細胞STR鑒定FAQ[Frequently Asked Questions(常見問題解答)]
1.什么是細胞系鑒定?
所謂細胞系鑒定即通過STR(短串聯重復)圖譜所建立細胞系的遺傳特征。一株細胞系的遺傳特征確立后,細胞系可以通過定期的檢測,以防止出現細胞系被誤認或交叉污染的情況。
2.為什么要進行細胞系鑒定?
由于細胞系發生交叉污染或身份誤認,將導致實驗數據的無效或數據誤導。NIH已發出公告,討論細胞系鑒定的必要性與重要性,并且越來越多的的期刊要求文章發表前、需提供細胞鑒定數據。
3. 細胞系用錯的概率有多大?
據ATCC估計,1977年錯誤使用細胞的概率是16%,1999年是18%。根據我們的經驗,國內細胞系用錯的概率不低于20%。即如果一個研究所有二十個課題組,按概率估計,有4個課題組用的細胞是錯的。
4. 什么細胞最容易污染別的細胞?
Hela細胞。因為她長得快、長得好嘛。當你發現自己的一個培養瓶里的細胞突然長得很好,而以后都用它傳代做實驗的話,十之八九是搞錯了。
5. 有哪些細胞曾被Hela污染?
lnt-407、HEp-2、WISH等一百余種。.
6. 如何進行細胞系鑒定
細胞系鑒定目前主要基于國際身份認證委員會的標準。依據該標準,可以通過多重熒光PCR技術,對人源8個STR位點以及1個性別決定位點進行檢測。下表為這些位點的具體的遺傳信息。
7. 什么時候需細胞系鑒定?
(1)當建立或獲得一個新的細胞系時;
(2)一個涉及到細胞試驗項目開始/結束時
(3)在細胞凍存之前,或細胞已連續培養2~3個月
(4)發表文章或申請課題經費前
(5)細胞系表現不穩定或結果與預期差別較大時
(6)當實驗室使用超過一種細胞系時,所有細胞系最好先鑒定以排除交叉污染的可能
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