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羥脯氨酸((2S,4R)-4-羥脯氨酸,Hyp)是由脯氨酰-4-羥化酶形成的非蛋白源性氨基酸,其催化蛋白質合成后多肽脯氨酸殘基的翻譯后修飾。在動物體內發現羥脯氨酸幾乎全部由膠原蛋白組成,其中含有約12-14%的羥脯氨酸(纖維蛋白彈性蛋白也含有少量羥脯氨酸含量)。
因此,組織水解物中的羥脯氨酸可直接測量膠原蛋白的含量。膠原蛋白是哺乳動物和許多疾病中zui豐富的蛋白質被認為會影響膠原蛋白的轉化,包括腫瘤的侵襲和轉移轉移、類風濕性關節炎、心肺纖維化和肌營養不良。經典的Hyp測定方法是基于將Hyp氧化成吡咯中間體,然后與溶解在濃高氯酸中的埃利希試劑反應(HClO4)。
高氯酸是一種有毒和高活性的有害物質,需要特殊處理和廢物處理協議。BioVision 羥脯氨酸檢測試劑盒(不含高氯酸鹽)使用專有的酸性顯影液較精確測量Hyp不使用有害高氯酸鹽的組織和蛋白質/肽酶水解物。這是一個快速方便的協議,產生了顏色鮮艷的發色團,吸收峰為560nm。該檢測法可檢測到至少0.05µg羥脯氨酸,每孔含0.05µg羥脯氨酸一個96孔的格式,并產生比色結果,幾乎是相同的經典高氯酸為基礎的方法。
羥脯氨酸檢測試劑盒怎么選?上面已經給出答案了,下面再來說下這款
艾美捷 無高氯酸鹽羥脯氨酸檢測試劑盒的儲存條件和試劑制備:
1、將套件儲存在-20°C下,并進行避光保護。使用前,讓氧化緩沖液加熱至室溫。閱讀整個協議之前執行分析程序。氯胺T濃縮液:作為dH2O中的濃縮溶液提供。使用前,將其加熱至室溫,并旋渦至確保其*重新懸浮。分成等份,在-20°C下儲存,避光。將等分試樣限制為3次冷凍/解凍循環。顯影劑溶液:儲存在+4°C或-20°C,使用前讓溶液達到室溫。使用后,立即重新擰緊封蓋,以盡量減少空氣中水分的吸附。
2、DMAB濃縮液(DMSO):作為DMSO中的即用溶液提供。使用前,將其加熱至室溫,并通過攪拌混合渦流。使用后,立即重新擰緊蓋子,以盡量減少空氣中水分的吸附。在-20°C下儲存,穩定5次冷凍/解凍循環。
3、羥脯氨酸標準品:以1 mg/ml的dH2O儲備溶液提供。在-20°C下儲存,穩定5次冷凍/解凍循環。
羥脯氨酸檢測試劑盒的相關研究工具:
總膠原蛋白檢測試劑盒(比色法)#K218
羥脯氨酸檢測試劑盒(不含高氯酸鹽)#K226
總膠原蛋白檢測試劑盒(無高氯酸鹽)#K406
可溶性膠原蛋白檢測試劑盒(熒光法)#K532
羥脯氨酸比色檢測試劑盒 #K555
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