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293細胞無血清培養基,解鎖細胞培養無憂秘籍!

2024-10-10  閱讀(220)

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細胞培養作為現代生命科學研究的重要手段之一,為我們深入探索生命的奧秘提供了有力的工具。通過在體外模擬體內環境,讓細胞在適宜的條件下生長、增殖和分化,可以研究細胞的生理功能、疾病發生機制以及開發新的治療方法。然而,要實現高質量的細胞培養并非易事,培養基的選擇至關重要。


 

 

 

含血清培養基

 

在傳統的細胞培養中,含血清培養基被廣泛使用。血清中含有豐富的營養成分和生長因子,能夠支持細胞的生長和增殖。然而,血清培養也存在諸多缺點。

 

 
01
 
血清的成分復雜且不明確,不同批次之間存在差異;
02
 
血清可能攜帶病毒、支原體等潛在污染物,增加了細胞培養被污染的風險;
03
 
在蛋白表達純化等一些實驗中,血清中的成分可能會干擾實驗結果。

 

 

無血清培養基

無血清培養基是指在細胞培養過程中不添加血清,而是通過精確調配各種營養成分、生長因子和其他添加劑來滿足細胞生長需求的培養基。從最初的嘗試到如今的廣泛應用,無血清培養基經歷了多年的發展和完善,逐漸成為細胞培養的主流選擇之一,它具有以下顯著優點:

 

 
01
 

成分精準可控

無血清培養基的成分經過科學調配,明確且穩定。每一種成分的作用都清晰可辨,確保了實驗結果的高度可重復性。這對于需要嚴格控制實驗條件的研究和生產過程至關重要;

02
 
杜絕污染風險
由于不含有血清,極大地降低了潛在的污染風險,為細胞培養提供了一個純凈、安全的環境;
03
 
優化細胞生長

針對不同類型的細胞,如293細胞,無血清培養基能夠提供特定的營養成分和生長因子組合,促進細胞快速增殖并維持良好的細胞狀態。

 

 

產品介紹

 

CelCulSF™293 Cell Culture Medium(Serum-free)培養基為無動物源、無蛋白的化學成分限定培養基。適應于HEK293各細胞系細胞(如HEK293F,HEK293T,HEK293H,Expi293 等)規模化無血清懸浮培養及后續轉染表達。產品經過定向優化,尤其適應于AAV及蛋白等相關產品研發和生產過程,可支持細胞高密度擴增及穩定的產物表達。

 

 

使用秘籍

 
//
 

技術參數

 

參數

設定值

50mL TPP管

培養體積:10-20 mL

125~1000 mL搖瓶

培養體積:搖瓶總體積的20-30%

搖床轉速

TPP:轉速220 rpm,  搖瓶 110-130 rpm

搖床振幅

50 mm

培養基

CelCulSF293 Cell Culture Medium(Serum-free)

接種密度

0.5×106 cells/mL

培養溫度

37℃

CO2%

5%

相對濕度

80%RH

 

//
 

細胞馴化

 

通常,在原用培養基中生長的HEK293細胞需要轉移到由50%原用培養基和50%培養(CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium)組成的新培養基中進行適應性生長。

 

 
01
 

將原用培養基中生長的細胞移入新培養基(50% CelCulSF™293 Cell Culture Medium + 50% 原用培養基 ),接種密度為0.5×106/mL。

02
 
細胞培養至48±3小時后,建議按此方法進行至少3次細胞適應性傳代。當細胞活率高于90%時轉入100% CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium培養基培養。

 

//
 

細胞培養

 
 
01
 

37℃水浴中預熱CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium培養基;

02
 
接種密度為1.0×10viable cells/mL。培養 48±3 小時后,取0.5mL細胞懸液,用細胞計數儀分析活細胞密度(×106細胞 /mL)和活細胞(%);
03
 
傳代前,如果細胞密度低于2.0 ×106/mL,或細胞活率低于80%,需要150g - 300g,離心5分鐘處理細胞。輕輕棄上清,使用100%新鮮培養基按0 .5×106/mL重懸細胞;
04
 
如果傳代前細胞密度大于2.0×106/mL且活細胞率高于85%,則將適量的細胞懸液轉移到新搖瓶(或TPP管)中,并用新鮮培養基直接調整最終培養體積進行細胞傳代,然后在規定的環境條件下培養細胞;
05
 
如果傳代比(傳代后的種子密度:傳代前的細胞密度)大于1:4,細胞需要離心并重新懸浮在100%新鮮培養基中。

 

//
 

蛋白表達,腺相關病毒病毒等在懸浮293細胞上的表達

 
 
01
 

細胞在CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium 中培養;

02
 
72±3 小時后,取 0.5 mL細胞懸液,用細胞計數儀分析活細胞密度(×106/mL)和細胞活率(%);
03
 
用相同體積的預熱培養基稀釋培養物(培養物體積:待添加培養基體積=1:1);
04
 
根據病毒培養工藝,接種病毒,并繼續培養病毒至收獲。可根據實際生產工藝進行優化或聯系產品相關負責人。

 

 

 

FAQ

 
 

293 無血清培養基可以用于哪些細胞類型?

主要適用于293細胞系,包括HEK293F,HEK293T,HEK293H,Expi293等不同亞型的細胞。

 

 

與傳統含血清培養基相比,無血清培養基有哪些優勢?

無血清培養基具有以下優勢:成分明確且穩定,避免血清批次差異帶來的影響;降低潛在的污染風險;簡化實驗操作流程;優化細胞生長,滿足不同實驗需求;具有更高的成本效益。

 

 

如何判斷 293 細胞在無血清培養基中的生長狀態是否良好?

可以從以下幾個方面判斷:細胞形態正常;細胞增殖速度穩定;培養基顏色變化正常,未出現渾濁等異常現象。

 

 

無血清培養基的保存條件是什么?

建議將293無血清培養基保存在2 - 8℃冰箱中,避免光照和高溫。開封后應盡快使用,避免長時間存放。

 

 

在使用無血清培養基過程中,如果出現細胞生長不良怎么辦?

首先檢查培養條件是否符合要求,如溫度、CO2、濃度等。可以適當調整細胞接種密度、換液頻率等。如果問題仍然存在,可以聯系Yeasen技術支持團隊,尋求專業的解決方案。

 

選擇 Yeasen 293無血清培養基,讓你的細胞培養之路更加順暢無憂!

 

 

訂購信息

 

產品名稱

產品貨號

規格

CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium(Serum-free) 293細胞無血清培養基

40141ES80

1000 mL

CelCulSF™ Insect Cell Culture Medium(Serum-free) 昆蟲細胞無血清培養基

40140ES80

1000 mL

CelCulSF™ Hybridoma Cell Culture Medium(Serum-free) 雜交瘤細胞無血清培養基

40143ES80

1000 mL

Serum-Free CellStore Freezing 無血清細胞凍存液
(推薦搭配使用無血清凍存液,效果更佳)

40151ES50

50 mL

40151ES60

100 mL



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