌細(xì)胞。在培養(yǎng)條件下,成肌細(xì)胞仍繼續(xù)表達(dá)一些分化特征。成肌細(xì)胞稱衛(wèi)星細(xì)胞,分化早期的步驟與骨骼肌很相似。成肌細(xì)胞在培養(yǎng)底物上增殖和遷移,然后成...
E玫瑰花環(huán)形成試驗(yàn)2022/12/2
原理正常人外周血中T細(xì)胞在體外能直接和綿羊紅細(xì)胞(SRBC)結(jié)合形成玫瑰花樣細(xì)胞團(tuán)。這是因?yàn)槿说腡細(xì)胞膜上具有能和SRBC膜上的糖蛋白相結(jié)合的受體,稱為E受體。已證實(shí)E受體是人T細(xì)胞所*的表面標(biāo)志,因...
多潛能干細(xì)胞的誘導(dǎo)2022/12/2
簡介多潛能干細(xì)胞(in-ducedpluripotentstemcells,iPS)技術(shù)不僅可以解決胚胎干細(xì)胞來源引起的倫理問題,而且自體iPS細(xì)胞可以避免異體來源胚胎干細(xì)胞移植引起的免疫排斥反應(yīng)。目...
大鼠肝癌模型法2022/12/2
原理1.Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是一條在生物進(jìn)化中極為保守的通路。在正常的體細(xì)胞中,β-catenin只是作為一種細(xì)胞骨架蛋白在胞膜處與E-cadherin形成復(fù)合體對維持同型細(xì)胞的黏附...
端粒顯示實(shí)驗(yàn)2022/12/1
簡介端粒(telomere)是真核細(xì)胞染色體末端的DNA重復(fù)序列,它與多種端粒結(jié)合蛋白結(jié)合在一起,發(fā)揮重要的生物學(xué)功能,在細(xì)胞分裂的過程中,盡管端粒也會不斷的縮短,但可以通過端粒酶的催化,以自身RNA...
蛋白質(zhì)分離實(shí)驗(yàn)2022/12/1
簡介蛋白質(zhì)分離的方法主要有3種:SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法分離蛋白質(zhì)、免疫沉淀法分離蛋白質(zhì)和雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳法分離蛋白質(zhì)。原理SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法分離蛋白質(zhì)的基本原理是蛋白質(zhì)在SDS和巰基...
EB病毒轉(zhuǎn)化成淋巴細(xì)胞2022/12/1
材料與儀器全血刀豆凝集素ARPMI生長培養(yǎng)基離心管步驟混合10ml全血和10mlRPMI生長培養(yǎng)基。生長培養(yǎng)基(RPMI1640800ml,F(xiàn)BS200ml,2mmol/L-谷氨酰胺,5μg/ml兩性...
多能ES細(xì)胞的培養(yǎng)2022/12/1
材料與儀器PBS胰酶溶液MEF滋養(yǎng)板巴斯德吸管ES生長培養(yǎng)基步驟1.準(zhǔn)備下列試劑和材料:60mmMEF滋養(yǎng)板(接種不能超過7天)帶棉塞無菌巴斯德吸管無Ca2+和Mg2+PBSES生長培養(yǎng)基胰酶溶液2....
DAPI染DNA的原理及使用方法2022/12/1
材料與儀器DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole),分子式為C16H15N5·2C3H6O3,分子量457.48。DAPI是一種能夠與DN...
測定蛋白含量都有哪些方法?2022/11/1
蛋白的含量的測定方法主要有紫外分光光度法、Lowry法、BCA法等。紫外分光光度法原理蛋白質(zhì)中的酪氨酸和色氨酸殘基的苯環(huán)在275~280mm有一紫外吸收峰。在一定濃度范圍內(nèi),其在280mm的吸光度與蛋...

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