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病毒滴度測定方法

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    2013年01月07日
關鍵詞
病毒滴度測定方法
上傳者
上海研生實業(yè)有限公司
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資料簡介

 測定病毒滴度方法有空斑、TCID50(半數(shù)組織培養(yǎng)物感染劑量),具體的要看你是什么病毒、敏感細胞是什么。

空斑檢測的是具有感染力的病毒粒子數(shù)量,是病毒滴度檢測的金標準。空斑形成單位(Plaque-forming unit,PFU)測定是一種測定病毒感染性比較準確的方法,將適當濃度的病毒懸液接種到生長單層細胞的培養(yǎng)板、玻璃平皿或扁瓶中,當病毒吸附于細胞上后,再在其上復蓋一層溶化的半固體營養(yǎng)瓊脂層,待凝固后,孵育培養(yǎng)。當病毒在細胞內復制增殖后,每一個感染性病毒顆粒在單層細胞中產生一個局限性的感染細胞病灶,病灶逐漸擴大,若用中性紅等活性染料著色,在紅色的的背景中顯出沒有著色的“空斑”,清楚可見。由于每個空斑由單個病毒顆粒復制形成,所以病毒懸液的滴度可以用每毫升空斑形成單位(PFU)來表示;

TCID50也可以計算病毒滴度,其滴度值理論上為半個具有感染力的病毒粒子數(shù)量的稀釋值,理論上即可換算為logTCID50=log plaque+0.67

此外,一些病毒還有其它較為粗放的滴度檢測方法,如血凝效價、OD280等。

詳情請看:病毒滴度測定方法

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