一、化學結構與熒光特性

ATTO 700 NHS酯是一種基于萘酰亞胺結構的熒光染料衍生物，其分子骨架由共軛芳香環體系構成，通過引入磺酸基團和N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）活性基團實現功能化修飾。該染料的激發波長位于680-690 nm范圍，發射峰值約在700-710 nm，屬于近紅外（NIR）熒光波段。其光譜特性使其在生物組織成像中具有較低的背景干擾，適用于多重標記實驗中的長波長通道設計。

二、反應活性與標記機制

NHS酯基團是ATTO 700實現生物分子標記的核心功能單元。該基團可與伯胺（如賴氨酸殘基的側鏈氨基）發生高效酰胺化反應，在溫和的緩沖條件下（pH 7.2-8.5）形成穩定的共價鍵。此反應機制廣泛應用于蛋白質、抗體或多肽的標記，且可通過控制反應時間與染料濃度優化標記效率。需注意的是，反應體系中游離胺類物質的存在可能競爭性抑制目標分子的標記效果。

三、光物理穩定性分析

ATTO 700在連續光照條件下的熒光衰減曲線顯示其具有中等程度的光漂白抵抗能力。實驗數據顯示，在100 mW/cm2激光激發下，其熒光強度下降速率約為0.05%/秒，低于部分傳統有機染料（如Cy5）。這種特性使其適用于長時間活細胞成像或流式細胞術檢測，但需避免強光直射以延長染料使用壽命。

四、生物相容性與標記應用

該染料在生理pH范圍內表現出良好的溶解性，尤其在DMSO/水混合體系中可形成均一溶液。標記后的復合物通常保持較高的水合粒徑穩定性，適用于免疫熒光染色、流式細胞分析及體外診斷試劑開發。在細胞穿透性測試中，ATTO 700標記的肽段可有效進入真核細胞胞質，但核膜穿透效率受分子量限制。

五、多色標記系統中的適配性

作為近紅外熒光團，ATTO 700可與藍綠光區染料（如FITC、Cy3）組合構建多色成像體系。其發射光譜與常見檢測濾光片的匹配性表明，在共聚焦顯微鏡系統中需選用700±15 nm帶通濾光片以優化信噪比。值得注意的是，染料間的光譜串擾可通過時間分辨成像或線性拆分算法進一步降低。

六、儲存條件與操作建議

未使用的ATTO 700 NHS酯應避光保存于-20℃干燥環境中，避免反復凍融導致活性基團水解。標記反應前需用無水DMSO溶解染料，工作濃度建議控制在1-10 mM范圍內。標記完成后，可通過凝膠電泳或HPLC分離純化未反應染料，最終產物建議分裝凍存以減少降解風險。

產地：西安瑞禧生物

用途：科研

我們提供涵蓋peg多肽、ATTO、Alexa Fluor（AF染料）、AZDye、DyLight、Texas Red 以及 CF 系列染料。它們波長跨度大，從可見光波段延伸至近紅外區域，為實驗提供了豐富的選擇。其標記方式多樣靈活，且擁有出色的穩定性，在熒光成像、流式細胞術、免疫分析等實驗中表現出色，是科研探索的有力工具助力實驗精準高效開展。歡迎咨詢yff

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