文章標題：SH-SY5Y細胞

關鍵詞：SH-SY5Y細胞培養，SH-SY5Y細胞價格，來源，特征特性，染色鑒定

中文名稱：人神經母細胞瘤細胞

生長狀態：貼壁生長

熱烈祝賀 我公司月銷量 20株

在正常細胞中，磷脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質雙層的內側，細胞發生凋亡早期，膜磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內側翻向外側。Annexin V是一種磷脂結合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，故可通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此Annexin V被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。在細胞發生凋亡時，膜磷脂酰絲氨酸外翻的發生早于細胞核的變化，而此時Propidium Iodide（PI）不能通過細胞膜。

細胞壞死時，雖然也會發生磷脂酰絲氨酸外翻，但此時細胞膜的通透性明顯增加，PI等核酸染料進入細胞與細胞核中的核酸結合，發出紅色熒光。所以Annexin V-FITC(綠色熒光)常與鑒定細胞死活的核酸染料（如PI）合并使用，來區分凋亡細胞與死亡細胞。

技術原理及步驟

1. 離心收集細胞，微量離心機轉速1000 rpm，離心時間5 min，棄培養基。

2. 用冷PBS洗滌細胞兩次。

3. 用400 μL1× Binding Buffer懸浮細胞，濃度大約為1×106 cells/mL。

4. 在細胞懸浮液中加入5 μlLAnnexin V-FITC，輕輕混勻后于2~8°C避光條件下孵育15min。

5. 加入10 μL PI后輕輕混勻于2~8°C避光條件下孵育5 min。

6. 在1小時內用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測。

應用實例

應用領域

細胞的早期凋亡及區分凋亡與壞死細胞

服務周期

我公司在正式接受實驗委托2個星期左右完成實驗并提供實驗報告。

客戶須知（對材料的要求、注意事項）

需提供細胞類型，處理條件。

選擇適當的細胞接種濃度。一般情況下，96孔培養板的一內貼壁細胞長滿時約有105個細胞。但由于不同細胞貼壁后面積差異很大，因此，在進行MTT試驗前，要進行預實驗檢測其貼壁率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線，確定試驗中每孔的接種細胞數和培養時間，以保證培養終止致細胞過滿。這樣，才能保證MTT結晶形成酌量與細胞數呈的線性關系。否則細胞數太多敏感性降低，太少觀察不到差異。

注意:細胞株的生物等級，由于有些細胞株及菌株屬于管制品，所以從國外購貨比較麻煩。

形態學改變:細胞體積明顯增大,為成熟淋巴細胞3-4倍。核膜清晰,核染色質疏松呈網狀。核內見明顯核仁1-4個。胞漿豐富,嗜堿性,有偽足樣突出。胞漿內有時可見小空泡。

細胞培養是一種無菌操作技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側，常規操作和封閉培養于一室，而洗刷消毒在另一室。

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