13592ES 4×Multiplex PCR Master Mix for Pathogen
- 公司名稱 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號 13592ES
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/2/7 13:45:27
- 訪問次數 324
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企業簡介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質改造和酶進化技術為驅動，聚焦生命科學產業鏈上游核心原料，從事分子、蛋白和細胞三大品類生物試劑的研發、生產與銷售的高新技術企業，通過打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細胞的技術開發路徑，成為國內少數同時覆蓋三大品類生物試劑、兼備核心技術自主研發能力和規模化生產能力的高新技術企業，產品廣泛應用于生命科學研究領域、診斷與檢測領域和生物醫藥領域。
主營業務
公司憑借在蛋白質改造和酶進化領域的技術優勢和深耕生物試劑行業多年積累的豐富經驗，構建了品質優良、類型齊全、種類豐富的產品管線。自公司成立以來，公司研發、生產和銷售的生物試劑超過3000種，涵蓋分子、蛋白、細胞三大品類的生物試劑，能夠滿足客戶多種類型生物試劑的一體化采購需求。公司核心產品覆蓋qPCR系列、NGS系列、逆轉錄系列、核酸提取與純化系列、PCR系列、分子克隆系列、體外轉錄系列、抗體、蛋白純化系列、蛋白分析系列、重組蛋白、細胞分析系列、細胞培養系列、細胞轉染系列、報告基因檢測系列等多個品類的生物試劑，廣泛應用于生命科學研究、診斷檢測和生物醫藥等領域。
發展歷程
榮譽資質
翌圣生物通過申請商標和軟件著作權的方式保障核心技術和市場競爭力，不斷加強公司品牌建設。截至2022年3月31日，公司已經獲得授權18項（其中發明14項、實用新型1項、外觀設計3項）和45項與生物試劑相關的軟件著作權，擁有經國家知識產權局商標局核準的注冊商標權37項以及4項境外注冊商標，是國家高新技術企業和上海市專精特新企業。
創新平臺
經過多年的產品研發技術經驗的沉淀以及持續的研發創新，翌圣生物積極開展“產學研”合作，與擁有生物催化與酶領域國家重點實驗室的湖北大學、擁有教育部工業生物領域重點研究基地的江南大學展開合作，優化生物試劑關鍵原料的生產和表達工藝。翌圣生物以基因工程技術、生物信息技術、細胞生物學技術、免疫學技術、生化分析技術等生命科學領域的共性生物技術為基礎，建立了六大核心技術平臺——雙向分子酶理性設計與定向進化平臺、密度發酵與超潔凈純化平臺、分子診斷試劑關鍵原料研發平臺、高通量測序建庫試劑創新研發平臺、高性能單克隆抗體研發平臺和mRNA醫藥應用研發平臺，目前已經自主研發出20項核心技術，打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細胞的技術開發路徑，覆蓋技術研發、產品升級、規模生產和質量控制等生物試劑研發和生產的各關鍵環節。
工業化生產
翌圣生物擁有按照準GMP 標準建設運營的工業化生產基地，配有噸級發酵線、工業級 AKTA 純化線和全自動包裝線。同時，公司通過了ISO 13485:2016質量管理體系認證，從原料控制、生產管理、質檢管控、倉儲運輸等對生產線進行360度管理監督，保證產品過程的可控制性及可追溯性，竭盡全力為您提供可靠的產品。
客戶服務
翌圣生物憑借優質穩定的產品質量、高效及時的響應能力、快速穩定的交付能力和周到完備的售后服務獲得了眾多科研用戶和工業用戶的認可，為檢測公司、治療公司、工具類公司和科學研究實驗室提供應用于科學研究、體外診斷、基因測序、生物醫藥等的生物試劑。與中國科學院、清華大學、北京大學、復旦大學、上海交通大學、浙江大學等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫藥、藥明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工業客戶建立了穩定、緊密的合作關系，公司產品被多次使用在Nature、Science、Cell等國際頂級期刊論文發表中。
公司企業文化
幫助客戶創造價值，讓世界更健康更快樂
◎ 成為生命科學工具領域全球Top⑩
◎ 具備驅動產業變革的技術創新能力
◎ 擁有一支持續學習型的翌圣鐵軍
翌圣生物始終秉承“幫助客戶創造價值，讓世界更健康更快樂”的使命，專注于技術創新和產品升級，不斷拓展核心技術的應用領域，為客戶提供更為的產品與服務，助力我國打造自主可控的生物試劑產業鏈。同時，翌圣生物將進一步推進國際化戰略，繼續布局和拓展海外市場，為全球生物試劑產業發展貢獻力量。
分子生物學試劑，細胞生物學試劑，免疫學試劑，蛋白組學試劑等
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
|---|
產品描述
本產品適用于多重PCR實驗。4×Multiplex PCR Master Mix for Pathogen以熱啟動多重Taq酶制劑與4×擴增緩沖液為組分配置成預混液。本預混液可快速便捷地用于多重PCR反應，擴增子GC含量25-75%范圍內可以有效擴增。具備高均一性、高特異性和高靈敏度的特點，同時嚴控背景菌。本試劑可兼容30~100對以內不同大小片段的多重擴增，也可用于進行數千重及以上擴增子的捕獲。可應用病原微生物檢測、環境微生物鑒定、食品安全檢測等多個應用場景。
運輸與保存方式
冰袋運輸。-25 ~ -15℃儲存，有效期2年。
實驗流程
推薦反應體系：
一輪反應體系
組分 | 體積（μL） | 終濃度 |
4×Hieff® Multiplex PCR Master Mix for Pathogen | 7.5 | 1× |
Primer mix | x | 0.02 μM-0.5 μM |
模板DNA | x | 1 ng-400 ng |
無菌超純水 | x | - |
總體積 | To30 |
【注】
1上表中DNA量和引物濃度均為推薦用量和濃度，可根據具體實驗情況進行調整最適濃度。
2）參考建議：每條引物的濃度可在0.02 μM-0.5 μM范圍內進行調整。
3）預混液中已經包含擴增所需要的酶、dNTP、鹽離子等，無需額外添加。
二輪反應體系
組分 | 體積（μL） | 終濃度 |
2×Hieff® Multiplex PCR Master Mix for Pathogen（Cat.13581） | 15 | 1× |
Primer Index mix | 4（~6 pmol） | |
一輪純化產物 | 11 | |
無菌超純水 | x | - |
總體積 | To 30 |
推薦反應程序：
循環步驟 | 溫度（℃） | 時間 | 循環數 |
預變性 | 95℃ | 3 min | 1 |
變性 | 95℃ | 30 sec | X |
退火 | 60℃ | 30 sec | |
延伸 | 72℃ | 30 sec | |
終延伸 | 72℃ | 3 min | |
暫存 | 4℃ | - | 1 |
【注】
退火時間可以根據Panel種類不同，進行適當延長，或者是梯度退火，比如64℃ 1 min，60℃ 1 min;
延伸時間以最長片段為準。延伸時間太長會導致非特異性擴增增多，可通過縮短延伸時間來提高擴增特異性，延伸時間不少于30 sec。
針對模板含量較低的樣本，可通過增加循環數提高擴增產出。
Panel引物重數較多時可增加退火時間，調整梯度退火程序，或者根據已有Panel的合適的PCR反應程序進行測試。
循環數推薦：
單管引物重數 | 推薦循環數 （10 ng gDNA ） | 退火延伸時間 | |
一輪 | 二輪 | ||
10-50 | 10~28 | 18~28 | 30 s~2 min |
50-200 | 10~28 | 16~28 | 30 s~2 min |
200-800 | 10~28 | 14~28 | 30 s~2 min |
800以上 | 10~28 | 12~28 | 30 s~4 min |
【注】
上表是基于10 ng gDNA進行的一輪及二輪循環數的推薦；當投入量大于10 ng，二輪的相應的循環數可以減少；當投入量小于10 ng，一，二輪的相應的循環數要相應的增加。
多重擴增引物純化
一輪 PCR 產物 0.9×磁珠純化
1) 準備工作：將 Hieff NGS® DNA Selection Beads 磁珠由冰箱中取出，室溫平衡至少 30 min。 配制 80%乙醇。
2) 渦旋振蕩或充分顛倒磁珠以保證充分混勻。
3) 吸取 27 μL Hieff NGS® DNA Selection Beads（0.9×，Beads:DNA=0.9:1）至一輪 PCR 產物中，室溫孵育 5 min。
4) 將 PCR 管短暫離心并置于磁力架中分離磁珠和液體，待溶液澄清后（約 5 min），小心移除上清。
5) 保持 PCR 管始終置于磁力架中，加入 200 μL 新鮮配制的 80%乙醇漂洗磁珠，室溫孵育 30 sec 后，小心移除上清。
6) 重復步驟 5，總計漂洗兩次。
7) 保持 PCR 管始終置于磁力架中，開蓋空氣干燥磁珠至剛剛出現龜裂（不超過 5min）。
8) 直接加入 11 μL ddH2O，將 PCR 管從磁力架中取出，渦旋振蕩或使用移液器輕輕吹打至充分混勻，室溫靜置 5 min。進入下一步反應。
二輪 PCR 產物 0.9×磁珠純化
1) 準備工作：將 Hieff NGS® DNA Selection Beads 磁珠由冰箱中取出，室溫平衡至少 30 min。 配制 80%乙醇。
2) 渦旋振蕩或充分顛倒磁珠以保證充分混勻。
3) 吸取 27 μL Hieff NGS® DNA Selection Beads（0.9×，Beads:DNA=0.9:1）至一輪 PCR 產物中，室溫孵育 5 min。
4) 將 PCR 管短暫離心并置于磁力架中分離磁珠和液體，待溶液澄清后（約 5 min），小心移除上清。
5) 保持 PCR 管始終置于磁力架中，加入 200 μL 新鮮配制的 80%乙醇漂洗磁珠，室溫孵育 30 sec 后，小心移除上清。
6) 重復步驟 5，總計漂洗兩次。
7) 磁珠晾干后，將PCR管從磁力架上取下，加入30 μL Nuclease-free ddH2O覆蓋磁珠，使用移液器吹打混勻。室溫孵育2 min。如果磁珠干燥開裂，適當延長孵育時間。
8）將PCR管短暫離心收集后置于磁力架中，分離磁珠和液體直到溶液澄清(約5 min)。 小心吸取25 μL上清轉移至新的EP管中，繼續進行下一步反應。
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