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牛血清白蛋白簡介

來源:生物試劑銷售中心   2014年10月24日 09:12  

基本信息

  【詞條中文名稱】牛血清白蛋白 【詞條拼音名稱】Níuxuèqīng báidànbái

 

  【詞條英文名稱】Bovine albumin   【詞條英文別名】Bovine serum albumin   【詞條分類性質】名詞詞組,偏正詞組   【詞條適用范圍】醫學領域,藥學領域   【CAS數字登錄號】9048-46-8

BSA簡介

BSA結構

  

CAS號:

9048-46-8

英文名稱:

Bovine albumin

英文同義詞:

nhsa;BSA-C;AC-BSA;ALBUMIN, PIG;albumenpowder;SERUM ALBUMIN;ACETYLATED BSA;BSA ACETYLATED;Bovine albumin;BSA, METHYLATED

中文名稱:

牛血清白蛋白

中文同義詞:

牛白蛋白;血清蛋白;血清白蛋白;牛血蛋白質;復合氨基酸;牛血清蛋白;牛血清白蛋白;血清白蛋白(牛)

CBNumber:

CB5107573

分子式:

N/A

英文別名:

Bovine serun albumin

化學性質

  

儲存條件 : 2-8°C

溶解度 : PBS: >40 mg/mL

form : lyophilized powder

Merck : 13,8542

穩定性: Stable. Incompatible with strong oxidizing agents and strong acids. Refrigerate.

EPA化學物質信息: Albumins, blood serum(9048-46-8)

用途

  1、用于生化研究、遺傳工程和醫藥研究   2、用作醫藥保健食品、調味品

 

3、維持滲透壓、pH緩沖、載體作用

生產方法

  以牛血為原料分離出血清,用硫酸銨分級沉淀后,經辛酸處理精制而得。

貯存方法

  每10g100ml水進行溶解,或用 PBS溶解也可,視用途而決定。然后分裝成小支。若不使用防腐劑可貯存在零下2030攝氏度的恒溫柜中,若使用防腐劑(如0.1%*)則可貯存在零上4攝氏度的環境下。一般可存放數月不變質。防腐劑可能對牛血清白蛋白的效果造成影響,應慎用。

結構與作用

成分結構

  牛血清中的簡單蛋白,是血液的主要成分(38g/100ml),分子量68kD。等電點4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成,其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質結合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養作用。在動物細胞無血清培養中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。牛血清白蛋白BSA,又稱第五組分,是牛血清中的一種球蛋白,包含583氨基酸殘基,分子量為66.430 kDa,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用,例如在western blot中作為Blocking agent。它是牛血清中的簡單蛋白,是血液的主要成分(38g/100ml),分子量68kD。等電點4.8。含氮量   產品   16%,含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成,其中35半胱氨酸組成17個二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自由巰基白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質結合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養作用。在動物細胞無血清培養中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。

BSA的作用

  BSA一般做為穩定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應液中,因為有些酶在低濃度下不穩定或活性低。加入BSA后,它可能起到保護載體作用,不少酶類添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會受到什么影響。對多數底物DNA而言,BSA可以使酶切更*,并可實現重復切割。在37℃,酶切反應超過1h時,BSA可以使酶更加穩定,因為在不含BSA的反應緩沖液中,許多限制性內切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時間。而BSA可以結合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內切酶活性的金屬離子和其它化學物質。

BSA在內切酶的緩沖液的作用

  1.BSA的穩定劑,防止酶的分解和非特異性吸附;   2.BSA能減輕有些酶的變性,能減輕有些不利環境因素如加熱,表面張力及化學因素引起的變性的至于作用機理我不是很清楚,可能是因為它結構中有17二硫鍵,和一個巰基,巰基的化學反應很活潑,二硫鍵有抗氧化還原的作用,因此可與多種陽離子,陰離子和小分子結合;   3.BSA能防止酶吸附到管壁而損失。

 

 

成分與結構

牛血清白蛋白(BSA),又稱第五組分,是牛血清中的一種球蛋白,包含583氨基酸殘基,分子量為 66.430 kDa,等電點為4.8

 

   牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用,例如在western blot中作為Blocking agent。它是牛血清中的簡單蛋白,是血液的主要成分(38g/100ml),分子量68kD。等電點4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成,其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質結合。   血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養作用。在動物細胞無血清培養中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。牛血清白蛋白就是我們常說的BSA.

牛血清蛋白的說明

  牛血清白蛋白的相對分子質量104次方這個級別,它不是一定的,而是多聚物的,有的地方測試數據為70 000這一數據是在做PCR的時候使用的數據。   牛血清白蛋白是血液中的主要成分(38g/100ml),分子量68kD,等電點4.8,含氮量16%,含糖量0.08%,僅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成,其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質結合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養作用。在動物細胞無血清培養中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。   牛血清蛋白溶液可以作為測量蛋白質含量的標準曲線用。   一般買回來的牛血清蛋白是細小片狀的乳白色粉末。牛的血清蛋白也以鐵為基本原料。

牛血清蛋白(BSA)的作用

  BSA一般做為穩定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應液中,因為有些酶在低濃度下不穩定或活性低。加入BSA后,它可能起到保護載體作用,不少酶類添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會受到什么影響。對多數底物DNA而言,BSA可以使酶切更*,并可實現重復切割。在37℃,酶切反應超過1h時,BSA可以使酶更加穩定,因為在不含BSA的反應緩沖液中,許多限制性內切酶37℃下只能存活10"20min甚至更短的時間。而BSA可以結合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內切酶活性的金屬離子和其它化學物質。

牛血清蛋白的用途

  1、特純級牛血清蛋白   用途:用作酶標、金標等診斷試劑的封閉劑,生化試驗等。   性狀:淡黃色干燥粉末   2、無脂肪酸牛血清蛋白   用途:用作酶標、金標等診斷試劑的封閉劑、保護劑,尤其適用于容易受脂肪酸影響的產品和試驗。   性狀:淡黃色干燥粉末   3、無蛋白酶牛血清蛋白   用途:用于酶標、金標等診斷試劑的封閉劑、保護劑,尤其適合血液脂類的診斷試驗、脂類診斷試劑及對純度要求高的產品。   性狀:淡黃色干燥粉末   4、細胞培養級牛血清蛋白   用途:無血清培養基的蛋白添加劑,供細胞培養使用。   性狀:淡黃色干燥粉末白蛋白

牛血清蛋白的測定

一、標準曲線

  [1]一般用分光光度法測物質的含量,先要制作標準曲線,然后根據標準曲線查出所測物質的含量。因此,制作標準曲線是生物檢測分析的一項基本技術。

二、 蛋白質含量測定方法

  1. 凱氏定氮法   2. 雙縮脲法   3. Folin-酚試劑法   4. 紫外吸收法   5. 考馬斯亮藍法

考馬斯亮藍法測定蛋白質含量標準曲線制作

一、試劑

  1. 考馬斯亮藍試劑:   考馬斯亮藍G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85% H3PO4,雍蒸餾水稀釋至1000ml,濾紙過濾。zui終試劑中含0.01%W/V)考馬斯亮藍G—250,4.7%W/V)乙醇,8.5%W/VH3PO4。   2. 標準蛋白質溶液:   純的牛血清血蛋白,預先經微量凱氏定氮法測定蛋白氮含量,根據其純度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。

二、器材

  1. 722S型分光光度計使用及原理。   2. 移液管使用。

三、標準曲線制作步驟

  試管編號 0 1 2 3 4 5 6   100ug/ml標準蛋白(ml 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6   0.15mol/L NaCl ml 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4   考馬斯亮藍試劑 (ml 5 5 5 5 5 5 5   搖勻,1h內以1號管為空白對照,595nm處比色   3、以A595nm為縱坐標,標準蛋白含量為橫坐標(六個點為10ug20 ug30 ug40 ug50 ug60 ug),在坐標軸上繪制標準曲線。   (1)、利用標準曲線查出回歸方程。   (2)、用公式計算回歸方程。   (3)、或用origin作圖 ,測出回歸線性方程。即A595nm=a×X( )+6   一般相關系數應過0.999以上,至少29以上。   (4)、繪圖時近兩使點在一條直線上,在直線上的點應該在直線兩側。

四、蛋白質含量的測定

  樣品即所測蛋白質含量樣品(含量應處理在所測范圍內),依照操作步驟1操作,測出樣品的A595nm,然后利用標準曲線或回歸方程求出樣品蛋白質含量。   一般被測樣品的A595nm值在0.1—0.05之間,所以上述樣品如果A595nm值太大,可以稀釋后再測A595nm值,然后再計算。

五、注意事項

  1. 玻璃儀器要洗滌干凈。   2. 取量要準確。   3. 玻璃儀器要干燥,避免溫度變化。   4. 對照:用被測物質以外的物質作空白對照。

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