儲存和處理STAR抗體時,需要特別注意以下幾個方面,以確保其活性和穩定性:
一、儲存條件
1.溫度控制:
根據抗體說明書和制造商的建議,選擇合適的儲存溫度。大多數抗體可以在4℃下短期保存(通常幾周),但長期保存則應在-20℃或更低溫度下。
避免將抗體保存在溫度變化較大的環境中,如風冷自動除霜冰箱中,因為溫度波動可能導致抗體變性。
最好將抗體存放在冰箱或冰柜的后部,該區域受溫度波動的影響較小。
2.避免反復凍融:
反復凍融會導致抗體變性,降低其結合能力。
為了減少凍融循環的次數,應按照制造商的說明對抗體進行分裝和儲存。
分裝時,每個等分試樣應包含實驗中使用的抗體體積,避免重新冷凍。
二、處理步驟
1.收到抗體后的處理:
收到抗體后,不要立即開蓋,應先進行離心處理。因為運輸過程中的顛簸可能導致抗體附著在管蓋和管壁上,離心可以使抗體沉到管底。
離心條件一般為4℃,12000rpm,離心3分鐘,或根據抗體體積和說明書建議調整。
2.溶解與稀釋:
對于凍干粉狀態的抗體,應按照說明書建議的條件進行溶解。
溶解后的抗體應避免再次冷凍,應盡快使用或儲存在適當的溫度下。
如果需要稀釋抗體,最好使用無菌條件,并避免在分裝前稀釋,以減少降解和污染的風險。
3.避光保存:
如果STAR抗體是熒光標記的,應特別注意避光保存,以防止熒光團光漂白。
在進行實驗時,也應將抗體保持在避光條件下,直到準備好使用。
三、其他注意事項
1.避免污染:
在移取和分裝抗體時,最好在無菌條件下進行,以減少污染的風險。
使用干凈的移液器和吸頭,避免交叉污染。
2.記錄與管理:
對抗體的儲存條件、使用日期和批次等信息進行詳細記錄,以便追蹤和管理。
定期檢查抗體的儲存狀態,確保其處于最佳保存條件。
儲存和處理STAR抗體時,需要嚴格控制溫度、避免反復凍融、注意處理步驟中的細節、避光保存以及避免污染。這些措施將有助于保持抗體的活性和穩定性,確保實驗結果的準確性和可靠性。
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