感染小鼠肝炎病毒臨床特點
小鼠肝炎疾病是由小鼠肝炎病毒(MHV)感染引起的小鼠常見疾病,MHV的分布范圍廣,傳染性強。MHV感染臨床表現為肝炎、腦炎和腸炎,癥狀與感染的毒株相關。MHV的自然感染途徑為口及呼吸道,也可通過垂直傳播。群體內的傳染源是感染小鼠的糞便和墊料。一般情況下,大部分帶毒小鼠為隱性感染,無明顯外觀改變,但是在某些環境的刺激下會暴發疾病。在低溫條件下仍可存活,當免疫抑制、應激或其他因素導致帶毒小鼠免疫力下降時,潛伏感染可被激活,引發臨床癥狀甚至死亡,并可能在群體內爆發流行。MHV是嚙齒類動物中難以消滅的病毒之一,因為其隱性感染和感染后的嚴重程度,實驗小鼠的MHV感染應引起廣大研究學者的高度重視,而對MHV的防治措施更應該是重中之重。
當小鼠感染小鼠肝炎病毒,則可能會出現致死性的病毒性腦炎、肝炎以及腸炎。如果在動物實驗中使用感染了小鼠肝炎病毒的小鼠,或者在實驗過程中感染了病毒,不僅會造成大規模傳播,還會對動物實驗的整個過程產生影響,并對同一環境中的活生物體構成一定威脅。
小鼠肝炎病毒MHV的結構特點
小鼠肝炎病毒(MHV)屬于冠狀病毒,呈圓形或者多形態,表面帶有囊膜與花瓣狀纖突。MHV病毒是單股正鏈RNA,且為線性不分段。它的病毒粒子呈多形態或圓形,它的直徑一般為80~160nm。MHV的囊膜蛋白主要由3個蛋白結構組成:M蛋白、S蛋白和E蛋白。M蛋白是其中比較保守的抗原決定蛋白;而S蛋白主要功能是介導病毒進入宿主細胞,可以識別細胞表面的MHV病毒受體,進而參與MHV感染的過程;E蛋白則是在病毒組裝和脫殼過程中發揮關鍵性作用蛋白。而核衣殼蛋白(N)又與RNA結合之后構成了位干病毒中心的核蛋白殼,其結構呈螺旋狀。最后病毒囊膜包繞在其上,從而形成病毒粒子。
小鼠肝炎病毒分類
MHV呈根據MHV特性的不同,可將MHV分為兩類:呼吸毒株和腸毒株。呼吸毒株有MHV-1、MHV2、MHV-3、MHV-JHM、MHV-A59等;腸毒株有MHV-Y、MHV-S、MHV-U等。多數的研究結果都是通過呼吸毒株的MHV得到的,尤其關于MHV-JHM、MHV-A59株的研究較多。感染MHV后小鼠會有腸炎和肝炎的臨床表現。傳染源頭一般是帶毒小鼠的糞便和墊料,MHV可通過胎盤垂直傳播,這導致不帶母源抗體的乳鼠感染易發病和死亡。
小鼠肝炎病毒檢測方法
常規樣本的MHV檢測方法,多采取血清學方法。國家標準《實驗動物小鼠肝炎病毒檢測方法》(GB/T14926.22-2001)中指出的檢測方法有酶聯免疫吸附實驗(ELISA)、間接免疫熒光抗體實驗(IFA)和免疫酶實驗(IEA)。除此之外,RT-PCR是用于檢測MHV感染的常用的方法。
這些方法中的酶聯免疫吸附法應用已經非常成熟,通常使用能檢測多種MHV毒株抗體的混合抗原,“高通量,適合大批量樣本篩查,靈敏度高;然而,它的缺點是無法區分當前感染還是既往感染,也不能用作診斷免疫缺陷小鼠和早期病毒感染(未產生抗體,導致漏檢)的方法。相反,它更常用于病毒感染后期的回顧性診斷。通常遇到ELISA檢測陽性的樣本可用IFA的方法再進行檢測,兩種檢測方法都是陽性的時候可確認為陽性,有時也作為獨立方法使用。
RT-PCR檢測病毒時所需的樣本量少、更是可以在疾病早期檢測到病毒感染,特異性高,可進行毒株分型(設計特異性引物),所以RT-PCR檢測MHV也得到了廣泛的重視。此檢測方法的研究將對實驗動物中MHV的快速篩查,提高檢測效率和陽性檢出率奠定良好基礎。缺點是僅代表采樣時存在病毒核酸(可能是活動性感染,也可能是殘留核酸);需要特定的實驗室條件和防污染措施;成本通常高于血清學篩查。
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