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β-Actin內參蛋白原理和應用

β 肌動蛋白抗體提供了一種特異性的工具，用于研究 β 肌動蛋白的胞內分布、細胞骨架的靜態和動態特性。由于 β 肌動蛋白在所有真核細胞中普遍都有表達，因此其經常被用作上樣對照。β 肌動蛋白是哺乳動物中已鑒別出的六種肌動蛋白亞型之一。肌動蛋白是細胞骨架的主要組分， β 肌動蛋白主要在非肌細胞中表達并控制細胞的結構和運動。優質 Invitrogen β 肌動蛋白抗體可滿足多種研究需求。為使您更方便，我們還提供熒光和酶偶聯版本。

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β-Actin內參蛋白的應用

使用 70% 融合對數期 NIH-3T3 細胞進行 β 肌動蛋白的免疫熒光分析。將細胞用 4％ 多聚甲醛固定 10 分鐘，用 0.1％ Triton X-100 透化 10 分鐘，并在室溫下用 1% BSA 封閉 1 小時。使用 0.1% BSA 中 2µg/mL 的β 肌動蛋白兔多克隆抗體（貨號 PA1-46296）標記細胞并在室溫下孵育 3 小時，然后用山羊抗兔 IgG (H+L) Superclonal 二抗、Alexa Fluor® 488 偶聯物（貨號 A27034）以 1:2000 稀釋比在室溫下標記 45 分鐘（圖 A：綠色）。細胞核（圖 b：藍色）用 SlowFade Gold 抗淬滅封片劑 ，帶DAPI（貨號 S36938）染色。F 肌動蛋白（圖 c：紅色）采用羅丹明鬼筆環肽（貨號 R415，1:300）進行染色。圖 d 代表合并圖像，表示細胞質的定位情況。圖 e 表示無一抗對照。這些圖像是在放大60倍的情況下采集的。

與同型對照（藍色）相比，A431 細胞（綠色）中 β 肌動蛋白的流式細胞術分析。收獲細胞并用 PBS 洗滌。在室溫下，用 2% BSA-PBS 溶液封閉細胞 30 分鐘，并與 β 肌動蛋白上樣對照單克隆抗體（BA3R），生物素（貨號號 MA5-15739-BTIN）進行孵育。然后將細胞在室溫下用與 DyLight 488 染料偶聯的二抗避光孵育 40 分鐘，并重懸于 PBS 中以進行 FACS 分析。

細胞：A431

濃度：2 ug/ 檢測（100 uL）

理論位置：細胞質

通過將各種細胞裂解物上樣到 4-20% Tris-HCl 聚丙烯酰胺凝膠上，對 β 肌動蛋白進行蛋白質印跡分析。將蛋白轉印到低熒光 PVDF 膜上，并用與 Alexa Fluor 488 染料（貨號 MA1-140-A488）偶聯的 β 肌動蛋白單克隆抗體孵育。

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