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前言：甲氧芐啶 (Trimethoprim) 是一種廣譜抗菌藥，抗菌譜與磺胺類藥物類似，可作 為獸藥用作抗菌劑，也可用于球蟲病的治療。在水產(chǎn)養(yǎng)殖中甲氧芐啶往往與磺 胺類藥物合用，作為磺胺類藥物的增效劑。本方法參照食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) GB 29702-2013，建立了一種水產(chǎn)品中甲氧芐啶殘留分析的高效液相色譜法。該方法 適用于魚、蝦、蟹可食組織中甲氧芐啶殘留量的檢測。

甲氧芐啶的分析 對試料進行樣品前處理。稱取試料（大黃魚、草蝦和大閘蟹的肌肉）5±0.05 g， 于 50 mL 具塞離心管中，依次加入三氯jia烷 15 mL、甲醇 14 mL、0.1 mol/L 硫酸 溶液 6 mL，旋渦混合 2 min，5000 rpm 離心 5 min，取上清液于 250 mL 分液漏斗 中。殘渣中加入甲醇 14 mL 和 0.1 mol/L 硫酸溶液 6 mL，重復(fù)提取一次，合并兩 次上清液于分液漏斗中。加 2 mol/L 氫氧化鉀溶液 2 mL、二氯甲烷 30 mL，振搖 2 min，靜置分層，取下層液于 100 mL 雞心瓶中。分液漏斗中加二氯甲烷 30 mL， 重復(fù)提取一次，合并兩次下層液，于 40 oC 下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，用 5% 乙酸溶液 6 mL 溶解殘余物，作為備用液。

所得備用液經(jīng) Agilent Bond Elut Plexa PCX 固相萃取柱凈化， 復(fù)溶后用濾膜過濾，之后使用配備了 Agilent ZORBAX SB-C18 色譜柱的高效液相色譜系統(tǒng)對其中的甲氧芐啶殘留量進行 分析，同時利用 Agilent Poroshell 120 SB-C18 色譜柱進行快 速分離的對比，如圖 1 所示為固相萃取操作流程，如表 1 所示為液相色譜分析條件。

本文分別采用 ZORBAX SB-C18 色譜柱和 Poroshell 120 SBC18 色譜柱對不同基質(zhì)中的甲氧芐啶進行有效分析。如 圖 2-7 所示，在甲氧芐啶分析中，Poroshell 120 SB-C18 色譜 柱在滿足分離要求的前提下，具有分離速度更快、靈敏度 更高等優(yōu)勢，因此本文選用 Poroshell 120 SB-C18 色譜柱進 行后續(xù)實驗。 通過計算得到采用 Poroshell 120 SB-C18 色譜柱分析水產(chǎn)品中 甲氧芐啶的固相萃取-高效液相色譜法的定量限為 20 µg/kg； 在 0.05 µg/mL-1 µg/mL 濃度范圍內(nèi)，甲氧芐啶具有良好的 線性相關(guān)性，相關(guān)系數(shù) R2 為 0.9999，如圖 8 所示；在 20- 100 µg/kg 的添加水平下，不同基質(zhì)空白樣品加標(biāo)回收率為 87.4%-95.8%，RSD(%) ≤ 5.02 (n = 6)，如表 2 所示。通過上述 實驗結(jié)果表明該方法的準(zhǔn)確度和精密度*食品安全 國家標(biāo)準(zhǔn) GB 29702-2013 的分析要求。