細(xì)胞分選: 單細(xì)胞分選

單細(xì)胞基因表達(dá)分析在基因表達(dá)研究中占有越來越重要的地位

時間：2019/8/21閱讀：361

單細(xì)胞基因表達(dá)分析是一種快速分析基因表達(dá)信息的技術(shù)，它通過快速和詳細(xì)分析成千上萬個表達(dá)序列標(biāo)簽來尋找出表達(dá)豐度不同的SAGE標(biāo)簽序列，從而接近完整地獲得基因組表達(dá)信息。

單細(xì)胞基因表達(dá)分析技術(shù)與基因芯片一起為目前兩種常見的基因表達(dá)譜研究方法。隨著第三代測序技術(shù)的發(fā)展，通過構(gòu)建cDNA文庫，然后利用第二代測序技術(shù)的高通量優(yōu)勢對mRNA文庫進(jìn)行測序，進(jìn)而進(jìn)行基因表達(dá)譜分析的方法在基因表達(dá)譜研究中占有越來越重要的地位。

單細(xì)胞基因表達(dá)分析又稱定量即時聚合酶鏈鎖反應(yīng)，是一種在DNA擴(kuò)增反應(yīng)中，以螢光染劑偵測每次聚合酶鏈鎖反應(yīng)（PCR）循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法技術(shù)，有廣義概念和狹義概念。單細(xì)胞基因表達(dá)分析通過對PCR終產(chǎn) 物的分析或PCR過程的監(jiān)測，進(jìn)行PCR起始模板量的定量，用外標(biāo)法（熒光雜交探針保證特異性）通過監(jiān)測PCR過程（監(jiān)測擴(kuò)增效率）達(dá)到定量起始模板數(shù)的目的，同時以內(nèi)對照有效排除假陰性結(jié)果（擴(kuò)增效率為零）。

觀察到的數(shù)據(jù)是抽樣過程中產(chǎn)生的離散形式，也就是說總體是恒定的，表達(dá)量越高的基因在抽樣結(jié)果中所占的比例越大。單細(xì)胞基因表達(dá)分析表達(dá)量低的基因可能即便有也無法被檢測出來。當(dāng)然，重新對相同文庫進(jìn)行測序，還是有可能找到更多表達(dá)的轉(zhuǎn)錄本。

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