細(xì)胞傳代標(biāo)準(zhǔn)化流程：

穿戴好白大褂和手套，用75%酒精擦手；

1. 取出細(xì)胞，顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和密度，確定細(xì)胞生長狀況，是否需要傳代或換液；
2. 將培養(yǎng)基（如有需要還有血清和大瓶高糖培養(yǎng)基）、PBS、胰酶培養(yǎng)基等預(yù)熱及超凈臺消毒結(jié)束后，將試劑及細(xì)胞等噴酒精后移入超凈臺，將廢液缸噴足酒精移入超凈臺，取酒精棉放入超凈臺；
3. 點(diǎn)燃酒精燈，將瓶口擰松，過火消毒；
4. 在確定細(xì)胞生長狀況良好且沒有污染的情況下，將培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基取（大培養(yǎng)皿6ml， 中培養(yǎng)皿3ml）至一個新的15ml離心管中；（一個1ml槍頭）
5. 用適量PBS清洗細(xì)胞表面（大皿5ml，中皿3ml），并棄去PBS；（一個5ml槍頭）
6. 加入適量胰酶消化細(xì)胞（大皿1ml，中皿0.5ml），此時可將細(xì)胞置于37°C細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)消化；（C2C12用5min，3T3-L1用1.5min），（一個1ml槍頭）
7. 待消化*后，用胰酶6倍體積的*培養(yǎng)基中止消化，并吹打培養(yǎng)皿皿底，將細(xì)胞移入離心管；（一個5ml槍頭）
8. 1000rpm，5min離心，離心間隙可以準(zhǔn)備好傳代的細(xì)胞培養(yǎng)皿，并加好培養(yǎng)基；
9. 棄上清，口擦酒精，燒口；
10. 加適量*培養(yǎng)基吹打混勻細(xì)胞(沿壁輕輕吹打24次左右)，按合適比例進(jìn)行細(xì)胞傳代，在蓋上標(biāo)記好細(xì)胞名稱、代數(shù)及傳代日期并放入孵箱。（一個1ml槍頭）
11. 將所有試管收至冰箱，將廢液缸及廢液取出，裝至一次性PE手套，廢液缸噴酒精清洗
12. 用酒精棉仔細(xì)擦拭操凈臺表面，檢查顯微鏡、離心機(jī)是否關(guān)閉，孵箱是否正常；
13. 做試驗(yàn)記錄，打開超凈臺和細(xì)胞間紫外，15min后關(guān)閉