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GE Life FICOLL PAQUE PLUS高效淋巴細胞分離

來源:上海易匯生物科技有限公司   2025年05月29日 14:21  

GE Life FICOLL PAQUE PLUS高效淋巴細胞分離

在生命科學研究領域,對細胞進行高效、高純度的分離是眾多實驗的關鍵起始步驟。GE Life 的 FICOLL PAQUE PLUS(貨號 17144002)作為一款備受認可的細胞分離介質,在淋巴細胞分離等實驗中發揮著重要作用,為科研人員提供了可靠的技術支持。

產品概述

FICOLL PAQUE PLUS 是一種無菌的即用型密度梯度介質 ,專為從人外周血中分離淋巴細胞而精心設計,在全球實驗室中已成為體外研究的標準選擇。它能助力科研人員獲取高產率、高純度的淋巴細胞,滿足多種科研實驗對細胞樣本的嚴格要求。該產品的包裝規格有多種,如常見的 6×100 mL 裝,方便不同規模實驗的需求。

核心技術原理

  1. 密度梯度離心原理:血液中各類細胞的密度存在差異 ,紅細胞和多核白細胞比重較大,約為 1.092,而淋巴細胞和單個核細胞比重相對較小,在 1.075 左右。FICOLL PAQUE PLUS 的密度精準控制在 1.077±0.001 g/mL,這一密度恰好介于紅細胞和淋巴細胞之間。當含有多種細胞的血液樣本與 FICOLL PAQUE PLUS 混合后進行離心時,不同細胞會依據自身密度在離心力的作用下,在分離液中形成不同的層次,從而實現細胞的分離。

  1. 成分協同作用:其主要成分包括 9.0% (w/v) 的泛影葡胺鈉、5.7% (w/v) 的 Ficoll PM400 以及 0.0231%(w/v) 的依地酸鈣鈉 。泛影葡胺鈉可增加溶液的密度,有助于形成穩定的密度梯度;Ficoll PM400 作為一種高分子量蔗糖聚合物,能促進紅細胞的凝集,使得紅細胞在離心過程中更容易沉淀,從而與淋巴細胞更好地分離;依地酸鈣鈉則起到抗凝作用,防止血液樣本在分離過程中發生凝固,保證細胞的完整性和活性。

產品性能優勢

  1. 高純度與高回收率:使用 FICOLL PAQUE PLUS 分離淋巴細胞,所得單核細胞含量可達 95 ±5% ,淋巴細胞得率為 60 ± 20%。這意味著科研人員能夠從外周血樣本中獲取到高純度的淋巴細胞,且細胞的回收率較高,為后續實驗提供了充足且優質的細胞材料。無論是進行淋巴細胞功能研究,還是基于淋巴細胞的細胞治療探索等,高純度和高回收率的淋巴細胞樣本都至關重要,能有效減少雜質細胞對實驗結果的干擾,提高實驗的準確性和可靠性。

  1. 良好的細胞活力維持:該產品在分離過程中能很好地維持淋巴細胞的活力 ,細胞存活率可達 95 ±5%。這得益于其溫和的分離條件以及對細胞無明顯毒性的成分。高活力的淋巴細胞對于需要細胞繼續進行培養、增殖或功能檢測的實驗尤為關鍵,如淋巴細胞的體外刺激實驗、細胞因子分泌檢測等,只有保持細胞的高活力,才能真實反映淋巴細胞在生理狀態下的功能和特性。

  1. 低內毒素水平:FICOLL PAQUE PLUS 的內毒素水平極低,小于 0.12 EU/mL 。內毒素的存在可能會對細胞產生毒性作用,影響細胞的正常生理功能,進而干擾實驗結果。低內毒素水平保證了分離得到的淋巴細胞不受內毒素的污染和干擾,對于一些對內毒素敏感的實驗,如細胞培養、免疫細胞功能研究等,能夠提供更純凈、可靠的細胞樣本,確保實驗結果的準確性和可重復性。

  1. 操作簡便快速:基于 Boyum 發展的方法,使用 FICOLL PAQUE PLUS 進行淋巴細胞分離僅需簡單快速的離心操作 ??蒲腥藛T只需將適量的血液樣本小心鋪加在 FICOLL PAQUE PLUS 分離液上方,然后放入離心機中,按照推薦的離心條件進行離心,即可實現細胞的分層分離。整個操作過程無需復雜的設備和繁瑣的步驟,即使是實驗新手也能快速上手,大大提高了實驗效率,節省了科研時間。

與其他淋巴細胞分離方法的對比

對比維度
FICOLL PAQUE PLUS
紅細胞裂解液法
流式細胞分選法
磁珠分選法
分離純度
單核細胞含量 95 ±5%
純度較低,易殘留雜質
純度高,但可能存在損失
純度較高,特異性強
細胞活力
存活率 95 ±5%
對細胞有一定損傷
操作復雜,影響活力
可能影響細胞功能
操作難度
簡單,僅需離心
步驟相對復雜
需專業設備與技術
需特定設備與操作
分離時間
較短
中等
較長
中等
成本
適中
較低
設備昂貴,成本高
磁珠成本較高
適用場景
常規實驗
對純度要求不高的實驗
高純度特殊需求實驗
特定細胞亞群分離

1. 與紅細胞裂解液法對比

紅細胞裂解液法通過化學試劑裂解紅細胞,從而實現淋巴細胞的分離 。然而,這種方法容易導致細胞碎片殘留,分離得到的淋巴細胞純度較低,難以滿足對細胞純度要求較高的實驗。同時,裂解液對淋巴細胞也可能產生一定的損傷,影響細胞活力。相比之下,FICOLL PAQUE PLUS 利用密度梯度離心原理,能有效避免細胞碎片殘留問題,且對細胞的損傷極小,在分離純度和細胞活力方面具有明顯優勢。

2. 與流式細胞分選法對比

流式細胞分選法可根據細胞的物理和化學特性對淋巴細胞進行精準分選,純度 。但該方法需要專業的流式細胞儀設備,操作過程復雜,對操作人員的技術要求較高,且分選過程可能會對細胞造成一定的機械損傷,影響細胞活力。此外,設備和試劑成本高昂,限制了其在常規實驗室中的廣泛應用。FICOLL PAQUE PLUS 操作簡便,無需復雜設備,且能較好地維持細胞活力,對于大多數常規科研實驗而言,是更經濟、高效的選擇。

3. 與磁珠分選法對比

磁珠分選法利用磁珠與特定細胞表面標志物的特異性結合,通過磁場作用分離淋巴細胞,可實現對特定細胞亞群的高效分離 。不過,磁珠與細胞的結合可能會影響細胞的功能,且磁珠成本較高。而 FICOLL PAQUE PLUS 無需依賴細胞表面標志物,能分離獲得多種淋巴細胞亞群的混合樣本,適用于對淋巴細胞整體研究的實驗,且成本相對較低,操作更簡便。

應用領域

  1. 免疫學研究:在免疫學研究中,淋巴細胞是核心研究對象 。FICOLL PAQUE PLUS 分離得到的高純度、高活力淋巴細胞,可用于研究淋巴細胞的免疫應答機制,如 T 細胞和 B 細胞的活化、增殖、分化過程,以及它們在免疫防御、免疫調節中的作用。通過對淋巴細胞的深入研究,有助于揭示免疫系統的工作原理,為開發新型免疫治療方法、疫苗等提供理論基礎。例如,在腫瘤免疫治療研究中,分離出的淋巴細胞可用于體外擴增和修飾,使其具備更強的抗腫瘤活性,再回輸到患者體內,以達到治療腫瘤的目的。

  1. 傳染病研究:在傳染病研究領域,淋巴細胞在機體對抗病原體感染的過程中發揮著重要作用 。利用 FICOLL PAQUE PLUS 分離患者外周血中的淋巴細胞,可用于研究淋巴細胞對病原體的免疫反應,包括淋巴細胞分泌細胞因子的類型和水平、淋巴細胞對病原體的殺傷能力等。這有助于深入了解傳染病的發病機制,為開發針對性的治療藥物和疫苗提供關鍵線索。例如,在艾滋病研究中,通過對 HIV 感染者淋巴細胞的研究,可探索 HIV 病毒如何感染淋巴細胞以及淋巴細胞如何抵抗病毒感染,為尋找有效的艾滋病治療方法提供方向。

  1. 血液學研究:在血液學研究中,淋巴細胞的數量和功能變化與多種血液疾病密切相關 。FICOLL PAQUE PLUS 可用于從患者血液樣本中分離淋巴細胞,用于分析淋巴細胞在白血病、淋巴瘤等血液腫瘤中的異常表現,如細胞形態、免疫表型、基因表達等方面的變化。通過對這些異常的研究,有助于血液疾病的診斷、分型和預后評估,同時也為開發新的治療策略提供依據。例如,在白血病的診斷和治療監測中,準確分離和分析淋巴細胞的變化,對于判斷病情進展和治療效果具有重要意義。

產品使用說明

  1. 樣本準備:使用 FICOLL PAQUE PLUS 時,建議使用新鮮采集的人外周血樣本 。采血過程應嚴格遵循無菌操作原則,使用無熱原、無內毒素的采血器材。采集后的血液樣本若不能立即進行分離,可在室溫下短暫保存,但不宜超過數小時,以免影響細胞活性和分離效果。若需長時間保存,可采用適當的抗凝劑處理后,在低溫下保存,但應注意保存條件對細胞的影響。

  1. 實驗操作流程:操作時,先將 FICOLL PAQUE PLUS 分離液小心轉移至離心管中,注意不要產生氣泡 。然后用移液器將稀釋后的血液樣本緩慢鋪加在分離液上方,形成清晰的界面。血液與分離液的體積比推薦為 2:3 。將離心管放入離心機中,按照推薦的離心條件(如室溫下,以特定轉速離心一定時間,具體參數可參考產品說明書)進行離心。離心結束后,可觀察到明顯的細胞分層,位于分離液界面上的白膜層即為富含淋巴細胞的單個核細胞層。使用移液器小心吸取該層細胞,轉移至新的離心管中,再通過適當的洗滌步驟去除殘留的分離液和雜質,即可獲得相對純凈的淋巴細胞。

  1. 存儲條件:為保證 FICOLL PAQUE PLUS 的性能,應將其存儲于 4 - 30℃的環境中 。避免陽光直射和高溫環境,防止產品變質。在使用過程中,要注意產品的有效期,盡量在有效期內使用,以確保實驗結果的可靠性。開封后的產品應盡快使用,并妥善保存剩余部分,防止微生物污染。若發現產品出現渾濁、沉淀或顏色異常等情況,請勿使用。

GE Life 的 FICOLL PAQUE PLUS 憑借其先進的技術原理、性能表現、廣泛的應用范圍以及相較于其他方法的顯著優勢,成為科研人員在淋巴細胞分離領域的得力工具 。無論是基礎科研探索,還是臨床應用研究,它都能為科研工作提供高質量的淋巴細胞樣本,助力科研人員在生命科學領域不斷取得新的突破。但需注意,本產品僅用于科研用途,不可用于臨床診斷或治療。在使用過程中,若遇到任何問題,可隨時聯系 GE Life 專業的技術支持團隊獲取幫助。


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