BP6028 植酸酶試劑盒 其他系列
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號 BP6028
- 產地 北京
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/4/9 9:44:37
- 訪問次數 117
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| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100T/48S |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BP6028 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 能將食品和飼料中植酸及其鹽轉化為可供有機體利用的有效磷 |
植酸酶（phytase）試劑盒說明書
微量法 100T/48S
植酸酶試劑盒 其他系列
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：
植酸酶（phytase）是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸（鹽）的一類酶的總稱，屬磷酸單酯水解酶，它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉化為可供有機體利用的有效磷，降低糞便中的磷含量，減輕對環境的污染，改善營養成分的吸收和利用，因此具有極其廣泛的研究和應用價值。
測定原理：
植酸酶在一定溫度和pH 值條件下，水解底物植酸鈉生成無機磷與肌醇衍生物，無機磷在酸性環境中與鉬酸銨顯色劑反應生成藍色復合物，在 700nm 處有特征吸收峰，根據 700nm 處吸光值變化可計算得植酸酶活性。
試劑組成和配制：
產品名稱 | BP6028-100T/48S | Storage |
提取液：液體 | 100ml | 4℃ |
緩沖液：液體 | 15ml | 4℃ |
試劑一：粉劑 | 1 支 | 4℃ |
試劑二：液體 | 15ml | 4℃ |
顯色劑：粉劑 | 8 瓶 | 4℃ |
說明書 | 一份 | |
試劑一：粉劑×1 支，4℃保存，臨用前加緩沖液 6ml 配制，現用現配；用不完的試劑 4℃保存一個月。顯色劑：粉劑×8 瓶，4℃保存，臨用前根據用量每瓶加 0.4ml 雙蒸水溶解，再加 1.6ml 試劑二混勻。
需自備儀器和用品：
天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、恒溫水浴鍋，超聲溶解器，回旋式振蕩器。
樣本處理：
酶制劑：按照質量（g）：提取液體積(ml)為 1：500~1000 的比例（建議稱取約 0.001g，加入 1ml
提取液）加入提取液，在超聲波溶解器上溶解 15min，再用回旋式振蕩器振蕩 15min，待測。
組織：按照質量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g，加入 1ml 提取液）進行冰浴勻漿，在超聲波溶解器上溶解 15min，再用回旋式振蕩器振蕩 15min，4℃，4000g 離心 10min，取上清待測。
飼料樣品：飼料烘干粉碎，過 40 目篩，按照質量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g，加入 1ml 提取液）進行冰浴勻漿，在超聲波溶解器上溶解 15min，再用回旋式振蕩器振蕩 15min，4℃，4000g 離心 10min，取上清待測。
培養液等液體樣品，混勻直接測定。
測定步驟：
試劑名稱(µl) | 對照管 | 測定管 |
樣本（µl） | 30 | 30 |
37℃溫育 5min
緩沖液（µl） | 120 | |
試劑一（µl） | 120 |
混勻，37℃溫育 30min，95℃，10min 終止反應，冷卻至室溫
顯色劑（µl） | 150 | 150 |
混勻，37℃靜置 15min，10000g，室溫，離心 5min，取上清 200µl，測定 700nm 處吸光值，△A=A 測定管-A 對照管。每個測定管設一個對照管。
注意事項
1、顯色劑需要臨用前根據用量配制，每一瓶是 13 個樣本的用量，新配制的顯色劑若有顏色則已經污染或者試劑過期，應放棄使用。
2、ΔA 線性范圍為 0.01-1。
酶活性計算公式：
用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線：y = 0.2764x + 0.0082，R2 = 0.9998；x 為標準品濃度（μmol/ml），y 為吸光值。
1． 按照蛋白濃度計算
酶活性定義：在 37℃，pH5.5 的條件下，每毫克蛋白每分鐘從 5mmol/L 的植酸鈉溶液中釋放出 1μmol
的無機磷為一個酶活力單位。
植酸酶活性（μmol/min/mg prot）=（△A-0.0082）÷0.2764÷Cpr÷T =0.1206×（△A-0.0082）÷Cpr 2．按照樣本質量計算
酶活性定義：在 37℃，pH5.5 的條件下，每克樣本每分鐘從 5mmol/L 的植酸鈉溶液中釋放出 1μmol
的無機磷為一個酶活力單位。
植酸酶活性（μmol/min /g 鮮重）=（△A-0.0082）÷0.2764÷W÷T =0.1206×（△A-0.0082）÷W
3. 培養液等液體樣品
酶活性定義：在 37℃，pH5.5 的條件下，每毫升液體每分鐘從 5mmol/L 的植酸鈉溶液中釋放出 1μmol
的無機磷為一個酶活力單位。
植酸酶活性（μmol/min /ml）=（△A-0.0082）÷0.2764÷T =0.1206×（△A-0.0082）
Cpr：樣本蛋白含量，mg/ml；W：樣本質量，g；T：反應時間，30min。
用 96 孔板測定的計算公式如下
標準曲線：y = 0.1382x + 0.0082，R2 = 0.9998；x 為標準品濃度（μmol/ml），y 為吸光值。
1.按照蛋白濃度計算
酶活性定義：在 37℃，pH5.5 的條件下，每毫克蛋白每分鐘從 5mmol/L 的植酸鈉溶液中釋放出 1μmol的無機磷為一個酶活力單位。
植酸酶活性（μmol/min/mg prot）=（△A-0.0082）÷0.1382÷Cpr÷T = 0.2412×（△A-0.0082）÷Cpr 2．按照樣本質量計算
酶活性定義：在 37℃，pH5.5 的條件下，每克樣本每分鐘從 5mmol/L 的植酸鈉溶液中釋放出 1μmol的無機磷為一個酶活力單位。
植酸酶活性（μmol/min /g 鮮重）=（△A-0.0082）÷0.1382÷W÷T =0.2412×（△A-0.0082）÷W
3. 培養液等液體樣品
酶活性定義：在 37℃，pH5.5 的條件下，每毫升液體每分鐘從 5mmol/L 的植酸鈉溶液中釋放出 1μmol的無機磷為一個酶活力單位。
植酸酶活性（μmol/min /ml）=（△A-0.0082）÷0.1382÷T =0.2412×（△A-0.0082） Cpr：樣本蛋白含量，mg/ml；W：樣本質量，g；T：反應時間，30min。
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