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欣美生物HIS*BIND的選擇介紹

來源:上海欣美生物科技有限公司   2013年09月09日 07:00  

各種His.Bind基質的產品如何選擇:本文介紹帶Ni NTA瓊脂糖、無Ni IDA瓊 脂糖、帶Ni的IDA瓊脂糖預裝柱、無Ni IDA觸須甲酰化、帶Ni的IDA纖維素預裝筒、帶Ni的IDA磁性瓊脂糖……等His.Bind基質的特點和應用。

His.Bind基質選擇指南:與任何純化介質一樣,His.Bind樹脂在接近結合載量時使用,可獲得zui干凈的分離效果

產品 類型 載量 特點 應用
Ni-NTA His.Bind 樹脂 Ni NTA瓊脂糖 5-10 mg/ml

zui小的Ni2+浸出20mM b-ME相容

小到中量,重力流柱推薦用于真核抽提物
Ni-NTA His.Bind Superflow Ni NTA瓊脂糖 5-10 mg/ml zui小的Ni2+浸出20mM b-ME相容高流速和壓力 小量到生產級FPLC或重力流柱推薦用于真核抽提物
His.Bind樹脂 Ni IDA瓊 脂糖 8 mg/ml 可重復使用多次與His.Bind緩沖試劑盒兼容 小到中量重力流柱或批次模式
His.Bind柱(Cloumn) Ni的IDA瓊脂糖預裝柱 10 mg/次 預裝柱與His.Bind Quick緩沖試劑盒兼容 方便的純化重力流柱
His .Bind Fractogel(S) Ni IDA觸須甲酰化 >10 mg/ml 20-40mM顆粒大小高流速和壓力 小量到生產級FPLC或重力流柱高分辨率分離
His.Bind Fractogel(M) Ni IDA觸須甲酰化 >10 mg/ml 40-90mM顆粒大高流速和壓力 小量到生產級FPLC或重力流柱
His.Bind Quick 300筒( Ca rtridge) Ni的IDA纖維素預裝筒 0.5 mg/次 每端鎖緊接口與His.Bind Quick緩沖試劑盒配合使 用 注射器操作真空多支管操作快速純化
His.Bind Quick 900 筒(Cartridge) Ni的IDA纖維素預裝筒   2 mg/次 每端鎖緊接口 
His.Bind Quick緩沖試劑盒配合使用

注射器操作
真空多支管操作
快速純化  

His.Bind Quick 柱(Cloumn)   Ni的IDA纖維素預裝柱   5 mg/次   每端鎖緊接口與His.Bind Quick緩沖試劑盒配合使用 真空多支管操作快速純化多個樣品

His.Bind 磁化瓊脂糖珠  

Ni的IDA磁性瓊脂糖 5 mg/ml   3m磁性瓊脂糖珠   快速小量純化磁性分離適合高通量操作

His.Bind柱

His.Bind柱預裝了1.25ml柱床體積的Ni2+結合His.Bind樹脂。頂部和底部的玻璃纖維確保上樣和走柱時緩沖液均勻流動和zui小干擾。使用BugBuster和Benzonase?核酸酶制備細菌裂解物可獲得較好效果。

His.Bind和His.Bind快速緩沖液試劑盒

His.Bind緩沖液試劑盒是一套經過測試和優化的緩沖液,用于IDA His.Bind樹脂一步法純化蛋白。包括的溶液可用于10根2.5ml柱的Ni2+結合、洗滌和洗脫。除了8X Ni2+結合緩沖液(樹脂以Ni2+結合形式提供),His.Bind快速緩沖液試劑盒與His.Bind緩沖液試劑盒成分*一樣。

Ni-NTA緩沖液試劑盒

Ni-NTA緩沖液試劑盒提供的一套緩沖液優化用于在Ni-NTA His.Bind樹脂上純化His.Tag融合蛋白。這些磷酸緩沖液與His.Bind緩沖液試劑盒中的Tris溶液不同。用戶可以參考操作指南,使用4X濃縮液進行結合、洗滌和洗脫操作。

BugBusterTM Ni-NTA His.Bind和His.Bind純化試劑盒

BugBuster蛋白抽提試劑是從大腸桿菌有效抽提可溶性蛋白的即用型溶液(不需要機械破碎細菌)。BugBuster Ni-NTA His.Bind和His.Bind純化試劑盒帶有BugBuster試劑(方便制備可溶性細胞抽提物)以及His.Tag融合蛋白親和純化的相應樹脂。兩個試劑盒都包括Benzonase核酸酶,用于降低粘度并從蛋白制備物中去除核酸。BugBuster His.Bind純化試劑盒還包括層析緩沖液。

His.Tag/His.Bind技術可用于純化His.Tag序列中的組氨酸與固定化金屬離子(通常為Ni2+)。zui常用的金屬螯合物包括NTA和IDA,在實際應用中,這兩種螯合物各有利弊,因此要優化條件,盡量減少非特異結合蛋白的共純化才能達到*實驗結果。

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