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嘌呤霉素無菌溶液

MCE 國際站：Puromycin, Sterile

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號：HY-K1057

中文名稱：嘌呤霉素無菌溶液

存儲條件：-20℃；2 年

產品活性：嘌呤霉素來源于白黑鏈霉菌（Streptomyces alboniger），是一種氨基糖苷類抗生素，可以通過抑制蛋白質合成從而殺死多數(shù)革蘭氏陽性菌及各種動物或昆蟲細胞，在某種特殊情況下也可有效作用于大腸桿菌。

生物活性：MCE 即用型嘌呤霉素無菌溶液，已過濾除菌，可直接用于細胞培養(yǎng)。嘌呤霉素來源于白黑鏈霉菌（Streptomyces alboniger），是一種氨基糖苷類抗生素，可以通過抑制蛋白質合成從而殺死多數(shù)革蘭氏陽性菌及各種動物或昆蟲細胞，在某種特殊情況下也可有效作用于大腸桿菌。 嘌呤霉素被廣泛用作哺乳動物細胞培養(yǎng)系統(tǒng)中的篩選抗生素。其抗性來自于嘌呤霉素產生（Streptomyces alboniger）內發(fā)現(xiàn)的 pac 基因，將此基因導入細胞可使細胞獲得嘌呤霉素抗性，從而用于篩選和維持培養(yǎng)攜帶 pac 基因的哺乳動物穩(wěn)定轉染細胞株。在某些特定情況下，也可以用來篩選表達 pac 基因的大腸桿菌菌株。

操作流程：1. 嘌呤霉素溶液的工作濃度需要根據(jù)細胞類型、培養(yǎng)基、生長條件和細胞代謝率而適當調整。 2. 對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），來確定最佳篩選濃度 1) 以 20-25% 的細胞密度鋪板，鋪足夠量的孔以進行后續(xù)的梯度實驗，37℃孵育過夜。 2) 準備含梯度濃度嘌呤霉素的新鮮培養(yǎng)基為篩選培養(yǎng)基，至少 5 個梯度。 3) 細胞過夜培養(yǎng)后，使用上述配制的篩選培養(yǎng)基替換舊培養(yǎng)基，孵育細胞。 每個濃度做 3 個平行對照。 4) 約 2-3 天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基。每日監(jiān)測細胞，觀察活細胞比例。通常 7-10 天內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的低濃度為篩選用的工作濃度。

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