Hyclone|serana血清中的懸浮物問題

1、問：發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)的細(xì)胞瓶中背景有許多的小黑點(diǎn)，培養(yǎng)液中也有一些漂浮的物。看了之前的帖以為是膠原蟲。本打算換液，換液前特意看了下前些天配的培養(yǎng)液，肉眼發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液中有懸浮的顆粒狀物質(zhì)（不多），于是放在鏡下觀察，新鮮培養(yǎng)液中有一些懸浮的小顆粒，不多。（培養(yǎng)液是R1640+20%牛血清+1%雙抗）于是又將分裝在4℃保存的小牛血清拿出觀察，肉眼可見5、6個白色小小球狀的物質(zhì)，在血清瓶稍靠下的部位懸浮。鏡下觀察，也有少量的不知什么物質(zhì)的東西漂浮。小牛血清是Hyclone新西蘭的，標(biāo)簽上寫已經(jīng)經(jīng)過2μm濾膜過濾處理。根據(jù)上述培養(yǎng)液的情況，是否說明培養(yǎng)液已被污染？如果是正常的血清是不是在鏡下不應(yīng)該看到雜物，哪怕是極少量的？根據(jù)上述血清的描述，是不是說明血清也存在問題，還能用嗎？補(bǔ)充：細(xì)胞培養(yǎng)以來生長狀態(tài)就不好。買血清的時候廠家說明不用滅活，所以未滅活。

答：（1）血清應(yīng)該-20℃保存，解凍血清時，請按照的逐步解凍法（-20℃至4℃至室溫），若血清解凍時改變的溫度太大實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

（2）血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白在血清解凍后，也會存在于血清中，亦可造成沉淀物。

（3）若您一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清，再放回冷凍，若存放于4℃時，請勿超過一個月，儲存在2－8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白，可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。

（4）解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。

（5）排出了血清的原因，在考慮實驗用品和無菌操作的問題。

（6）細(xì)菌病毒、衣原體、黑膠蟲污染也很常見，如果細(xì)胞死的太多，影響較大建議更換培養(yǎng)液。

2、問：今天在配培養(yǎng)液時，發(fā)現(xiàn)血清里面有小碎片樣的漂浮物，血清仍然清亮，不渾濁。不知道是什么，問了實驗室的學(xué)長，說仍然可以用，但還是不放心，沒有用血清。求助園子的各位達(dá)人，這可能是血清出了什么問題？我的血清用了一個月不到。

答：可能的原因：（1）培養(yǎng)液配置時Votex不夠，當(dāng)時是清亮的，但過一段時間會析出來；（2）真菌污染。

(試劑銷售-Hyclone|serana血清)