CHO（中國倉鼠卵巢）細胞是生物制藥領域廣泛使用的宿主細胞系，憑借其穩定表達外源蛋白、良好的轉染效率以及接近哺乳動物細胞的蛋白質翻譯后修飾能力等優勢，在單克隆抗體、重組蛋白藥物等多種生物制品的生產中發揮著關鍵作用。然而，在生物制品的生產過程中，即使采用嚴格的純化工藝，仍可能存在CHO殘留DNA，這些殘留DNA可能引發潛在的安全風險，如致瘤性、傳染性以及免疫源性等問題，因此對CHO殘留DNA的檢測和片段分析成為確保生物制品安全性及質量可控性的重要環節。

世界衛生組織（WHO）和各國藥物注冊監管機構均對生物制品中外源宿主DNA殘留制定了相應的監測和控制要求。美國食品藥品監督管理局（FDA）現行指導方針推薦成品中殘留DNA不高于10 ng/劑，對于生物制品宿主細胞DNA殘留DNA量上限為100 pg/劑。歐洲藥典通則規定生物制品殘留DNA度大多為不超過10 ng/劑。中國藥典2020年版三部也明確規定，以細胞基質生產的生物制劑外源宿主細胞DNA殘留量不能超過100 pg/劑。

除需對DNA的殘留量進行嚴格控制外，殘留DNA片段大小分布同樣是確定其相關風險因素的重要指標。研究表明，一個功能基因至少在 200 bp 以上，因此大于 200 bp 的DNA片段有可能具有一定的致病性，而且殘留DNA片段越大，生物制品的風險等級越高。美國 FDA 在《Chemistry, Manufacturing, and Control (CMC) Information for Human Gene Therapy Investigational New Drug Applications (INDs)》行業指南中建議將非致瘤性連續細胞的殘留DNA量限制在 10 ng/劑以下，DNA 大小限制在約200 bp以下。

翌圣生物自主研發的CHO殘留DNA檢測和片段分析產品，為生物制品生產企業提供了高效、準確的CHO殘留DNA質控解決方案。該產品采用先進的熒光探針 qPCR法原理，經過精心設計和驗證，能夠滿足生物制藥行業對CHO殘留DNA檢測和片段分析的嚴格要求。

1、CHO殘留檢測試劑盒線性范圍為：3fg/μL~300pg/μL；CHO片段分析試劑盒（88 bp、115 bp、229 bp、505 bp）線性范圍均為30fg/μL~300pg/μL。

圖1.CHO擴增曲線線性圖譜（左）和88 bp片段擴增曲線線性圖譜（右）

2、用背景溶液（高蛋白、高核酸、高鹽、高低PH）對樣本提取，對于不同背景溶液的DNA樣本回收率均在70%~130%之間。

表1.CHO殘留DNA檢測試劑盒模擬樣本加標回收

3、CHO宿主細胞DNA殘留檢測試劑盒(3G)的定量限為0.3fg/uL；CHO殘留DNA片段分析試劑盒的四個片段的定量限均為3fg/μL。

圖2.CHO殘留DNA 0.3fg/μL 檢測結果（左）和CHO殘留DNA片段分析88 bp片段3fg/μL檢測結果（右）