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?講解細(xì)胞凍存需要注意的幾個(gè)細(xì)節(jié)2021/11/08: 我們都知道，細(xì)胞如果要長期保存，需要凍存起來放液氮保存。那怎么樣凍存細(xì)胞才能保證細(xì)胞能正常復(fù)蘇，不至于凍存死亡呢？下面我們就來講講細(xì)胞凍存應(yīng)該注意的一些地方。1.保持凍存前細(xì)胞狀態(tài)良好凍存前一定要保證細(xì)胞狀態(tài)良好，細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長期，否則不管后面怎么處理，凍存后的細(xì)胞狀態(tài)必然有影響。若細(xì)胞密度偏高，培養(yǎng)基已經(jīng)略微變黃，細(xì)胞狀態(tài)正常，需要換液培養(yǎng)2h以上再凍存細(xì)胞；若已*變黃，細(xì)胞死亡超過20%，需要傳代后再重新培養(yǎng)至狀態(tài)正常后再凍存細(xì)胞。2.消化、吹打細(xì)胞按盡量輕柔如何正確消化、吹打細(xì)胞在前面已

一起來比較一抗和二坑2021/11/03: 第一抗體就是平常所說的抗體，即能和抗原特異性結(jié)合。第二抗體是能和抗體結(jié)合的，即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。一抗是針對(duì)抗原的抗體，二抗是針對(duì)一抗的抗體。即抗體也可以充當(dāng)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。也就是說，抗原進(jìn)入機(jī)體刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答，由B細(xì)胞可以產(chǎn)生與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特殊蛋白質(zhì)。一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的物質(zhì)的基團(tuán)，而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團(tuán)（底物和二抗）。一抗：可以特異結(jié)合底物，就是識(shí)別出我們想要檢測的東西。一抗和底物結(jié)合與否用肉眼是看不出來的。二抗：可以和一

小鼠白介素24elisa檢測試劑盒特點(diǎn)與樣品收集2021/10/27: 小鼠白介素24elisa檢測試劑盒特點(diǎn)：1.即開即用，用戶只需要提供DNA模板。2.引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增巴戟天，與其他植物沒有交叉反應(yīng)。3.提供陽性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。4.PCRmix中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。5.本大鼠elisa試劑盒足夠做40μL體系的PCR50次，但只能用于科研。小鼠白介素24elisa檢測試劑盒樣品收集:1.血清：全血樣品于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管

敘述細(xì)胞因子的六種類2021/10/20: 細(xì)胞因子(Cytokine,CK)是細(xì)胞間相互作用的一種化學(xué)物質(zhì)，由免疫細(xì)胞和非免疫細(xì)胞合成分泌的一類有多種生物活性的小分子多肽或糖蛋白。細(xì)胞因子最早是從淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的，因此曾被稱為淋巴因子或單核因子，隨后研究發(fā)現(xiàn)機(jī)體中的多種細(xì)胞都具有分泌這些蛋白的功能。細(xì)菌、病毒等微生物與物理或化學(xué)因素對(duì)機(jī)體的損傷都可以激發(fā)細(xì)胞因子的產(chǎn)生，而細(xì)胞因子又能殺滅細(xì)菌和抑制病毒，達(dá)到保護(hù)機(jī)體的目的。細(xì)胞因子的六種類：（1）白細(xì)胞介素(Interleukin,IL-s)：由白細(xì)胞和其他免疫細(xì)胞分泌的，在白

?細(xì)胞培養(yǎng)五個(gè)基本條件2021/10/11: 細(xì)胞培養(yǎng)(cellculture)也稱細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞，這是克隆技術(shù)必要的環(huán)節(jié)，而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。細(xì)胞培養(yǎng)基本條件：1、合適的細(xì)胞培養(yǎng)基合適的細(xì)胞培養(yǎng)基是體外細(xì)胞生長增殖的最重要的條件之一，培養(yǎng)基不僅提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生長增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，而且還提供培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。2、優(yōu)質(zhì)血清目前，大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清。血清是細(xì)胞培養(yǎng)液中最重要的成分之一，含有細(xì)胞生長

培養(yǎng)凍存的細(xì)胞具體過程2021/10/08: 培養(yǎng)凍存的細(xì)胞具體過程：(1)將一管細(xì)胞從液氮罐中取出，注意保護(hù)手和眼睛。(2)將凍存管快速的放入37℃水浴中，輕輕握住并旋轉(zhuǎn)，直到管內(nèi)物體*融化。(3)將凍存管立即從水浴中拿出，擦干，轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。(4)用70％的酒精沖洗凍存管，然后擦去多余酒精。(5)打開蓋子，注意手指不要碰到里面的螺紋（注意，由于凍存管有負(fù)壓，開蓋時(shí)可能會(huì)有少量溢出，這是正常現(xiàn)象）。(6)用多聚賴氨酸（或參照說明書）包被培養(yǎng)瓶。多數(shù)細(xì)胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個(gè)細(xì)胞。(7)蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子，輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞

細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別2021/09/27: 細(xì)胞株(CellStrain):也就是說，細(xì)細(xì)胞群胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。原代培養(yǎng)物經(jīng)第一次傳代成功后即為細(xì)胞系(cellline)細(xì)胞株：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳10代左右就不容易傳下去了，細(xì)胞的生長就會(huì)出現(xiàn)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去，這些存活的細(xì)胞一般能夠傳40-50代，這種傳代細(xì)胞叫作細(xì)胞株。細(xì)胞系：細(xì)胞株細(xì)胞的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變，當(dāng)細(xì)胞株

載脂蛋白ELISA檢測試劑盒操作步驟與注意事項(xiàng)2021/09/24: 操作步驟：1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。36ng/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液18ng/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液9ng/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液4.5ng/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.25ng/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑

ELISA實(shí)驗(yàn)操作五個(gè)要點(diǎn) ?2021/09/15: 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù)。該技術(shù)可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等，具有快速、靈敏、簡便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。ELISA實(shí)驗(yàn)操作五個(gè)要點(diǎn)如下：1.試劑的準(zhǔn)備按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。2.標(biāo)本的

講解質(zhì)粒抽提步驟2021/09/02: 質(zhì)粒抽提（PlasmidExtraction）方法即去除RNA，將質(zhì)粒與細(xì)菌基因組DNA分開，去除蛋白質(zhì)及其它雜質(zhì)，以得到相對(duì)純凈的質(zhì)粒。提取質(zhì)粒DNA的方法有很多種，從提取產(chǎn)量上分可分為微量提取、中量提取、大量提取，從使用儀器上分可分為一般提取和試劑盒方法提取，從具體操作方法分可以分為堿裂解法、煮沸法、牙簽法等，各種不同的方法各有其優(yōu)缺點(diǎn)，根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康目梢圆捎煤线m的提取方法。Ⅰ.使用質(zhì)粒提取試劑盒提取質(zhì)粒時(shí)請(qǐng)參考具體試劑盒的操作說明。如Omega公司的E.Z.N.A.®PlasmidMi

講解對(duì)照品與標(biāo)準(zhǔn)品知識(shí)課堂2021/08/25: 對(duì)照品和標(biāo)準(zhǔn)品一樣是指國家藥品標(biāo)準(zhǔn)中用于鑒別、檢查、含量測定、雜質(zhì)和有關(guān)物質(zhì)檢查等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，它是國家藥品標(biāo)準(zhǔn)不可分割的組成部分。國家藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是國家藥品標(biāo)準(zhǔn)的物質(zhì)基礎(chǔ)，它是用來檢查藥品質(zhì)量的一種特殊的專用量具;是測量藥品質(zhì)量的基準(zhǔn);也是作為校正測試儀器與方法的物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)。在藥品檢驗(yàn)中，它是確定藥品真?zhèn)蝺?yōu)劣的對(duì)照，是控制藥品質(zhì)量必須用的工具。一、概念：對(duì)照品與標(biāo)準(zhǔn)品是2個(gè)不同的概念，中國藥典凡例中已有明確的定義:文獻(xiàn)中常將2種概念混淆，認(rèn)為對(duì)照品就是標(biāo)準(zhǔn)品，是1種物質(zhì)2種提法而已[1，2]，造成錯(cuò)

實(shí)驗(yàn)中免疫組化結(jié)果評(píng)判的三種方法2021/08/11: 免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry)又稱免疫細(xì)胞化學(xué)，是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理，組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原和一抗結(jié)合，再利用一抗與標(biāo)記生物素的二抗進(jìn)行反應(yīng)，前者再用標(biāo)記辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AKP)等的抗生物素（如鏈霉親和素）結(jié)合，最后通過呈色反應(yīng)在光學(xué)顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)物，從而原位確定特定蛋白質(zhì)的分布和含量。免疫組化，是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng)，即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑（熒光素、酶

解答標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)常見四個(gè)問題2021/08/03: 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(RM)referencematerial(RM)：是一種已經(jīng)確定了具有一個(gè)或多個(gè)足夠均勻的特性值的物質(zhì)或材料，作為分析測量行業(yè)中的“量具"，在校準(zhǔn)測量儀器和裝置、評(píng)價(jià)測量分析方法、測量物質(zhì)或材料特性值和考核分析人員的操作技術(shù)水平，以及在過程中產(chǎn)品的質(zhì)量控制等領(lǐng)域起著*的作用。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，標(biāo)準(zhǔn)溶液的溫度控制很重要，一些標(biāo)準(zhǔn)都有嚴(yán)格的規(guī)定比EPA8270d就對(duì)鄰苯二甲酸脂標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的儲(chǔ)存有要求，比如要求控制在-10度以下，一般就是冷凍，有的是0度-4度，溫度計(jì)就有必要，而且溫度計(jì)是校準(zhǔn)過的，大

講解干細(xì)胞的常應(yīng)用領(lǐng)域2021/07/21: 干(gàn)細(xì)胞(stemcell)是一類具有自我復(fù)制能力(self-renewing)的多潛能細(xì)胞。在一定條件下，它可以分化成多種功能細(xì)胞。根據(jù)干細(xì)胞所處的發(fā)育階段分為胚胎干細(xì)胞(embryonicstemcell，ES細(xì)胞)和成體干細(xì)胞(somaticstemcell)。根據(jù)干細(xì)胞的發(fā)育潛能分為三類:全能干細(xì)胞(totipotentstemcell，TSC)、多能干細(xì)胞(pluripotentstemcell)和單能干細(xì)胞(unipotentstemcell)(專能干細(xì)胞)。干細(xì)胞(Stem

標(biāo)本對(duì)ELISA試劑盒檢測的影響說明2021/07/21: ELISA試劑盒即酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，是一種常用的固相酶免疫測定方法。由于ELISA方法靈敏，特異性強(qiáng)不需要特殊設(shè)備，所以被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在臨床檢驗(yàn)中除正常反應(yīng)外，有時(shí)?？梢姷揭恍╁e(cuò)誤結(jié)果（即假陽性或假陰性）；本司在這里為大家解讀下ELISA試劑盒檢測的影響因素中標(biāo)本的影響。1.溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性?？赡苁侨苎逯泻羞^氧化酶物質(zhì)（紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素），在洗滌過程中往往

抗凝劑常用的四大種類2021/07/14: 抗凝劑應(yīng)用物理或化學(xué)方法，除掉或抑制血液中的某些凝血因子，阻止血液凝固，稱為抗凝。能夠阻止血液凝固的化學(xué)試劑或物質(zhì)，稱為抗凝劑或抗凝物質(zhì)。1.、乙二胺四乙酸（EDTA）乙二胺四乙酸(EDTA)鹽EDTA有二鈉、二鉀和三鉀鹽。均可與鈣離子結(jié)合成螯合物，從而阻止血液凝固。EDTA鹽對(duì)紅、白細(xì)胞形態(tài)影響很小，根據(jù)國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)公委員會(huì)(Internationalcommitteestandardofhematology,ICSH)1993年文件建議，血細(xì)胞計(jì)數(shù)用EDTA二鉀作抗凝劑，用量為EDTA-K

抗生素對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)影響是什么？2021/07/07: 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，預(yù)防污染是頭等大事。在細(xì)胞生長狀態(tài)良好的情況下，細(xì)胞培養(yǎng)只是實(shí)驗(yàn)過程中最基本操作之一。但當(dāng)細(xì)胞一旦遭受污染，所有實(shí)驗(yàn)研究將被暫停。污染的發(fā)生有時(shí)甚至?xí)绊懻麄€(gè)實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。為了避免污染，zui常用的方法就是在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加抗生素。zui常用的是青霉素、鏈霉素聯(lián)合抑制細(xì)菌，即所謂的“雙抗”，主要作用于細(xì)菌的細(xì)胞壁與核糖體。由于真核細(xì)胞沒有細(xì)胞壁以及核糖體與原核細(xì)胞不同，抗生素一般對(duì)真核細(xì)胞培養(yǎng)無害。然而，研究數(shù)據(jù)表明，事實(shí)并不是這樣。早在十幾年前，就有很多報(bào)導(dǎo)指出β-內(nèi)酰胺

標(biāo)準(zhǔn)品與對(duì)照品的區(qū)別2021/06/17: 對(duì)照品與標(biāo)準(zhǔn)品是2個(gè)不同的概念，中國藥典凡例中已有明確的定義:文獻(xiàn)中常將2種概念混淆，認(rèn)為對(duì)照品就是標(biāo)準(zhǔn)品，是1種物質(zhì)2種提法而已[1，2]，造成錯(cuò)誤的原因，可能是有的藥品既有對(duì)照品，又有標(biāo)準(zhǔn)品。例如，當(dāng)用微生物法測定頭孢克羅效價(jià)時(shí)，用頭孢克羅標(biāo)準(zhǔn)品，用HPLC或UV法測定時(shí)，則用對(duì)照品;非那西丁當(dāng)用作熔點(diǎn)校準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)，用熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品，測定含量時(shí)，用對(duì)照品。即使是同一種物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品，它們的規(guī)格、標(biāo)定方法以及用途都可能是不同的。一、標(biāo)準(zhǔn)品即是標(biāo)準(zhǔn)物品，作為一種衡量標(biāo)準(zhǔn)，如果用在藥物方面，則為含

詳解：病原生物學(xué)ELISA試劑盒免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)2021/05/26: 病原生物學(xué)ELISA試劑盒免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)詳解：1、皮膚破傷：先除盡異物，用無菌鹽水洗凈后，涂以2%紅汞或2%酒，必要時(shí)進(jìn)行包扎。2、灼傷：涂以凡士林油，5%鞣酸。3、化學(xué)藥品腐蝕傷：若為強(qiáng)酸，先用大量清水沖洗，再以5%碳酸氫鈉或氫氧化銨溶液洗滌中和之；強(qiáng)堿腐蝕傷，則先以大量清水沖洗后，再用5%醋酸或5%硼酸溶液洗滌中和之。若受傷部位是眼部，經(jīng)過上述步驟處理后，zui后滴入橄欖油或液體石臘1、2滴，滋潤之。4、吸入病菌菌液：應(yīng)立即吐入盛有消毒液的容器內(nèi)消毒，并用1：1000高錳酸鉀漱口；根據(jù)菌類不

基因LAMP試劑盒檢測步驟及技術(shù)特點(diǎn)2021/05/17: 檢測步驟：試劑的準(zhǔn)備，從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCRMIX)、酶混合物(EnzymesMIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：試劑每個(gè)反應(yīng)加入的量N個(gè)反應(yīng)加入的量熒光PCR反應(yīng)液14µLN×14µL酶混合物1µLN×1µL總量15µLN×15µL（1）計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)

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