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細胞活性測定方法大全2023/1/10
代謝增殖測定MTT檢測法活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶，能使額外添加的MTT還原為不溶于水的藍紫色結晶甲瓚（Formazan），并沉積在細胞中，死細胞則無此現象。接著用二甲基亞砜（DMSO）溶解沉積在細...
血清沉淀知多少2023/1/10
血清沉淀是什么？血清中經常會出現肉眼可見的沉淀，其成分有多種類型，產生的原因有很多，主要有纖維蛋白、磷酸鈣還有一些其它成分。1.纖維蛋白（Fibrin）血清中肉眼可見的沉淀物大多屬于這一類型。由于在生...
T淋巴細胞轉化實驗2023/1/10
原理T細胞在體外培養時，受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激后，可出現細胞體積增大，代謝旺盛，蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化。淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平，因此可...
消除微生物污染2023/1/6
原理通過沖洗單層培養物或通過離心重懸非貼壁細胞，以高濃度抗生素清洗培養物數次，然后將培養物傳代，用加抗生素的培養基傳三次，再用不加抗生素的培養基傳三次，每次傳代后都要檢測是否污染。材料與儀器DBSS高...
分離人臍靜脈內皮細胞2023/1/6
材料與儀器D-PBSA胰蛋白酶EDTA人臍帶膠原蛋內酶H冷的新生小牛血Hank平衡鹽溶液HBSSPSG70%乙醇HUVRC生長培養液培養瓶手術刀和22號刀片手術針20ml注射器鱷魚夾動脈夾尖頭剪棉紙鋁...
小鼠胚胎MEF細胞的提取2023/1/6
小鼠胚胎MEF細胞的提取步驟：1.將新鮮收獲的胚胎放入10厘米的細胞培養皿中2.用PBSA覆蓋胚胎，取出胎盤和其他母體組織3.切掉頭頂（眼睛及以上），取出內臟4.保存頭部/卵黃囊進行DNA分離以進行基...
從哺乳動物細胞中制備核和細胞質提取物2023/1/6
材料與儀器轉瓶或單層培養的哺乳動物細胞（如HeLa細胞）PBS低滲緩沖液高鹽緩沖液含1.2molLKCl透析緩沖液液氮貝克曼JS4.2轉子或相當的轉子50mL圓錐形刻度聚丙烯離心管（對較小體積的提取物...
單層細胞在細胞瓶中的接種2023/1/6
原理單層生長的細胞增殖，融合成片，并長滿細胞瓶表面。有些細胞靠頻繁地換液可維持細胞在平臺期數天至數周；而許多其他細胞系需要胰蛋白酶處理、傳代培養后才能存活下來，用胰蛋酶處理可將細胞從生長物表面分離下來...
細胞凍存實驗2023/1/5
原理傳統上的細胞凍存（甘油/二甲基亞砜做保護劑）講求的是：慢凍速溶。細胞凍存時向培養基中加入的甘油或二甲基亞砜（DMSO），這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外，...
免疫熒光抗體法2023/1/5
原理用人結腸癌細胞為免疫原，免疫小鼠，制得鼠抗人結腸癌細胞表面抗原（Ag）的單克隆抗體IgG（第一抗體），二者可以發生特異性的抗原抗體反應，形成抗原抗體復合物，再加入市售（也可自制）的熒光標記的羊抗鼠...
神經膠質細胞培養實驗2023/1/5
材料與儀器大鼠CMF-Hanks液胰蛋白酶DMEMF12水浴鍋培養箱步驟一、原代培養1.選用生后1周的新生大白鼠，用碘酒,酒精棉球消毒，斷頭取其大腦皮層組織。2.解剖顯微鏡下，剝離腦膜，切除大腦髓質部...
小鼠肝細胞培養實驗2023/1/5
原理直接從生物體內獲取組織細胞進行的首-次培養稱為原代細胞培養。原代培養是建立各種細胞系的第一步，是從事培養工作的人員應熟悉和掌握的最基本的技術。根據培養方法不同分為組織塊培養法和單層細胞培養法。材料...
斑馬魚胚胎細胞的培養2023/1/5
原理收集胚胎，除去絨毛膜，用胰蛋白酶分散胚胎細胞，然后在胚胎成纖維細胞飼養層上培養從斑馬魚囊胚和原腸期胚獲得的原代細胞。材料與儀器鏈酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmolLEDTA胚胎成...
原代細胞怎么永生化2023/1/4
原代細胞都無法擴增幾輪增殖，這被稱為Hayflick極限，因為每一輪的增殖都會縮短端粒。當端粒達到臨界縮短長度時，DNA損傷被觸發，導致細胞衰老，如果你試圖培養一個珍-稀原代細胞群，當心它最終會死亡，...
內皮細胞實驗的新秀來啦2023/1/4
內皮細胞實驗的新秀來啦，HECV人臍靜脈內皮細胞來啦，HECV細胞是不-可-多得的永生化內皮細胞株，代次靠前，一周可以傳4-5次，8-12小時可達到5倍增，遠遠超于HMEC-1細胞株和HUVEC-T1...
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