電化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)的測(cè)試方法
電化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)是一種將電化學(xué)技術(shù)與化學(xué)發(fā)光檢測(cè)相結(jié)合的分析方法,具有高靈敏度、寬線性范圍和快速響應(yīng)等特點(diǎn)。
一、電化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)基本原理:
電化學(xué)反應(yīng):在電極表面施加電壓,引發(fā)待測(cè)物質(zhì)(或標(biāo)記物)發(fā)生氧化或還原反應(yīng),生成激發(fā)態(tài)產(chǎn)物。
化學(xué)發(fā)光:激發(fā)態(tài)產(chǎn)物通過(guò)電子躍遷返回基態(tài),釋放光子(光信號(hào)),其強(qiáng)度與待測(cè)物濃度相關(guān)。
檢測(cè)方式:通過(guò)光電探測(cè)器采集光信號(hào),轉(zhuǎn)換為電信號(hào)進(jìn)行定量分析。
二、電化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)測(cè)試方法分類:
根據(jù)激發(fā)模式和檢測(cè)方式的不同,ECL測(cè)試方法可分為以下幾類:
1. 直接電化學(xué)發(fā)光法
適用對(duì)象:自身具有電化學(xué)發(fā)光活性的物質(zhì)(如魯米諾、過(guò)氧化氫等)。
步驟:
將待測(cè)物質(zhì)溶解在電解液中,加入至電解池。
在工作電極上施加恒定電壓或掃描電壓,觸發(fā)電化學(xué)反應(yīng)。
檢測(cè)發(fā)光強(qiáng)度,繪制光強(qiáng)-時(shí)間或光強(qiáng)-電壓曲線。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量分析待測(cè)物濃度。
2. 間接電化學(xué)發(fā)光法
適用對(duì)象:無(wú)直接電化學(xué)發(fā)光活性的物質(zhì)(如生物分子、金屬離子等)。
步驟:
對(duì)待測(cè)物進(jìn)行標(biāo)記(如使用發(fā)光試劑或納米材料作為標(biāo)簽)。
在電極表面施加電壓,觸發(fā)標(biāo)記物發(fā)生電化學(xué)反應(yīng)并發(fā)光。
檢測(cè)光信號(hào),通過(guò)標(biāo)記物與待測(cè)物的定量關(guān)系計(jì)算濃度。
3. 循環(huán)伏安-發(fā)光法(CV-ECL)
特點(diǎn):結(jié)合循環(huán)伏安法(CV)和ECL檢測(cè),研究電極過(guò)程與發(fā)光行為的關(guān)系。
步驟:
在電解液中加入待測(cè)物,設(shè)置電壓掃描范圍。
記錄電流-電壓曲線(CV曲線)和發(fā)光強(qiáng)度-電壓曲線。
分析發(fā)光峰與電化學(xué)反應(yīng)的對(duì)應(yīng)關(guān)系,推斷反應(yīng)機(jī)理。
4. 時(shí)間分辨電化學(xué)發(fā)光法(TR-ECL)
特點(diǎn):利用發(fā)光信號(hào)的衰減時(shí)間差異,提高檢測(cè)選擇性(常用于消除背景干擾)。
步驟:
施加脈沖電壓激發(fā)發(fā)光。
延遲一定時(shí)間后檢測(cè)光信號(hào),避免短壽命背景噪聲的干擾。
根據(jù)衰減曲線定量分析目標(biāo)物。
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