賽默飛提供一些 Invitrogen Molecular Probes熒光和生物素化的鬼筆環肽衍生物,與肌動蛋白標記抗體相比具有明顯優勢。鬼筆環肽偶聯物的結合特性不會隨物種(包括動植物)的肌動蛋白變化而發生明顯改變。此外,它們的非特異性染色可忽略不計,因此染色區和未染色區之間的對比度很高。
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鬼筆環肽Phalloidin概述
鬼筆環肽是一種二環肽,屬于致命性鬼筆鵝膏“死亡帽”蕈中分離出來的毒素家族中的一員,常用在固定細胞、透化的細胞和無細胞的實驗中選擇性地標記 F-肌動蛋白的成像應用中。標記后的鬼筆環肽偶聯物對大細絲和小細絲具有相似的親和力,并且在肌肉和非肌肉細胞中以一定的化學計量比與每個肌動蛋白亞基的一種鬼筆毒素發生結合。據報道,它們不與單體 G-肌動蛋白發生結合,這與某些抗肌動蛋白的抗體有所不同。
用于肌動蛋白Actin染色的鬼筆環肽Phalloidin偶聯物
鬼筆環肽Phalloidin是一種雙環肽,當與熒光染料偶聯時,可用于標記固定和透化細胞中的肌動蛋白actin。鬼筆環肽Phalloidin與 Alexa Fluor 染料的熒光偶聯物是大多數應用 F-actin染料,因為它們在整個光譜范圍內都具有明亮的信號和光穩定性。鬼筆環肽偶聯物可與大的或小的肌動蛋白微絲結合,其中鬼筆環肽Phalloidin與肌動蛋白Actin亞基之間的化學計量比為 1:1,但不會與 G-actin單體結合,并且不適用于石蠟包埋的切片。
Alexa Fluor 和 Alexa Fluor Plus 鬼筆環肽結合物
鬼筆環肽的熒光 Alexa Fluor 和 Alexa Fluor Plus 染料結合物是應用廣泛的 F-肌動蛋白染色劑,在整個光譜范圍內均可選擇顏色。這些鬼筆環肽結合物為研究人員提供了熒光探針,探針的亮度和光穩定性優于所測試的所有其他光譜相似的偶聯物。
使用 Invitrogen SelectFX 核標記試劑盒和 Alexa Fluor 鬼筆環肽結合物查看固定的、透化的牛肺動脈內皮細胞。細胞核和 F-肌動蛋白分別使用(左上方)DAPI 和 Invitrogen Alexa Fluor 680 鬼筆環肽染色,(右上方)Invitrogen SYTOX Green 染料和 Invitrogen Alexa Fluor 568 鬼筆環肽染色,(左下方)7-AAD 和 Invitrogen Alexa Fluor 488 鬼筆環肽,以及(右下)Invitrogen TO-PRO 3 染料和 Invitrogen Alexa Fluor 350 鬼筆環肽染色。
Invitrogen 鬼筆環肽探針的光譜特征
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