BR6034 脂蛋白酯酶試劑盒 脂肪酸系列
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號 BR6034
- 產地 北京
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/4/9 17:36:19
- 訪問次數 86
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| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100T/48S |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BR6034 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 脂蛋白酯酶是脂肪細胞、心肌細胞、骨骼肌細胞、乳腺細胞及巨噬細胞等實質細胞合成的酶 |
脂蛋白酯酶（Lipoprotein lipase，LPL）試劑盒說明書
微量法 100T/48S
脂蛋白酯酶試劑盒 脂肪酸系列
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
脂蛋白酯酶是脂肪細胞、心肌細胞、骨骼肌細胞、乳腺細胞及巨噬細胞等實質細胞合成的一種酶，可催化甘油三脂水解為脂肪酸和單酸甘油酯，以供組織氧化供能和貯存，并在不同的組織表現出不同的生理意義。
測定原理：
脂蛋白酯酶水解 4-硝基苯棕櫚酸酯產生 4-硝基苯fen，在 400nm 有特征吸收峰。
組成：
產品名稱 | BR6034-100T/48S | Storage |
試劑一：液體 | 105ml | 4℃ |
試劑二：液體 | 4ml | 4℃避光 |
試劑三：液體 | 10ml | 4℃ |
說明書 | 一份 | |
自備儀器和用品：
天平、冷凍離心機、研缽、水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板。
樣品處理：
組織：按照質量（g）：試劑一體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g，加入 1ml 試劑一）加入試劑一，冰浴勻漿后于 4℃，10000g 離心 10min，取上清待測。
細胞：按照細胞數量（104 個）：試劑一體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入 1ml試劑一）加入試劑一，冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后于 4℃，10000g 離心 10min，取上清待測。
血清：直接測定。
測定操作：
對照管 | 測定管 | |
樣品（μl） | 20 | 20 |
試劑一（μl） | 80 | |
試劑二（μl） | 80 |
混勻，45℃水浴 10min | ||||
試劑三（μl） | 100 | 100 | ||
充分混勻，25℃靜置2min，于微量石英比色皿/96 孔板，測定400nm 處吸光值，記為 A 對照管和A 測定管，△A=A 測定管- A 對照管 | ||||
計算公式：
用微量石英比色皿測定的計算公式如下 標準曲線：y= 0.0581x -0.0169，R2=0.9982
按照蛋白濃度計算
酶活性定義：在 45℃，pH7.5 條件下，每毫克蛋白每分鐘水解產生 1μmol 4-硝基苯fen為一個酶活力單位。 LPL 活性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.0169）÷ 0.0581×V 反總÷（V 樣×Cpr）÷T
= 17.21×（△A+0.0169）÷Cpr
按照樣本質量計算
酶活性定義：在 45℃，pH7.5 條件下，每克組織每分鐘水解產生 1μmol 4-硝基苯fen為一個酶活力單位。 LPL 活性（μmol /min/g 鮮重）=（△A+0.0169）÷0.0581×V 反總÷（W×V 樣÷V 樣總）÷T
= 17.21×（△A+0.0169）÷W
按照細胞數量計算
酶活性定義：在 45℃，pH7.5 條件下，每 104 個細胞每分鐘水解產生 1μmol 4-硝基苯fen為一個酶活力單位。 LPL 活性（μmol /min/104 cell）= （△A+0.0169）÷0.0581×V 反總÷（V 樣×細胞數量÷V 樣總）÷T= 17.21×（△A+0.0169）÷細胞數量
按照液體體積計算
酶活性定義：在 45℃，pH7.5 條件下，每毫升血清每分鐘水解產生 1μmol 4-硝基苯fen為一個酶活力單位。 LPL 活性（μmol /min/ml）=（△A+0.0169）÷0.0581×V 反總÷V 樣÷T
= 17.21×（△A+0.0169）
V 反總：反應總體積，0.2ml；V 樣：反應體系中加入樣本體積，0.02ml；W：樣本質量，g；V 樣總：加入提取液體積，1ml；T：反應時間，10min
b．用 96 孔板測定的計算公式如下
標準曲線：y= 0.029x -0.0169，R2=0.9982
按照蛋白濃度計算
酶活性定義：在 45℃，pH7.5 條件下，每毫克蛋白每分鐘水解產生 1μmol 4-硝基苯fen為一個酶活力單位。 LPL 活性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.0169）÷ 0.029×V 反總÷（V 樣×Cpr）÷T
= 34.42×（△A+0.0169）÷Cpr
按照樣本質量計算
酶活性定義：在 45℃，pH7.5 條件下，每克組織每分鐘水解產生 1μmol 4-硝基苯fen為一個酶活力單位。 LPL 活性（μmol /min/g 鮮重）=（△A+0.0169）÷0.029×V 反總÷（W×V 樣÷V 樣總）÷T
= 34.42×（△A+0.0169）÷W
按照細胞數量計算
酶活性定義：在 45℃，pH7.5 條件下，每 104 個細胞每分鐘水解產生 1μmol 4-硝基苯fen為一個酶活力單位。 LPL 活性（μmol /min/104 cell）= （△A+0.0169）÷0.029×V 反總÷（V 樣×細胞數量÷V 樣總）÷T
=34.42×（△A+0.0169）÷細胞數量
按照液體體積計算
酶活性定義：在 45℃，pH7.5 條件下，每毫升血清每分鐘水解產生 1μmol 4-硝基苯fen為一個酶活力單位。 LPL 活性（μmol /min/ml）=（△A+0.0169）÷0.029×V 反總÷V 樣÷T
= 34.42×（△A+0.0169）
V 反總：反應總體積，0.2ml；V 樣：反應體系中加入樣本體積，0.02ml；W：樣本質量，g；V 樣總：加入提取液體積，1ml；T：反應時間，10min
注意事項：
試劑三加入混勻后靜置兩分鐘立即測定，否則影響吸光值。
吸光值過高或者測定結果不穩定，則將酶液進行適當的稀釋，并在計算公式中乘以稀釋倍數。
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