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方案 | 單細胞混懸液制備-酶解法

檢測樣品:單細胞混懸液

檢測項目:樣本制備

方案概述:高通量單細胞測序技術對樣本的要求高,需要將樣本制備成高質量的單細胞懸液才能進行后續實驗。但實體組織多種多樣,根據不同實體組織成分的特點可以選擇不同的分散細胞的方法。

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更新時間2025年02月12日

上傳企業艾卡(廣州)儀器設備有限公司(德國IKA/艾卡)

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概況

高通量單細胞測序技術對樣本的要求很高,需要將樣本制備成高質量的單細胞懸液才能進行后續實驗。但實體組織多種多樣,根據不同實體組織成分的特點可以選擇不同的分散細胞的方法。常用的制備單細胞混懸液有酶解法,機械法和化學處理法。在處理不同組織時,需要摸索合適方法,盡可能采用對細胞損傷小,產率較高的制備方法,最大限度地保持細胞原有特性。

酶解法利用特定酶進行相應的化學反應除掉一些特定結構,尤其適合將小塊組織消化成為單個細胞,常規消化需要在一定的時間和溫度下進行振蕩操作,樣品量一般在 1 ~ 2 ml 左右。

 

測試條件

樣品 水

儀器 MATRIX Orbital Delta F2.0 恒溫混勻儀

混勻 關閉

溫度 37 °C

樣品量 1.8 ml * 24

 

實驗步驟

1. 使用水作為測試樣品,來驗證儀器的控溫效果。

2. 在 MATRIX Orbital Delta F2.0 恒溫混勻儀中加入 1.8 ml 水,設定 37 ℃,選擇 Fast 控溫模式。

3. 使用第三方溫度探頭測試水的溫度穩定性和均一性。

 

結果

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> 溫度均一性為 6 個點的最大溫度偏差

> 溫度準確性為 6 個點與設定值的最大偏差

> 該測試未開啟混勻功能

 

結論

1. 不同的酶消化反應,對溫度以及消化時間要求不同, 合適的消化酶以及設備能大大加快細胞解離速率,也有利于獲得更高的細胞產量。酶解法在細胞分離中適用范圍廣,是分離方法的推薦選折。

2. IKA 恒溫混勻儀 MATRIX Orbital Delta 系列可用于酶解法中的消化反應。高通量、精確控溫、定時,可調混勻速度保證高質量單細胞混懸液的制備。

 

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關于IKA

 

 

IKA 集團是實驗室前處理、分析技術、 工業混合分散技術的市場leader。電化學合成儀、磁力攪拌器、頂置式攪拌器、分散均質機、混勻器、恒溫搖床、恒溫培養箱/烘箱、移液器、研磨機、旋轉蒸發儀、加熱板、恒溫循環器、粘度計、量熱儀、生物反應器、化學合成釜、實驗室反應釜等相關產品構成了IKA 實驗室前處理與分析技術的產品線;而工業技術主要包括用于規模生產的混合設備、分散乳化設備、捏合設備、以及從中試到擴大生產的整套解決方案。IKA 還與全球zhi名大學和科學家進行著密切的合作, 支持其在科研道路上不斷探索。我們致力于為客戶提供更好的技術, 幫助客戶獲得成功。

 

IKA 成立于1910年,集團總部位于德國南部的Staufen,在美國、中國、印度、馬來西亞、日本、巴西、韓國、英國、波蘭等國家都設有分公司。 艾卡(廣州)儀器設備有限公司是IKA 集團于2000年設立的全資子公司,主要負責為中國和蒙古國提供產品、技術和服務支持。

 

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