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巴氏桿菌的特點與分類及培養(yǎng)特性與流行病學!

來源:北京百歐博偉生物技術有限公司   2025年06月04日 16:34  

一、菌種簡介

 

巴氏桿菌為無芽孢,不運動,兼性厭氧,菌體兩端常染色濃重的革蘭氏染色陰性小桿菌。因1880年巴斯德氏首先自病雞分離到本屬中的多殺巴氏桿菌而得名。鼠疫桿菌、假結核桿菌、腸道結腸炎桿菌和土拉桿菌原歸本屬,現前三者改歸耶爾森氏菌屬,種改歸弗朗西斯氏菌屬。本屬已確定的種有多殺巴氏桿菌嗜肺巴氏桿菌溶血巴氏桿菌尿巴氏桿菌鴨疫巴氏桿菌等。

 

二、知識介紹

 

巴氏桿菌( Pasteurellaceae)包括巴氏桿菌屬、曼氏桿菌屬、里氏桿菌屬、放線桿菌屬和嗜血桿菌屬等。其中常見的病原菌有多殺性巴氏桿菌、鴨疫里默氏桿菌、副豬嗜血桿菌以及豬傳染性膜肺炎放線桿菌等。

 

多殺性巴氏桿菌引起多種家畜和家食巴氏桿菌病,在臨床上表現為出血性敗血癥、傳染性肺炎或局部慢性感染等。該菌革蘭氏染色為陰性球杄菌,瑞氏染色常能見兩極濃染。在鮮血培養(yǎng)基和血清平板上生長良好,多殺性巴氏桿菌無溶血活性,普通培養(yǎng)基上生長不良對小鼠和家兔有高度致病性,禽源株對鴿有很強致病性。

 

鴨疫里默氏桿菌原名鴨疫巴氏桿菌,是錐鴨傳染性漿膜炎的病原菌。可引起1~8周齡,尤其是2~3周齡維鴨大批發(fā)病、死亡。鴨疫里默氏桿菌呈桿狀或橢圓狀,偶見個別長絲狀,可形成莢膜,無芽孢。瑞氏染色可見兩極著色,革蘭氏染色為陰性。初次分離培養(yǎng)給予5%~10%的CO2可促進其生長。在巧克力或胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)平板上生長良好普通培養(yǎng)基不生長。副豬嗜血桿菌和豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌都是系統(tǒng)不的革蘭氏陰性桿菌,對營養(yǎng)要求較高,生長需要血液中的生長因子。副豬嗜血桿菌生長需要血液中的V因子,初次分離時給予5%~10%的CO2可促進該菌生長。巧克力和TSA平板上生長良好,有報道該榮在巧克力平板傳代培養(yǎng)效果不佳,添加V因子的TSA平板適合用于副豬嗜血桿菌的傳代培養(yǎng)。該菌形態(tài)多樣,不同地區(qū)分離該菌可見球桿菌、桿菌、長絲狀等不同形態(tài)。該菌分離培養(yǎng)與保存難度較大,甘油保種存活率極低,常用冷凍真空干燥保存。豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌兼性厭氧,革蘭氏染色呈兩極染色的球桿菌,生長溫度37℃,培養(yǎng)需添加V因子才能生長,常用巧克力培養(yǎng)基培養(yǎng)。在綿羊血平板上可產生穩(wěn)定的β溶血,CAMP試驗陽性。豬是豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌高度專一的宿主,寄生在豬肺壞死灶內或扁桃體。

 

三、多殺性

 

多殺巴氏桿菌是一種兩端鈍圓,微突的短桿菌或球桿菌,長0.6-2.5微米,寬0.25-0.6微米,不形成芽胞,不運動,無鞭毛,革蘭氏染色陰性的需氧兼性厭氧菌。本菌在添加血清或血液的培養(yǎng)基上生長良好。在血瓊脂上生成灰白色,濕潤而粘稠的菌落,不溶血;在普通瓊脂上形成細小透明的露珠狀菌落;在普通肉湯中,初均勻混濁,以后形成黏性沉淀和菲薄的附壁菌膜;明膠穿刺培養(yǎng),沿穿刺孔呈線裝生長,上粗下細。本菌的抵抗力不強,在直射陽光和干燥的情況下迅速死亡;60℃10min可殺死;一般消在幾分鐘或十幾分鐘內可殺死。3%石炭酸和0.1%水在1min內可殺菌,10%石灰乳及常用的甲醛溶液3-4min內可使之死亡。在無菌蒸餾水和生理鹽水中迅速死亡,但在尸體內可存活1-3個月,在廄肥中亦可存活一個月。

 

用特異性莢膜抗原(K抗原)吸附于紅細胞上作被動血凝試驗,分為A、B、D、E四型血清群;利用菌體抗原(O抗原)作凝集試驗,將本菌分為12個血清型。若將K、O兩種抗原組合在一起,迄今已有16個血清型。該病的病型,宿主特異性,致病性,免疫性等,都與血清型有關。

 

本菌可使雞、鴨等發(fā)生禽霍亂,使豬發(fā)生豬肺疫,使各種牛、羊、兔、馬以及許多野生動物發(fā)生敗血癥。

 

四、溶血性

 

形態(tài)、培養(yǎng)和抵抗力與多殺性巴氏桿菌基本相似,但在血瓊脂上新分離菌菌落產生β溶血,連續(xù)繼代培養(yǎng)后,溶血性減弱或消失,在羔羊血瓊脂上可生成雙溶血環(huán)。在麥康凱瓊脂上能緩慢生長,菌落為紅色,不產生靛基質,一般能發(fā)酵乳糖,產酸,對家兔無致病力。根據生化反應和致病性的不同,可分為A和T兩個生物型;A型引起牛、綿羊肺炎和新生羔羊敗血癥;T型引起3月齡以上的羔羊敗血癥。另外還可按其可溶性莢膜抗原(K抗原)用間接紅細胞凝集試驗分為12個血清型,其中3、4、10屬于T生物型,其余各型均屬于A生物型,所有血清型都可見于綿羊、山羊,牛僅見1型。

 

五、菌株特點

 

本屬菌體大小(0.3~0.5)×(1.0~1.8)微米。卵圓形或桿狀,單個、成對或少數成短鏈。感染動物體液或組織制片中的菌體兩極濃染更為明顯。用姬姆薩氏染色液或美蘭染色,可見到薄莢膜。普通肉湯即可生長。除產氣巴氏桿菌能產生微量氣體外,本屬各成員均能利用葡萄糖等碳水化合物,產生少量酸而不產氣,有過氧化氫酶,常有氧化酶、還原硝酸鹽、不液化明膠。甲基紅(MR)反應陰性,VP反應陰性,適溫為37℃。DNA中的G+C克分子含量為36.5~40.05%。

 

本屬菌寄生于哺乳動物和禽類,當外界劇變或機體抵抗力降低時,可成為急、慢性病或流行性疾病的病原。人偶有感染成為慢性疾患,如心包炎和被犬、貓咬傷發(fā)生膿灶等。

 

本屬中的多殺巴氏桿菌為害畜、禽最嚴重,從發(fā)病動物體液或組織中培養(yǎng)分離到的菌落基本有兩型:一為過45°折光,在低倍顯微鏡下,呈現鮮明的藍綠色而帶金光,邊緣有狹窄的紅黃色帶的Fg菌落型。相當于血清型乙型。對小白鼠、家兔和豬毒力強大,每只注射活菌10~200個即可致死,而對家禽每只必須注射10個以上才可致死。

 

另一為在45°折光下,菌落呈現橘紅色,邊緣稍帶狹窄的黃綠光的FO菌落型,相當于血清型甲型。對雞、鴿毒力強大,對豬的毒力較次,家兔對兩型的致死量無甚差異。

 

在中國,牛、豬、驢和馬的多殺巴氏桿菌病絕大多數為Fg型菌所致,家禽流行性巴氏桿菌病都是FO型菌所致。慢性病例中偶爾發(fā)現菌落較小、折光下呈現淡藍色的菌落。自病兔分離的菌落也都是FO型。

 

多殺巴氏桿菌菌體抗原有12個型,莢膜抗原有5個型,前者以阿拉伯數字表示,后者以英文大寫字母表示,如1:A,2:A,1:B等。已知組成的菌型有16個。血清型與宿主的分布有一定關系。細胞壁含有明顯的內毒素活性,但未發(fā)現外毒素。本菌可引起家禽霍亂的暴發(fā)性流行,牛的出血性敗血病、原發(fā)性或繼發(fā)性肺炎等。國外免疫用的菌苗以加不同佐劑的滅活菌為主,也使用禽霍亂弱毒活菌。中國已于1959年使用弱毒活苗。

 

其他幾個如嗜肺巴氏桿菌可感染牛、小鼠、兔或人,引起胸膜肺炎;溶血巴氏桿菌可感染牛、羊,引起牛、羊肺炎或敗血癥;巴氏桿菌可在健康人鼻中發(fā)現,偶致臭鼻病。可用磺胺藥治療,抗生素與高度免疫血清合用效果更好。

 

六、菌株分類

 

要是按照類型劃分的話,巴氏桿菌可以分成多殺巴氏桿菌、溶血性巴氏桿菌。這兩種桿菌都很壞,多殺巴氏桿菌會使雞和鴨等動物發(fā)生禽霍亂,會使豬患上肺疫,還會使其他動物發(fā)生敗血癥,這些動物中包括牛,羊,兔子以及其他很多野生動物。溶血性巴氏桿菌會感染牛和羊等,讓它們感染上敗血癥和肺炎。還能讓這些動物們感染上胸膜肺炎。

 

七、培養(yǎng)特性

 

急性死亡動物,菌落光滑、圓整,半透明的中等大小菌落,折射光線下觀察,菌落顯示熒光。肉湯培養(yǎng)均勻一致渾濁,對小白鼠有一定致病力,稱這種菌型為光滑型。帶菌者或慢性患病動物粗糙、不透明大菌落,肉湯培養(yǎng)一致渾濁,對小白鼠致病力不強,稱中間型。帶菌動物,菌落干燥、粗糙,肉湯培養(yǎng)有顆粒狀沉淀物,對小白鼠致病力弱,稱粗糙型。

 

八、抵抗力

 

這種菌不產生芽胞的小桿菌中,是對物理和化學作用抵抗力很低的一種。陽光下10分鐘,水、土壤中不超過2周,室溫或4-8℃ 冰箱保存2-3周,真空存在5年。

 

九、流行病學

 

世界范圍,熱帶地區(qū)嚴重。易感動物:豬、兔、黃牛、水牛、牦牛均易感。家禽雞、鴨、鵝均易感。發(fā)病無明顯季節(jié)性,但多發(fā)于冷熱交替期,故9、10、11月份常見。散發(fā)性或地方流行性,豬肺疫、鴨巴氏桿菌病(搖頭瘟)可呈流行性。禽的強毒Fo型也可感染豬、牛等家畜,不過這樣引起的巴氏桿菌病多是散發(fā)性的。

 

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