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以下是天津本生熒光定量PCR板的使用要點及注意事項:
一、核心使用規范
板型選擇?
優先選用原廠配套板(如Roche LightCycler 96孔板)或兼容品牌(如Bio-Rad白色矮管)
96孔板標準反應體積為20-100μL,需確保孔板材質為光學級透明聚丙烯
加樣操作?
使用低吸附槍頭分裝反應液,避免氣泡產生(氣泡會干擾熒光檢測)
推薦預混反應體系后再分裝至各孔,減少孔間誤差
二、實驗流程控制
封板要求?
必須使用光學透明封板膜,裸手或粉末手套接觸會污染光學表面
封板后需離心(1000×g,1分鐘)使液體沉底并消除氣泡
程序設置?
基線循環數建議設為3-15循環(由儀器自動計算熒光背景值)
閾值設定通常為基線熒光標準差10倍,可手動調整至指數擴增期
三、質量控制要點
對照設置?
必須包含無模板對照(NTC)監控污染
建議添加內參基因孔用于數據標準化
性能驗證?
標準曲線斜率應在-3.1至-3.6之間(對應90-110%擴增效率)
復孔CV值需<5%,否則需排查加樣誤差或試劑不均問題
四、特殊場景處理
高通量檢測?
384孔板需配合自動化液體處理系統,減少人工操作誤差
多色熒光檢測時需設置光譜校準孔消除通道間串擾
數據保存?
實驗數據建議實時導出至U盤(需格式化后使用)
原始數據應包含擴增曲線、熔解曲線及Ct值表格
注:不同儀器型號可能存在具體操作差異,需參照設備手冊,以上資料僅供參考,具體請咨詢技術老師。
天津本生一直視質量控制為企業的生命,追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業精神作為標準,以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創美好的未來。
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