1 主題內容與適用范圍

本標準規定了出口蜂蜜中殺蟲脒殘留量檢驗的抽樣、制樣和氣相色譜測定方法。
本標準適用于出口蜂蜜中殺蟲脒殘留量的檢驗。

2 抽樣和制樣

2.1 檢驗批
以不超過 1000件為一個檢驗批。同一檢驗批的商品應具有相同的特征,如包裝、標記、產地、規格、等級等。
2.2 抽樣數量
批量(件) zui低抽樣數(件)
50以內 5
50～100 10
101～500 每增加100,增取5
501以上 每增加 100,增取2
2.3 抽樣工具
2.3.1 取樣管：不銹鋼管,長約115cm,直徑約2.5cm。
2.3.2 混樣器：搪瓷桶(或杯)。
2.3.3 單套桿：不銹鋼制。
2.3.4 樣品瓶：500mL磨砂蓋廣口玻璃瓶。
2.4 抽樣方法
按 2.2規定的抽取件數隨機抽取,逐件開啟。將取樣管緩緩放入,吸取樣品,如遇蜂蜜結晶時,則用單套桿插到底,抽取樣品。每件抽取樣品不少于100g,作為原始樣品。將所取樣品傾入混樣器,混和均勻,裝入清潔干燥的樣品瓶內,封口后,標明標記并及時送實驗室。
2.5 試樣制備
對未結晶的樣品將其用力攪拌均勻,對有結晶析出的樣品可將樣品瓶蓋塞緊后,置于不超過60℃的水浴中溫熱,俟樣品全部融化后攪勻,迅速冷卻至室溫。在融化時必須注意防止水分揮發。制備好的試樣置于樣品瓶中,密封,并標明標記。
2.6 試樣保存
將試樣于室溫下保存。
注：在抽樣和制樣的操作過程中,必須防止樣品污染或發生殘留物含量的變化。

3 測定方法

3.1 方法提要
蜂蜜中殘留的殺蟲脒［N-(4-氯-鄰甲苯基)-N',N'-二甲基甲脒C10H13N2Cl］在丙酮氫氧化鈉溶液中用正已烷提取,提取液經堿－正已烷、酸－正已烷液液分配法凈化后,以氣相色譜儀氮磷檢測器進行檢測,以二苯胺作內標進行定量。
3.2 試劑和材料
除特殊規定外試劑均為分析純,水為蒸餾水或相適應的去離子水。
3.2.1 丙酮：重蒸餾。
3.2.2 正已烷：加堿重蒸餾。
3.2.3 氫氧化鈉溶液：1mol/L。
3.2.4 氫氧化鈉溶液：0.5mol/L。
3.2.5 鹽酸溶液：0.1mol/L。
3.2.6 內標溶液：二苯胺－正已烷溶液：0.500μg/mL。
3.2.7 殺蟲脒標準品：純度＞99%。
3.2.8 標準溶液配制：稱取約40.0mg殺蟲脒標準品,至0.1mg,于100mL容量瓶中,用正已烷溶解并定容作為貯備液,濃度為0.400mg/mL。再用正已烷定量稀釋并定量加入內標物二苯胺,制得標準工作液。其中殺蟲脒濃度約為0.200μg/mL或與樣液中殺蟲脒濃度相近,二苯胺濃度約為0.500μg/mL。新鮮配制。
3.3 儀器和設備
3.3.1 氣相色譜儀并配有氮磷檢測器。
3.3.2 積分儀或記錄儀。
3.3.3 旋轉蒸發器。
3.3.4 微量注射器：10μL。
3.4 測定步驟
3.4.1 提取
稱取約20g試樣,至0.1g,于100mL燒杯中,加入30mL1mol/L氫氧化鈉溶液,攪拌溶解,再加50mL丙酮,攪勻后倒入250mL分液漏斗中。用數毫升丙酮洗滌燒杯二次,并入上述分液漏斗中,并繼加50mL正已烷,劇烈振搖2min。靜置加層后,保留上層正已烷溶液,棄去下層或下層及中層液。
3.4.2 凈化
將上述正已烷溶液先后以30mL,20mL0.5mol/L氫氧化鈉溶液各洗滌一次,棄去氫氧化鈉洗滌液。在正已烷中加入20mL0.1mol/L鹽酸溶液,劇烈振搖2min,靜置分層。將下層鹽酸溶液放入另一250mL分液漏斗。于正已烷液中再加入10mL0.1mol/L鹽酸溶液,劇烈振搖2min,靜置分層,合并鹽酸溶液于同一分液漏斗中,并棄去正已烷層。在鹽酸溶液中,加入30mL1mol/L氫氧化鈉溶液,再加入60mL正已烷,劇烈振搖2min,靜置分層。棄去全部水層。將正已烷溶液從分液漏斗上口倒入旋轉蒸發器的蒸發瓶內,并用數毫升正已烷洗滌分液漏斗二次,合并洗滌液于同一蒸發瓶內。在45℃水浴中減壓濃縮至近干。定量加入1.00mL0.500μg/mL二苯胺－正已烷溶液,溶解殘渣,所制成樣液供氣相色譜測定。
3.4.3 測定
3.4.3.1 色譜條件
a. 色譜柱：玻璃柱,2m×3mm(內徑),填充物為6%(m/m)SE-54涂于 ChromosorbWHP(80～100目)?；蛱畛湮餅?5%(m/m)SE-30涂于 ChromosorbWHP(80～100目),加0.6%(m/m)KOH;
b. 氮氣：純度≥99.99%,60mL/min;
c. 氫氣：2.5mL/min;
d. 空氣：170mL/min;
e. 柱溫：198℃;
f. 進樣口溫度：250℃;
g. 檢測器溫度：250℃;
h. 銣珠電壓：6.8×2V。
3.4.3.2 色譜測定
分別將標準工作溶液、樣液注入氣相色譜儀,進樣量：各2μL。出峰保留時間：二苯胺約為3.8min;殺蟲脒約為4.4min。
3.4.4 空白試驗：除不加試樣外,按上述測定步驟進行。
3.5 結果的計算及表述
用色譜數據處理機按內標法計算或按下式計算：
Cs·A·Asi·mi
X=────────-
Csi·Ai·As·m
式中：X——蜂蜜樣品中殺蟲脒含量,mg/kg;
Cs——標準工作液中殺蟲脒濃度,μg/mL;
Csi——標準工作液中二苯胺濃度,μg/mL;
A——樣液中殺蟲脒色譜峰面積,mm**2;
Ai——樣液中二苯胺色譜峰面積,mm**2;
As——標準工作液中殺蟲脒色譜峰面積,mm**2;
Asi——標準工作液中二苯胺色譜峰面積,mm**2;
mi——樣液中二苯胺總添加量,μg;
m——蜂蜜試樣總量,g。
注：計算結果須扣除空白值。

4 方法的測定低限、回收率

4.1 測定低限
本方法的測定低限為0.005mg/kg。
4.2 回收率
回收率實驗數據：
殺蟲脒濃度在 0.005～0.100mg/kg范圍,回收率為89.8%～100.5%。


附加說明：
本標準由中華人民共和國國家進出口商品檢驗局提出。
本標準由中華人民共和國上海進出口商品檢驗局負責起草。
本標準主要起草人葛修麗、蔡則慈。
主要參考文獻
Dr.Wiertz,KurzerAbri β derMethode-ChlordimeforminHonig