TMT磷酸化蛋白質組學檢測技術服務詳情介紹

TMT磷酸化蛋白質組學是一種基于TMT（Tandem Mass Tag）定量標記技術的高通量磷酸化蛋白質研究方法，主要用于研究蛋白質磷酸化修飾的動態變化及其在細胞信號傳導、疾病發生和藥物作用中的調控機制。蛋白質磷酸化是翻譯后修飾之一，廣泛參與細胞周期調控、代謝調節、免疫應答等生物過程。TMT技術結合磷酸化修飾富集策略和高分辨率質譜分析，使得研究者能夠在多個樣本間進行jīngzhǔn的磷酸化蛋白定量分析，并挖掘關鍵的磷酸化調控網絡。TMT磷酸化蛋白質組學在癌癥、神經退行性疾病、心血管疾病及新型藥物開發等研究中具有廣泛應用，為揭示疾病發生機制和尋找潛在的藥物靶點提供了數據支持。TMT磷酸化蛋白質組學的主要優勢體現在其高通量、高精度和良好的數據可重復性。相比于傳統的磷酸化蛋白質組學研究方法，TMT技術能夠在一次實驗中同時分析多個樣本，顯著提高實驗效率，并減少實驗間的批次效應。此外，TMT標記在肽段水平上進行，使得定量數據更加穩定可靠。但是該技術也存在一定的挑戰，例如，共流干擾（co-isolation interference）可能影響定量精度，特別是在磷酸化修飾檢測中，因磷酸基團的不穩定性可能導致部分肽段的信號損失。

TMT磷酸化蛋白質組學的實驗流程涵蓋多個關鍵步驟，包括樣本制備、TMT標記、磷酸化肽段富集、液相色譜分離、質譜分析和數據處理。首先，從組織、細胞或生物體液中提取總蛋白并通過yídànbáiméi等酶切割成多肽混合物。隨后，利用TMT標簽對不同實驗組的肽段進行化學標記，確保在后續質譜分析中能夠區分不同樣本的來源。由于磷酸化修飾通常以低豐度形式存在，需要采用磷酸化特異性富集策略，如金屬氧化物親和色譜（IMAC）、èryǎnghuàtài（TiO?）微球富集等方法，提高磷酸化肽段的檢測靈敏度。接著，富集后的磷酸化肽段通過高效液相色譜（HPLC）進行分級分離，降低樣本復雜度，并進入高分辨率質譜儀（如Orbitrap、Q-TOF）進行深度分析。在質譜的MS2或MS3階段，TMT標簽釋放出特定質量的報告離子信號，研究者可通過這些信號計算各個樣本中的磷酸化肽段相對豐度，從而獲得全局性的磷酸化蛋白定量信息。zuì終，利用生物信息學工具（如Proteome Discoverer、MaxQuant等）進行蛋白質鑒定、磷酸化位點解析及功能富集分析，以揭示潛在的信號通路和調控機制。

TMT磷酸化蛋白質組學的數據分析涉及多個關鍵環節，包括磷酸化蛋白鑒定、定量計算、差異磷酸化分析、信號通路富集及網絡構建。研究者首先利用數據庫搜索算法（如Sequest、Mascot）鑒定磷酸化蛋白及其修飾位點，并通過統計學方法篩選在不同實驗組間發生顯著變化的磷酸化肽段。這些差異磷酸化位點通常對應于關鍵的信號通路節點，如MAPK、PI3K-Akt、JAK-STAT等信號通路，它們在細胞增殖、分化、代謝調控等過程中發揮核心作用。此外，利用KEGG、GO等數據庫進行功能富集分析，可以揭示磷酸化蛋白在特定生物學過程中可能的作用。

隨著技術的進步，TMT磷酸化蛋白質組學正朝著更高靈敏度、更高覆蓋度和更低背景噪音的方向發展。例如，改進的磷酸化富集方法，如MOAC-Ti4+、聚多巴胺涂層磁性微球等，顯著提高了低豐度磷酸化肽段的檢測效率。

百泰派克生物科技依托優良的質譜平臺和深厚的蛋白質組學研究經驗，提供高質量的磷酸化蛋白質組學分析服務。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對蛋白質序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務，包括對蛋白質的氨基酸組成分析，N端測序，C端測序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白質N端序列分析服務。對于未知理論序列的蛋白質，提供基于從頭測序法的蛋白質從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優勢：

1.采用目前世界上優良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、蛋白質組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC，提供定量蛋白質組學、靶向蛋白質組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種蛋白質組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析，發現新的生物標記物;

2.體內體外多種蛋白質標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高，實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統準確。

三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質量譜，zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。

※服務優勢：

1.技術優良，*技術空白

采用金屬標記抗體技術，避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右，而流式質譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現了數量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外，質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術，MALDI TOF，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從蛋白質、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析，到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務，幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質譜多組學優質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，建立了完備的質量體系，數據冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術服務，支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系，zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務；

3.業務范圍覆蓋蛋白質組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等；

4.七大質量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!

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