腸桿菌和其他非苛養(yǎng)革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒（比色法）說明書

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：腸桿菌和其他非苛養(yǎng)革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒（比色法）

英文名稱：API 20 E

【包裝規(guī)格】

25 測試/盒、100 測試/盒。

【預(yù)期用途】

該產(chǎn)品用于腸桿菌和其它非苛養(yǎng)革蘭氏陰性桿菌的鑒定。

該產(chǎn)品用于可導(dǎo)致腹瀉、血流感染、尿路感染等的腸桿菌和其它非苛養(yǎng)革蘭氏陰性桿菌的鑒定，臨床常

見樣本來源有糞便、直腸拭子、尿、血等。

【檢驗原理】

API 20 E 試條由 20 個含干燥底物的微量小管組成。將菌懸液接種到管內(nèi)，使小管內(nèi)底物溶解。孵育過

程中，所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物通過自發(fā)反應(yīng)或加入附加試劑后而變色。鑒定結(jié)果可根據(jù)說明書的判讀表進行

讀出，也可參照生化譜檢索手冊或鑒定軟件，得到鑒定結(jié)果

【樣本要求】

API 20 E 不能直接用于臨床或其他標本（例如血樣，尿樣和糞樣、直腸拭子等等）。需要進行鑒定的微

生物必須首先根據(jù)標準微生物處理技術(shù)于適合腸桿菌和/或非苛養(yǎng)革蘭陰性桿菌生長的培養(yǎng)基上分離培

養(yǎng)。

【檢驗方法】

氧化酶試驗：

必須按照制造商的使用說明進行氧化酶試驗。由于它是最終圖譜的組成部分，請將其結(jié)果記錄于報告單

上（第二十一個試驗）。

試條的準備

• 準備一個培養(yǎng)盒（盤和蓋子），倒入約 5mL 蒸餾水或軟化水【或其它不含添加劑或不含有能產(chǎn)生揮發(fā)

性氣體（如 Cl2, CO2,等）的化學(xué)物質(zhì)的水】于盤的蜂窩小凹中，造成一個濕室。

• 在盤的長邊寫上菌株號(不要寫在蓋上，因為操作過程中很容易將蓋子放到其它試條上）

• 從包裝中取出試條。

• 將試條置于培養(yǎng)盒中。

注意：API 20 E 只能用于腸道細菌和或非苛養(yǎng)的革蘭陰性桿菌。苛養(yǎng)菌由于對營養(yǎng)有特殊要求并且需要

合適的防護措施(例如布魯氏菌屬 Brucella 和法朗西絲菌屬 Francisella)，這些菌沒有包括在 API 20 E 數(shù)

據(jù)庫中。 必須采用其它方法，來排除或確認這些菌的存在

試條的判讀

• 孵育后，根據(jù)判讀表表判讀各反應(yīng)結(jié)果。

• 如果 3 個或 3 個以上測定（GLU 試驗+或-)為陽性結(jié)果，記錄所有自發(fā)反應(yīng)于結(jié)果報告單上并觀察需

要

附加試劑的試驗的結(jié)果：

- TDA 試驗：加 1 滴 TDA 試劑。深褐色為陽性反應(yīng)，記錄于報告單上。

- IND 試驗：加 1 滴 JAMES 試劑。整個反應(yīng)管出現(xiàn)粉紅色者為陽性，記錄于報告單上。

- VP 試驗：加 1 滴 VP 1 和 1 滴 VP 2 試劑。至少等待 10 分鐘，出現(xiàn)粉紅或紅色者表明為陽性結(jié)果，

記錄于報告單上。如淺粉紅色在 10 至 12 分鐘內(nèi)出現(xiàn)，判斷結(jié)果為陰性。

注意：吲哚產(chǎn)生試驗必須最后進行，因為該反應(yīng)釋放的氣體產(chǎn)物會千擾試條的其他試驗。在加入附加

試劑后，請小心勿調(diào)換培養(yǎng)盒蓋。

• 如果加入附加試劑前陽性結(jié)果（包括 GLU 試驗）的數(shù)量少于 3 個：

- 重新培養(yǎng) 24 小時（土 2 小時），且不要加任何試劑。

- 重新進行需要加入附加試劑的試驗（如前說明）。

- 為了完成鑒定，可能需要進行補充試驗（參考有關(guān)鑒定的段落）。

解釋

鑒定結(jié)果根據(jù)數(shù)值編碼獲得。

• 數(shù)值編碼的確定：

在結(jié)果報告單，每 3 個試驗為一組，每個陽性試驗分別賦予數(shù)值 1、2 或 4，在每組中，陽性反應(yīng)以相

應(yīng)的數(shù)值相加，由此可得到一個 7 位數(shù)字的編碼。氧化酶反應(yīng)構(gòu)成第 21 個試驗，如陽性則賦予數(shù)值 4。

• 鑒定：

鑒定結(jié)果是根據(jù)數(shù)據(jù)庫（V4.1)得到。

*根據(jù)鑒定檢索手冊：

- 從檢索手冊中查找數(shù)值編碼。

*根據(jù) apiweb TMM鑒定軟件：