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液相色譜系統(tǒng)一般采用自動(dòng)進(jìn)樣器工作
液相色譜系統(tǒng)的溶劑管理系統(tǒng)負(fù)責(zé)提供合適的流動(dòng)相，流動(dòng)相通常由多種溶劑混合而成，如甲醇、乙腈、水等。不同的樣品和分離需求需要不同組成和流動(dòng)相。例如，在反相液相色譜中，流動(dòng)相的會(huì)影響組分的洗脫順序，組分洗脫能力越弱。泵在溶劑管理系統(tǒng)中起著關(guān)鍵作用，它能持續(xù)穩(wěn)定地輸送流動(dòng)相，確保色譜過(guò)程的平穩(wěn)進(jìn)行。常見(jiàn)的泵有二元泵和四元泵，四元泵可混合輸送四種溶劑，能更靈活地調(diào)整流動(dòng)相組成。
進(jìn)樣系統(tǒng)負(fù)責(zé)將待分析的樣品引入色譜柱。它需要準(zhǔn)確控制進(jìn)樣量，以保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。現(xiàn)代液相色譜系統(tǒng)一般采用自動(dòng)進(jìn)樣器，可按照預(yù)設(shè)程序準(zhǔn)確抽取和注入樣品，提高分析效率。
分離系統(tǒng)的核心是色譜柱，柱內(nèi)填充有特定的固定相。固定相的種類(lèi)多樣，如硅膠、鍵合相等，不同類(lèi)型的固定相適用于不同性質(zhì)的樣品分析。在色譜過(guò)程中，樣品在固定相和流動(dòng)相之間不斷進(jìn)行分配，各組分因與兩相的作用力不同而逐漸分離。
檢測(cè)系統(tǒng)用于監(jiān)測(cè)和測(cè)定分離后的組分。常見(jiàn)的檢測(cè)器有紫外檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器等。紫外檢測(cè)器通過(guò)測(cè)量樣品對(duì)特定波長(zhǎng)紫外線(xiàn)的吸收來(lái)定量分析組分，應(yīng)用廣泛；熒光檢測(cè)器則基于樣品的熒光特性進(jìn)行檢測(cè)，具有高靈敏度。
數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)負(fù)責(zé)采集、處理和分析檢測(cè)器輸出的信號(hào)。它能記錄色譜峰的保留時(shí)間、峰高、峰面積等信息，通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比或使用相關(guān)軟件計(jì)算，確定樣品中各組分的含量和純度等。
液相色譜系統(tǒng)的檢定方法：
1.外觀及完整性檢查：
-檢查各部件是否齊全，包括輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器等，外觀有無(wú)損壞、變形、腐蝕等情況。
-查看各連接管路是否完好，無(wú)破損、老化、泄漏等問(wèn)題，確保管路連接緊密。
2.功能檢查：
-輸液泵：開(kāi)啟輸液泵，檢查其能否正常運(yùn)轉(zhuǎn)，有無(wú)異常噪聲或振動(dòng)。檢查泵的壓力顯示是否正常，能否在設(shè)定的壓力范圍內(nèi)穩(wěn)定工作。同時(shí)，檢查泵的流速調(diào)節(jié)功能，看是否能準(zhǔn)確設(shè)置和穩(wěn)定輸出不同的流速。
-進(jìn)樣器：對(duì)于手動(dòng)進(jìn)樣器，檢查其操作是否順暢，進(jìn)樣針是否堵塞或損壞，進(jìn)樣精度是否滿(mǎn)足要求。對(duì)于自動(dòng)進(jìn)樣器，除了檢查進(jìn)樣針的狀態(tài)外，還要檢查其進(jìn)樣順序、進(jìn)樣量的準(zhǔn)確性和重復(fù)性等功能是否正常。
-檢測(cè)器：不同類(lèi)型的檢測(cè)器檢定方法有所不同。如紫外檢測(cè)器，檢查其光源是否正常發(fā)光，波長(zhǎng)調(diào)節(jié)是否準(zhǔn)確；熒光檢測(cè)器要檢查激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)的設(shè)置是否準(zhǔn)確，靈敏度是否正常等。同時(shí)，檢查檢測(cè)器的基線(xiàn)是否穩(wěn)定，有無(wú)異常噪聲或漂移。
-色譜柱：查看色譜柱的外觀是否有損壞，柱接頭是否完好。檢查色譜柱的標(biāo)識(shí)是否清晰，包括柱長(zhǎng)、內(nèi)徑、填料類(lèi)型等信息。
3.系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)：
-理論塔板數(shù)測(cè)定：選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，如萘等，配制成一定濃度的溶液，在規(guī)定的色譜條件下進(jìn)樣分析。根據(jù)色譜峰的保留時(shí)間和半高寬，計(jì)算理論塔板數(shù)，以評(píng)估色譜柱的分離效能。
-分離度測(cè)定：使用含有多種組分的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在選定的色譜條件下進(jìn)行分離分析。通過(guò)測(cè)量相鄰兩組分的保留時(shí)間、峰寬等參數(shù)，計(jì)算分離度，檢查系統(tǒng)對(duì)不同組分的分離能力是否滿(mǎn)足要求。
-重復(fù)性試驗(yàn)：連續(xù)多次進(jìn)樣相同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，觀察各次進(jìn)樣的保留時(shí)間、峰面積或峰高等參數(shù)的一致性，以評(píng)估系統(tǒng)的重復(fù)性。
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