一、實驗目的　　1. 掌握用外標法進行色譜定量分析的原理和方法。　　2. 了解氣相色譜儀氫火焰離子檢測器FID的性能和操作方法。　　3. 了解氣相色譜法在產品質量控制中的應用。　　4. 學習氣相色譜法測定甲醇含量的分析方法。　　二、實驗原理　　在釀造白酒的過程中，不可避免地有甲醇產生。甲醇是無色透明的具有高度揮發性的液體，是一種對人體有害的物質。甲醇在人體內氧化為甲醛、甲酸，具有很強的毒性，對神經系統尤其是視神經損害嚴重，人食入 5 g 就會出現嚴重中毒，超過 12. 5 g 就可能導致死亡，在白酒的發酵過程中，難以將甲醇和乙醇*分離，因此國家對白酒中甲醇含量做出嚴格規定。根據國家標準(GB10343-89)，食用酒精中甲醇含量應低于0.1g?L-1(優級)或0.6 g?L-1(普通級)。　　氣相色譜法是一種、快速而靈敏的分離分析技術，具有*的分離效能。一個混合物樣品定量引入合適的色譜系統后，樣品被氣化后，在流動相攜帶下進入色譜柱，樣品中各組分由于各自的性質不同，在柱內與固定相的作用力大小不同，導致在柱內的遷移速度不同，使混合物中的各組分先后離開色譜柱得到分離。分離后的組分進入檢測器，檢測器將物質的濃度或質量信號轉換為電信號輸給記錄儀或顯示器，得到色譜圖。利用保留值可定性，利用峰高或峰面積可定量。　　外標法是在一定的操作條件下，用純組分或已知濃度的標準溶液配制一系列不同含量的標準溶液，準確進樣，根據色譜圖中組分的峰面積(或峰高)對組分含量作標準曲線。在相同操作條件下，依據樣品的峰面積(或峰高)，從標準曲線上查出其相應含量。利用氣相色譜可分離、檢測白酒中的甲醇含量，在相同的操作條件下，分別將等量的試樣和含甲醇的標準樣進行色譜分析，由保留時間可確定試樣中是否含有甲醇，比較試樣和標準樣中甲醇峰的峰面積，可確定試樣中甲醇的含量。　　三、儀器與試劑　　1. 儀器：GC-9860II氣相色譜儀，氫火焰檢測器(FID)，色譜工作站，毛細管柱，10μL微量注射器1支，100mL容量瓶1只，25mL容量瓶5只，5mL吸量管1只。　　2. 試劑　　甲醇(色譜醇)，60%乙醇水溶液(不含甲醇)。取1μL進樣無甲醇峰即可。　　四、實驗步驟　　1. 色譜柱的準備　　將內徑為0.32mm、長為30m，液膜厚0.5μm的石英毛細管柱安裝調試正常。　　2. 色譜操作條件：檢測器FID;進樣口溫度180℃;檢測器溫度200℃;柱溫50℃。　　3. 甲醇標準溶液的配制　　100mL 容量瓶中裝有少量 60%的乙醇溶液, 然后電子天平上準確稱量 0.5000g 的色譜甲醇于此容量瓶中, zui后用60%的乙醇溶液定容, 此溶液為 5g/L 的甲醇儲備液。　　準確吸取標準甲醇儲備液 1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL, 分別置于 5個 25mL 容量瓶中, 用 60%乙醇稀釋到刻度, 混勻，分別得到0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 mg/mL的甲醇標準溶液系列,。　　4. GC-9860II氣相色譜使用方法　　(1)打開氣體發生器，確認凈化器上各開關閥處于全開的位置(ON)，等到氮氣，氫氣，空氣的壓力達到相應的值后(約30-40min)，打開儀器電源開關，進入D-7900工作站，設定進樣口溫度180℃，檢測器溫度200℃，柱溫50℃。點開對應的檢測器信號通道(FID：1通道)，等儀器升溫穩定。　　(2)點火：查看檢測器溫度，等檢測器溫度達到設定值后，確認儀器右側下面氣路面板上對應檢測器的空氣和氫氣閥處于全開的位置。按點火鍵，確認所使用的檢測器火已點著(看是否有水蒸氣產生和基線是否有變化)。等基線水平后，依次進樣分析。　　(3)實驗結束后，應當先將氫氣發生器關閉，然后把柱箱溫度設為30度，把進樣器和檢測器關閉，降溫，等柱箱溫度低于50℃以下才能退出軟件，關閉儀器電源開關，關閉氣體發生器。　　4. 標準工作曲線的制作　　用微量注射器吸取1μL各色譜級甲醇注入色譜儀，獲得色譜圖，以保留時間作為對照定性，確定甲醇色譜峰。　　在色譜工作站建立新方法(面積外標法)，在確定的色譜條件下, 依次由低到高分別用注射器準確取 1μL 標準使用液進行分析, 每個濃度點用色譜儀分析3次，測得它們的峰面積, 結果以甲醇平均峰面積為縱坐標Y，甲醇濃度為橫坐標x，繪制標準工作曲線，得到線性方程和相關系數。　　5. 白酒樣品中甲醇含量的測定　　在相同色譜條件下, 吸取1μL白酒樣品進行分析，分析結果由色譜工作站直接計算得出。樣品重復測定3 次, 取平均值, 便可得到白酒樣品中甲醇的含量。　　思考題：　　1. 為什么甲醇標準溶液要以60%乙醇水溶液為溶劑配制?配制甲醇標準溶液還需要注意些什么?　　答：因為待測的為白酒，白酒里面含有乙醇，所以為了排除其他因素，保證實驗的準確性需要控制變量，則需要標準溶液中也含有等量的乙醇。　　配制甲醇溶液需要潤洗移液管，讀刻度時視線要與凹液面在一個水平面上面，向容量瓶中加入60%乙醇水溶液時到zui后1-2毫米時要用膠頭滴管逐滴加入。　　2. 外標法定量的特點是什么?外標法定量的主要誤差來源有哪些?　　答：(1)將未知樣品中某一物質的峰面積與該物質的標準品的峰面積直接比較進行定量。　　(2)待測樣品中所含的測定物質含量過少，儀器無法分析得到結果;在加入物質到色譜儀中時，加入的體積沒有掌握好，加入的體積有誤差。