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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>行業專用試劑>生物試劑>10184ES70 動物組織直接PCR試劑盒

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10184ES70 動物組織直接PCR試劑盒

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企業簡介

翌圣生物科技(上海)股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質改造和酶進化技術為驅動,聚焦生命科學產業鏈上游核心原料,從事分子、蛋白和細胞三大品類生物試劑的研發、生產與銷售的高新技術企業,通過打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細胞的技術開發路徑,成為國內少數同時覆蓋三大品類生物試劑、兼備核心技術自主研發能力和規模化生產能力的高新技術企業,產品廣泛應用于生命科學研究領域、診斷與檢測領域和生物醫藥領域。



主營業務


公司憑借在蛋白質改造和酶進化領域的技術優勢和深耕生物試劑行業多年積累的豐富經驗,構建了品質優良、類型齊全、種類豐富的產品管線。自公司成立以來,公司研發、生產和銷售的生物試劑超過3000種,涵蓋分子、蛋白、細胞三大品類的生物試劑,能夠滿足客戶多種類型生物試劑的一體化采購需求。公司核心產品覆蓋qPCR系列、NGS系列、逆轉錄系列、核酸提取與純化系列、PCR系列、分子克隆系列、體外轉錄系列、抗體、蛋白純化系列、蛋白分析系列、重組蛋白、細胞分析系列、細胞培養系列、細胞轉染系列、報告基因檢測系列等多個品類的生物試劑,廣泛應用于生命科學研究、診斷檢測和生物醫藥等領域。

發展歷程



榮譽資質


翌圣生物通過申請商標和軟件著作權的方式保障核心技術和市場競爭力,不斷加強公司品牌建設。截至2022年3月31日,公司已經獲得授權18項(其中發明14項、實用新型1項、外觀設計3項)和45項與生物試劑相關的軟件著作權,擁有經國家知識產權局商標局核準的注冊商標權37項以及4項境外注冊商標,是國家高新技術企業和上海市專精特新企業。

榮譽風.jpg


創新平臺


經過多年的產品研發技術經驗的沉淀以及持續的研發創新,翌圣生物積極開展“產學研”合作,與擁有生物催化與酶領域國家重點實驗室的湖北大學、擁有教育部工業生物領域重點研究基地的江南大學展開合作,優化生物試劑關鍵原料的生產和表達工藝。翌圣生物以基因工程技術、生物信息技術、細胞生物學技術、免疫學技術、生化分析技術等生命科學領域的共性生物技術為基礎,建立了六大核心技術平臺——雙向分子酶理性設計與定向進化平臺、密度發酵與超潔凈純化平臺、分子診斷試劑關鍵原料研發平臺、高通量測序建庫試劑創新研發平臺、高性能單克隆抗體研發平臺和mRNA醫藥應用研發平臺,目前已經自主研發出20項核心技術,打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細胞的技術開發路徑,覆蓋技術研發、產品升級、規模生產和質量控制等生物試劑研發和生產的各關鍵環節。


拼圖6.jpg


工業化生產


翌圣生物擁有按照準GMP 標準建設運營的工業化生產基地,配有噸級發酵線、工業級 AKTA 純化線和全自動包裝線。同時,公司通過了ISO 13485:2016質量管理體系認證,從原料控制、生產管理、質檢管控、倉儲運輸等對生產線進行360度管理監督,保證產品過程的可控制性及可追溯性,竭盡全力為您提供可靠的產品。

工業化生產.jpg


客戶服務


翌圣生物憑借優質穩定的產品質量、高效及時的響應能力、快速穩定的交付能力和周到完備的售后服務獲得了眾多科研用戶和工業用戶的認可,為檢測公司、治療公司、工具類公司和科學研究實驗室提供應用于科學研究、體外診斷、基因測序、生物醫藥等的生物試劑。與中國科學院、清華大學、北京大學、復旦大學、上海交通大學、浙江大學等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫藥、藥明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工業客戶建立了穩定、緊密的合作關系,公司產品被多次使用在Nature、Science、Cell等國際頂級期刊論文發表中。

圖片222.jpg

公司企業文化



使命

幫助客戶創造價值,讓世界更健康更快樂

愿景

成為生命科學工具領域全球Top⑩
具備驅動產業變革的技術創新能力
擁有一支持續學習型的翌圣鐵軍


價值觀


價值.png


翌圣生物始終秉承“幫助客戶創造價值,讓世界更健康更快樂”的使命,專注于技術創新和產品升級,不斷拓展核心技術的應用領域,為客戶提供更為的產品與服務,助力我國打造自主可控的生物試劑產業鏈。同時,翌圣生物將進一步推進國際化戰略,繼續布局和拓展海外市場,為全球生物試劑產業發展貢獻力量。










分子生物學試劑,細胞生物學試劑,免疫學試劑,蛋白組學試劑等

供貨周期 現貨 規格 200T
貨號 10184ES70 應用領域 醫療衛生,化工,生物產業
  • 產品信息

    產品名稱

    產品編號

    規格

    價格(元)

    Animal Tissue Direct PCR Kit (With Dye) 動物組織直接 PCR 試劑盒

    10184ES50

    50T

    433.00

    Animal Tissue Direct PCR Kit (With Dye) 動物組織直接 PCR 試劑盒

    10184ES70

    200T

    1453.00


    產品描述

    動物組織直接 PCR 試劑盒是一款可直接對不同動物組織進行 PCR 擴增的試劑盒,適應性廣、穩定性強、操作簡易。

    本試劑盒采用*的裂解緩沖液體系,可以快速的裂解多種動物組織樣品并釋放出基因組 DNA,如昆蟲足翅、鼠尾、 鼠趾、動物皮膚和內臟等。裂解產物可以用于 DNA 提取純化、也可以直接用于 PCR 反應、也可以在 -20℃ 或以下溫度條件下長期保存備用。

    本試劑盒中提供的 2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye)具有很強的擴增兼容性,不需要額外采用純化提取試劑去除裂解產物中的各種殘骸雜質,能直接以待測樣品裂解液為模板,進行高效特異性擴增。該試劑為 2 倍濃縮 PCR 反應混合液,包含了用于 PCR 擴增除模板和引物外的所有組分,大大簡化擴增步驟的操作過程,降低污染機率。

    該試劑盒可用于動物基因擴增檢測、轉基因動物基因型鑒定等。


    產品組分

    編號

    組分

    產品編號/規格

    儲存

    10184ES50(50 T)

    10184ES70(200 T)

    10184-A

    Lysis Buffer

    10 mL

    20 mL × 2

    2-8℃

    10184-B

    Proteases

    100 μL

    400 μL

    -20℃

    10184-C

    10184-D

    2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye)

    5 × PCR Enhancer

    500 μL

    200 μL

    1 mL×2

    800 μL

    -20℃

    -20℃

    a)Lysis Buffer 和 Proteases 兩種組分配合使用于動物組織裂解。

    b)2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye) 包含 PCR 擴增所需要的熱啟動 Taq DNA 聚合酶、dNTP 和 Mg2+等;已混有溴酚藍染料作為電泳指示劑, PCR 產物可以直接進行電泳。

    c)5 × PCR Enhancer :高GC含量擴增(如大于65%)時,建議使用5 × PCR Enhancer。


    運輸方法

    冰袋運輸,有效期1年。


    保存方式

    1. 試劑 10184-A【Lysis Buffer】為動物組織裂解緩沖液,建議保存于2-8℃。 

    2. 試劑 10184-B【Proteases】為動物組織裂解劑,使用時請勿長久開蓋,建議保存于-20℃,避免反復凍融。

    3. 試劑 10184-C【2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye)】,建議保存于-20℃,避免反復凍融。

    4. 試劑 10184-D【5 × PCR Enhancer】,建議保存于-20℃,避免反復凍融。


    操作方法

    1. 在離心管中加入 200 μL Lysis Buffer和2 μL Proteases,輕輕渦旋混勻。

    2. 取約 10 mg(長度2 mm左右)動物組織,置于上述離心管中,輕輕渦旋混勻。

    3. 55℃孵育5-30 min,然后 95℃處理5 min。 

    4. 12000 rpm 離心2 min。

    5. 將上清轉移至新的離心管,-20℃保存或直接用 PCR 擴增。

    【注】:

    a)Lysis Buffer 與 Proteases 混合后盡快使用,不宜長期保存;大量樣本操作時,可以將 Lysis Buffer 與 Proteases 按 100 μL:1 μL 的比例混勻備用。 

    b)組織應取少量并盡量剪碎,以便裂解反應更順利進行。各組織推薦使用量:鼠尾:長度2-4 mm;鼠趾:1-4個;鼠臟器、腦:直徑2-4 mm;斑馬魚、線蟲、果蠅等昆蟲組織:1-4個;細胞數量:105-108個。斑馬魚、線蟲、果蠅等較小樣本的組織,可適當減少Lysis Buffer至50-100 μL。昆蟲等外殼堅硬的樣本,建議剪碎樣本并增加Proteases至4 μL。

    c)55℃孵育,一般 5 min 即可滿足多數 PCR 需求,如鼠尾、鼠耳等組織;若需要的 DNA 量較大或樣品較難裂解,可將時間延長至 30 min 或更久;裂解時間可在5-30 min之間調整,組織塊不需*裂解,殘余的部分在后續離心步驟中可被除去。


    PCR反應鑒定——PCR反應體系

    組分

    體積(μL)

    終濃度

    2× Tissue Direct PCR Mix(With Dye

    10

    1 ×

    Forward Primer(10 μM)

    0.5

    0.25 μM

    Reverse Primer(10 μM)

    0.5

    0.25 μM

    裂解產物(DNA模板)

    2

    -

    無菌超純水

    To 20

    -

    【注】:各組分使用前應充分混

    a)模板使用量:建議總體系的5-20%之間,避免超過總體系的20%。

    b)引物終濃度:反應性能較差時,推薦在 0.1- 0.5 μM 范圍內調整引物濃度。

    c)反應體系:推薦使用 20 μL,以保證目的基因擴增的有效性和重復性。

    d)體系配制:配制好PCR反應體系,置于渦旋儀上渦旋混勻,瞬時離心將反應液集于管底。

    e)對照反應:建議進行PCR時,設置陽性和陰性PCR對照反應以便于排除假陽性或假陰性的干擾。


    PCR反應鑒定- PCR反應條件

    循環步驟

    溫度

    時間

    循環數

    預變性

    94℃

    5 min

    1

    變性

    94℃

    10 sec

    35

    退火*

    60℃

    20 sec

    延伸

    72℃

    20 sec

    終延伸

    72℃

    5 min

    1

    *退火溫度:請參考引物的理論 Tm 值,退火溫度可設置低于引物理論值5℃,或通過梯度 PCR 確定最佳溫度。  


    注意事項:

    1. 建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,應盡量避免反復凍融,否則會導致模板的降解,影響 PCR 效率。

    2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服、佩戴口罩、眼罩、一次性手套等采取防護性措施進行實驗操作。
    3. 本產品僅作科研用途!

     

    常見問題與解決方法

    常見問題

    可能原因

    解決方法

    陽性對照、待測樣本均無條帶。

    PCR反應體系或反應條件不合適。

    使用梯度PCR摸索PCR最佳反應條件。

    PCR試劑保存不當失去活性。

    2× PCR Mix應保存于-20℃,使用時避免反復凍融。若使用頻繁,可在4℃短時間存放。

    引物設計問題。

    嘗試重新設計引物進行檢查。

    陽性對照有目的條帶,待測樣本無條帶或條帶弱。

    不當儲存或長期儲存引起試劑活性喪失。

    使用新鮮的試劑。

    加入組織裂解液過量。

    增大反應體系,或減少裂解液的用量。

    樣本裂解混合液保存不當或保存時間過久,DNA基因組已經降解。

    裂解混合液可在4℃保存2-3天,盡量使用新制備的裂解液混合液進行PCR。

    模板加入量不適合。

    在反應體系5-20%范圍內優化模板加入量。

    PCR循環數不足。

    適當增加PCR的循環數,推薦在35-40循環為佳。因為模板復雜,一般PCR反應要比用純化的 DNA模板多5-10個循環為佳。

    非特異性擴增

    PCR退火溫度太低,循環數、引物濃度或模板濃度太高。

    提高PCR退火溫度,降低PCR循環數、引物濃度或模板濃度。

    PCR引物錯配。

    重新設計PCR引物。

    配制PCR反應體系時溫度太高或配制完成后放置時間太久。

    PCR反應體系的配制在低溫下進行,配制完成后盡快進行PCR擴增反應。

    陰性對照出現目的條帶

    操作工具或試劑污染。

    實驗所有試劑或器材均應高壓滅菌。操作時應小心輕柔,防止將靶序列吸入加樣槍內或濺出離心管外。

    樣本間交叉污染。

    每個取樣器只對一個樣本使用;或取完一個樣本后,將取樣器刃口浸入2%的次氯酸鈉溶液中,反復涮洗,然后用干凈的紙巾擦干殘液。


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    貨號

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    HB210824



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