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武漢原生原代生物醫藥科技有限公司

原代細胞分離和培養基本步驟

時間:2021-9-17 閱讀:994
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PriCells: 原代細胞分離和培養基本步驟
 
1、器官和組織的選擇
盡可能的去除不必要的組織和血跡。
 
2、原代細胞的分離
(1)應用PriCells原代細胞分離試劑盒I、II、III。
(2)根據組織來源不同,可選用不同的PriCells原代細胞分離試劑盒。
 
3、原代細胞的培養:
(1)PriCells原代細胞特制培養基
(2)PriCells原代細胞特制添加物
(3)優質胎牛血清
 
4、細胞的培養和鑒定:
PriCells原代細胞鑒定試劑盒
 
4、原代細胞的傳代、保存
(1)傳代:依椐細胞的生長狀態,生長的細胞1:2或1:3進行傳代。
(2)保存:DMSO+培養液+血清
按下列順序降溫:室溫→4℃(20分鐘)→冰箱冷凍室(30分鐘)→超低溫冰箱(-80℃  過夜)→液氮。
 
5、原代細胞的復蘇
(1)取出細胞,迅速放入37℃溫水中快速解凍。
(2)吸出細胞懸液,并加10倍以上培養液。
(3)用培養液適當稀釋后接種培養瓶,放入37℃ CO2培養箱靜置培養。


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