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超液相色譜儀的發展值得期待

閱讀:1045        發布時間:2015-9-25
   超液相色譜儀的發展值得期待
  超液相色譜儀是分離科學中的一個全新類別,UPLC借助于HPLC(液相色法)的理論及原理,涵蓋了小顆粒填料、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術,增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。超液相色譜儀是一個新興的領域,作為世界*個商品化UPLC產品的Waters ACQUITY UPLCTM 超液相色譜儀系統在1996年問世,之后像安捷倫、島津等公司也陸續開始生產超色譜儀。目前,超液相色譜儀已經開始逐漸地投入液相實驗中。
  超液相色譜儀法的原理與超液相色譜儀法基本相同,所改變的地方有以下幾點:
  小顆粒、高性能微粒固定相的出現。 超液相色譜儀的色譜柱,例如常見的十八烷基硅膠鍵合柱,它的粒徑是5um,而超液相色譜儀的色譜柱,會達到3.5um,甚至1.7um。這樣的孔徑更加利于物質分離
  (2)超高壓輸液泵的使用。
  由于使用的色譜柱粒徑減小,使用時所產生的壓力也自然成倍增大。故液相色譜的輸液泵也相應改變成超高壓的輸液泵。
  (3)高速采樣速度的靈敏檢測器。
  (4)使用低擴散、低交叉污染自動進樣器。配備了針內進樣探頭和壓力輔助進樣技術;
  (5)超液相色譜儀整體系統優化設計。色譜工作站配備了多種軟件平臺,實現超液相分析方法與液相分析方法的自動轉換。
  超液相色譜儀與傳統的HPLC相比,UPLC的速度、靈敏度及分離度分別是HPLC的9倍、3倍及1.7倍,它縮短了分析時間,同時減少了溶劑用量降低了分析成本。
  不過由于實驗過程中儀器內部壓力過大,也會產生相對應的問題。例如泵的使用壽命會相對降低,超液相色譜儀的連接部位老化速度加快,包括單向閥等部位零件容易出現問題等。
  超液相色譜儀尤其對中藥研究領域的發展是一個極大的促進。中藥的組分復雜,分離困難等問題都可以通過超液相色譜儀法逐漸解決。在同樣條件下,UPLC能分離的色譜峰比HPLC多出一倍還多。在同樣條件下,UPLC的分辨率能夠認出更多的色譜峰。
  相信在分析實驗室中超液相色譜儀會越來越普及,讓液相色譜法得到飛躍和進步。
  超液相色譜儀是目前應用zui多的色譜分析方法,超液相色譜儀系統由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩;進樣系統要求進樣便利切換嚴密;由于液體流動相粘度遠遠高于氣體,為了減低柱壓超液相色譜儀的色譜柱一般比較粗,長度也遠小于氣相色譜柱。HPLC應用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個領域。
  使用超液相色譜儀時,液體待檢測物被注入色譜柱,通過壓力在固定相中移動,由于被測物種不同物質與固定相的相互作用不同,不同的物質順序離開色譜柱,通過檢測器得到不同的峰信號,zui后通過分析比對這些信號來判斷待側物所含有的物質。超液相色譜儀作為一種重要的分析方法,超液相色譜儀廣泛的應用于化學和生化分析中。超液相色譜儀從原理上與經典的液相色譜沒有本質的差別,超液相色譜儀的特點是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和微粒固定相,適于分析高沸點不易揮發、分子量大、不同極性的有機化合物。
  超液相色譜儀主要特點
  高壓——壓力可達150~300 kg/cm2。色譜柱每米降壓為75 kg/cm2以上。
  高速——流速為0.1~10.0 mL/min。
  ——塔板數可達5000/米。在一根柱中同時分離成份可達100種。
  高靈敏度——紫外檢測器靈敏度可達0.01ng。同時消耗樣品少。
  HPLC與經典液相色譜相比有以下優點:
  速度快——通常分析一個樣品在15~30 min,有些樣品甚至在5 min內即可完成。
  分辨率高——可選擇固定相和流動相以達到*分離效果。
  靈敏度高——紫外檢測器可達0.01ng,熒光和電化學檢測器可達0.1pg。
  色譜柱可反復使用——用一根色譜柱可分離不同的化合物。
  樣品量少,容易回收——樣品經過色譜柱后不被破壞,可以收集單一組分或做制備。
 

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