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DNA聚合酶的選擇是聚合酶鏈反應(PCR)中的重要決策之一，相較于準確度需求較低的菌落PCR等分析實驗，蛋白表達、突變檢測、基因篩選等準確度要求較高的實驗，則需要選擇高保真DNA聚合酶，以保證擴增過程中的保真度。什么是DNA聚合酶的保真度DNA聚合酶的保真度指的是其進行準確擴增模板的能力，確保DNA序列的高度準確擴增。高保真酶具有3'到5'核酸外切酶的活性，可對聚合反應時錯配的堿基進行切除，從而保證擴增的準確性。錯配率是高保真DNA聚合酶保真性的一個通用標準，錯配率越低保真性越好。保真度常用錯配
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S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine，SAM)是一種重要的中間代謝產物，可作為甲基供體、丙氨基供體及巰基化合物前體等參與體內眾多生化反應，例如核酸、蛋白質、磷脂質和維生素等合成，也參與半胱氨酸、谷胱甘肽、多胺以及輔酶A和牛磺酸等含硫化合物的相互轉化等[1]。SAM是雙手性物質,有兩種異構體:(+)-SAM和(-)-SAM,只有(-)-SAM具有生物活性[2]。SAM的制備方法主要有化學合成法、酶促合成法、發酵法等。在現代生物學研究中，SAM也作為mRNA體外合成穩定性修飾的
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這才是CRISPR基因編輯實驗成功的關鍵點！導讀2021年8月5日，美國加州大學伯克利分校的JenniferDoudna團隊在NatureChemicalBilology發文稱開發了一種基于CRISPR的核酸檢測新技術來檢測xinguan，最快20min完成檢測，較于傳統的RT-qPCR檢測方法更快速，這是CRISPR在病毒檢測領域應用的又一大進步。CRISPR(ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats)即成簇規律間隔的短回文重復序
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一鍵收藏：讓DNA甲基化觸手可得！PartⅠ何為DNA甲基化？DNA甲基化（DNAmethylation）是一種重要的表觀遺傳學標記。是指在DNA甲基化轉移酶（DNMT）催化下，以S-腺苷甲硫氨酸為甲基供體，將活性甲基轉移至DNA鏈中特定堿基上的化學修飾過程。DNA甲基化與基因的調控表達，染色質結構，基因印記，X染色體失活，衰老人類腫瘤發生中發揮重要作用。圖1.DNA甲基化的形成（圖片來源于網絡）PartⅡDNA甲基化功能基因表達調控生物體內，DNA復制后胞嘧啶的甲基化會改變DNA的構象，使DN
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雙熒光素酶報告基因檢測系統——更簡便、更靈敏、更準確自1990年螢光素酶生物傳感器技術誕生，時至今日，螢光素酶報告基因的檢測系統被廣泛應用于細胞信號通路、siRNA/miRNA、免疫應答、藥物篩選等研究。螢光素酶報告基因檢測系統中具有代表性的是螢火蟲螢光素酶報告基因和海腎螢光素酶報告基因，由于兩種酶底物和發光顏色的區別，且在動物體內無內源性表達，使其在單、雙報告實驗中得到廣泛應用。檢測原理螢火蟲螢光素酶是一種胞內蛋白，大小為61KDa。在氧氣、ATP和鎂離子同時存在的條件下，催化底物螢火蟲螢光素
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CUT&Tag（CleavageUnderTargetsａndTagment）作為一種新興的DNA蛋白互作研究技術，憑借其信噪比高，可重復性好，實驗周期更快等優勢，在植物以及動物細胞中的成功應用與科研文章的發表[1-2]，受到廣大科研工作者的信賴。CUT&Tag是蛋白質與DNA互作研究的革新技術，其核心技術為pA/G-Tn5Transposase，將ProteinA/G與Tn5轉座酶進行融合，使得與抗體結合的同時，Tn5切割核小體上纏繞的DNA片段，獲得目的序列并完成文庫構建，實現：上班拿到細胞
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手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列：1.1提取高品質RNA
手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列：1.1提取高品質RNARNA提取是RT-qPCR實驗成功的首要步驟，RNA的質量直接關乎RT-qPCR實驗的結果。但是在實驗過程中我們經常會碰到RNA提取實驗翻車的情況，主要是因為RNA的分子結構不穩定和無處不在的RNase對RNA的降解造成的。由此可見，想要提取到高質量的RNA并非易事。今天，小翌主要從樣本選擇、樣本采集與保存、RNA提取這三個方面來闡述RNA提取過程需注意的關鍵要點，以輔助后續的qPCR實驗順利進行。樣本的選擇樣本最好選擇處于生長旺盛 -
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