標(biāo)題：RCM RCM細(xì)胞株 細(xì)胞株培養(yǎng)

我公司認(rèn)為購(gòu)買細(xì)胞的客戶有培養(yǎng)細(xì)胞的經(jīng)驗(yàn)，客戶收到細(xì)胞后，因運(yùn)輸途中細(xì)胞會(huì)有分泌物，所以原瓶中的培養(yǎng)液不能循環(huán)利用，將其全部倒掉，使用自己實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基（試劑銷售推薦使用的培養(yǎng)基）

PS: 若客戶收到2ml小管細(xì)胞

收到細(xì)胞以后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；然后將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶，加入5ml左右含F(xiàn)BS的培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱隔夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞匯合度：若未超過(guò)80%匯合度，換液繼續(xù)培養(yǎng)，根據(jù)情況傳代或者凍存。若超過(guò)80%匯合度，可直接進(jìn)行傳代。

客戶收到細(xì)胞后請(qǐng)務(wù)必仔細(xì)閱讀細(xì)胞注意事項(xiàng)，確保細(xì)胞的培養(yǎng)條件一致，如果由于培養(yǎng)條件不一致導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任有客戶自行承擔(dān)。

1.  客戶在收到細(xì)胞時(shí)，請(qǐng)首先觀察培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否外滲，培養(yǎng)液是否混濁。如發(fā)現(xiàn)有瓶破、滲漏、培養(yǎng)液混濁等問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谑盏郊?xì)胞后立即與我們。

2.  由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)離心收集，重懸細(xì)胞，置培養(yǎng)箱培養(yǎng)，細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如果細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力。

3.  收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)按照細(xì)胞處理方法處理細(xì)胞。

貼壁細(xì)胞處理方法

一、   細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。從細(xì)胞資源中心獲得細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作。

二、   鏡下觀察：

未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將瓶裝的*培養(yǎng)液移入無(wú)菌瓶中，留待日后培養(yǎng)用，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養(yǎng)液，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，按要求比例消化傳代。（收到細(xì)胞，建議棄去原基培養(yǎng)，使用新鮮*培養(yǎng)基培養(yǎng)）

三、消化方法

1、將瓶裝的*培養(yǎng)液移入無(wú)菌瓶中，留待日后培養(yǎng)用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。（收到細(xì)胞，建議棄去原基培養(yǎng)，使用新鮮*培養(yǎng)基培養(yǎng)）

2、T25瓶加3ml PBS，洗一次，棄上清，再加1ml消化液消化，顯微鏡下觀察，等細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)后，加培養(yǎng)基混勻，離心收集，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6， 1:6-1:8），每T25瓶加培養(yǎng)基至6-8ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。

RCM RCM細(xì)胞株 細(xì)胞株培養(yǎng)

生物試劑銷售中心細(xì)胞庫(kù)相關(guān)熱賣細(xì)胞株

Lewis 肺癌 瘤株

LA795 肺腺癌 瘤株

EAC 艾氏腹水瘤 瘤株

S180 腹水瘤 瘤株

H22 肝癌 瘤株

H22 肝癌 1640+10%胎牛血清 體外培養(yǎng)株

MPC-83 胰腺腺泡細(xì)胞癌 1640+10%胎牛血清體外培養(yǎng)株

MPC-83 胰腺腺泡細(xì)胞癌 瘤株

RIN-m5F β胰島素瘤 1640+10%胎牛血清體外培養(yǎng)株

MA891 乳腺癌 瘤株

TA2 自發(fā)高乳腺癌 瘤株

U14 宮頸癌 瘤株

YAC-1 淋巴瘤 1640+10%胎牛血清 體外培養(yǎng)株

Nb2－11 淋巴瘤 體外培養(yǎng)株

C26 結(jié)腸癌 瘤株

G422 神經(jīng)膠質(zhì)瘤 瘤株

B16 黑色素瘤 1640+10%胎牛血清 體外培養(yǎng)株

B16 黑色素瘤 瘤株

C3 白血病 體外培養(yǎng)株

L1210 淋巴白血病 1640+10%胎牛血清體外培養(yǎng)株

L1210 淋巴白血病 瘤株

SP2/0 骨髓瘤 1640+10%胎牛血清 體外培養(yǎng)株

NS-1 骨髓瘤 1640+10%胎牛血清 體外培養(yǎng)株

P388D 淋巴母細(xì)胞瘤 1640+10%胎牛血清體外培養(yǎng)株

Kert-3 腎癌 瘤株

TC-1 HPVl6 E6、E7和ras基因共轉(zhuǎn)化的C57BL/C(H-2b)小鼠肺上皮細(xì)胞 1640+10%胎牛血清體外培養(yǎng)株

W256 肉瘤(Wistar) 瘤株

PC-12 嗜鉻細(xì)胞瘤 1640+10%胎牛血清+5%馬血清 體外培養(yǎng)株

HIH 3T3 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

L929 小鼠成纖維細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

HSC-T6 大鼠肝星狀細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

L-02 人肝細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

SRA01/04 人晶體上皮細(xì)胞 MEM+非必需氨基酸+10%胎牛血清

CHO 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（野生型） 1640+10%胎牛血清

IEC-6 大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞 DMEM+10%胎牛血清

P815 小鼠肥大細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

NRK-49F 大鼠正常腎成纖維細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

自建 正常成人皮膚成纖維細(xì)胞 DMEM+20%胎牛血清 原代培養(yǎng)

HELF 人胚肺成纖維細(xì)胞 1640+10%胎牛血清 5，6代

293 人胚腎細(xì)胞 DMEM+10%胎牛血清

293T 人胚腎T細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

GES-1 人胃粘膜細(xì)胞 DMEM+10%胎牛血清

3T3-L1 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞（前脂肪） DMEM+10%胎牛血清

Vero 猴腎細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

CHO-dhFr- 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(二氫葉酸缺陷型） 1640+10%胎牛血清

V79 中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

PA317 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

Cos-7 綠猴腎細(xì)胞 DMEM+10%胎牛血清

MA104 非洲綠猴胚胎腎上皮細(xì)胞 DMEM+10%胎牛血清

16HBE 人支氣管上皮細(xì)胞 1640+10%胎牛血清