大鼠海馬神經元細胞分離自海馬體;海馬體(Hippocampus),又名海馬回、海馬區(qū)、大腦海馬,海馬體主要負責記憶和學習。海馬神經元細胞是海馬區(qū)的主要細胞組成,主要功能是參與近期記憶、情緒及內臟功能調節(jié)、是老年性癡呆、癲癇等疾病的主要病灶之一。海馬屬于大腦的邊緣系統(tǒng),在學習、記憶、情緒反應及神經系統(tǒng)疾病的病理生理變化等方面有重要作用,而且海馬組織是中樞神經系統(tǒng)內主要的神經干細胞聚集區(qū),具有高度序化板層結構和神經元相對獨立分布的特點,境界相對清晰,便于取材,因此,海馬神經元體外培養(yǎng)模型被廣大基礎醫(yī)學和臨床醫(yī)學研究者當做理想的實驗模型。海馬神經元細胞培養(yǎng)是研究神經細胞生物學特性和外源干擾因素作用(細胞因子)的有效細胞模型,其在神經生物學,發(fā)育生物學體外實驗研究中已被廣泛應用。
細胞簡介
平臺編號:Bio-129602
規(guī)格:1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
細胞信息:RHNC
細胞名稱:大鼠海馬神經元細胞RHNC
產品規(guī)格:T25培養(yǎng)瓶x1;1.5ml凍存管x2
細胞數量:1x10^6;1x10^6
保存溫度:37℃;-198℃
運輸方式:常溫保溫運輸;干冰運輸
安全等級:1
用途限制:僅供科研2類
培養(yǎng)體系:神經元細胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)溫度:37℃
二氧化碳濃度:5%
簡介:大鼠海馬神經元細胞RHNC取自雄性SD大鼠,貼壁培養(yǎng)。
注釋:倍增時間41h
用途:細胞系
注意事項:僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產品信息以出庫為準)
細胞復蘇操作說明(針對凍存細胞)
實驗儀器:超凈工作臺 ,CO2 培養(yǎng)箱 ,倒置顯微鏡 ,水浴鍋 ,離心機
實驗試劑:DMEM 培養(yǎng)基 ,胎牛血清 ,三抗
實驗材料:T25 細胞培養(yǎng)瓶 ,需復蘇的細胞 ,移液槍 ,槍頭 ,離心管
實驗步驟:
1、從液氮罐中取出凍存管 ,直接浸入 37℃溫水中 ,并不時搖動令其盡快融化。
2、從 37℃水浴中取出凍存管 ,打開蓋子 ,移液槍吸出細胞懸液 ,加到離心管并滴加 5 倍以上培養(yǎng)基并混勻。
3、操作離心 , 調至 1000 轉/分 ,時長 10 分鐘
4、棄去上清液 ,重懸離心管底部細胞沉淀,在 T25 培養(yǎng)瓶中加入 5-6ml 培養(yǎng)基 ,計數 ,調整細胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。
5、次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。
6、注意:凍存細胞建議三管一起復蘇到一個 T25 培養(yǎng)瓶中
細胞傳代操作說明(貼壁細胞)
實驗儀器:超凈工作臺 ,CO2 培養(yǎng)箱 ,倒置顯微鏡 ,離心機
實驗試劑:DMEM 培養(yǎng)基 ,胎牛血清 ,0.25%胰酶 ,三抗
實驗材料:T25 細胞培養(yǎng)瓶 ,需傳代的細胞 ,移液槍 ,槍頭 ,離心管
實驗步驟:
1、細胞于培養(yǎng)箱中 ,愈合度達到 80% ,可進行傳代。
2、按 T25 培養(yǎng)瓶計 ,吸出培養(yǎng)基 ,并 PBS 緩沖液輕沖 3 遍 ,添加 0.25%含 EDTA 胰酶 2ml ,消化 2min(具體時間視細胞而定),后用培養(yǎng)基將細胞沖洗下來。 1000r/min 離心 10 min ,棄上清 收集細胞,鋪至 2 個 T25 培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),各添加 7ml 培養(yǎng)基。
3、注意:消化時間不易過長,消化前血清成分務必去除干凈,終止消化請用新鮮培養(yǎng)基,原瓶培養(yǎng)基不可繼續(xù)使用(終止消化或傳代)。
細胞傳代操作說明(懸浮細胞)
實驗儀器:超凈工作臺 ,CO2 培養(yǎng)箱 ,倒置顯微鏡 ,離心機
實驗試劑:DMEM 培養(yǎng)基 ,胎牛血清 ,三抗
實驗材料:T25 細胞培養(yǎng)瓶 ,需傳代的細胞 ,移液槍 ,槍頭 ,離心管
實驗步驟:
1、細胞于培養(yǎng)箱中,密度達到懸浮細胞傳代標準(沉降后可鋪滿底面),可進行傳代。
2、按 T25 培養(yǎng)瓶計,吹打均勻,吸出培養(yǎng)基,1000r/min 離心 10 min,棄上清收集細胞,鋪至 2 個T25 培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),各添加 7ml 培養(yǎng)基。
3、注意:原瓶培養(yǎng)基不可繼續(xù)使用(傳代)。
細胞凍存操作說明
實驗儀器:超凈工作臺 ,CO2 培養(yǎng)箱 ,倒置顯微鏡 ,離心機
實驗試劑:DMEM 培養(yǎng)基 ,胎牛血清 ,0.25%胰酶 ,三抗 ,DMSO
實驗材料:T25 細胞培養(yǎng)瓶 ,需凍存的細胞 ,移液槍 ,槍頭 ,離心管 ,凍存管 ,記號筆
實驗步驟:
1、取待凍存的細胞(按 T25 計 )用 0.25EDTA 胰酶 2ml 消化 2min ,用培養(yǎng)基將細胞沖洗下來。1000r/min 離心 10min ,棄上清收集細胞。 如果是懸浮生長的細胞 ,則可直接離心收集細胞。
2、加入 1ml 凍存液(90%FBS+10%DMSO )制成細胞懸液。
3、細胞懸液裝入 3 支凍存管中。
4、凍存管在 4℃下存放 30 min ,轉放-20℃ 1.5~2 h ,再轉人-70℃ 4-12 h 后即可轉移到液氮內(- 196℃) ,并登記。
北京百歐博偉生物技術有限公司的微生物菌種查詢網提供微生物菌種保藏、測序、購買等服務,是中國微生物菌種保藏中心的服務平臺,并且是集微生物菌種、菌種,ATCC菌種、細胞、培養(yǎng)基為一體的大型微生物查詢類網站,自設設備及技術的微生物菌種保藏中心!歡迎廣大客戶來詢!
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。