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ATCC培養基是微生物培養中常用的標準化培養基，其操作需嚴格遵循規范，以確保實驗結果的準確性和可重復性。以下是操作時的關鍵注意事項：
一、培養基的選擇與配制
1.明確培養基類型
根據微生物種類和實驗目的選擇合適的ATCC培養基配方。
注意培養基的pH值、滲透壓和營養成分是否符合目標微生物的需求。
2.嚴格按配方配制
使用精確的電子天平稱量試劑，避免稱量誤差。
溶解試劑時充分攪拌，確保完*溶解。
調節pH值至規定范圍，避免過酸或過堿。
3.滅菌處理
液體培養基需高壓滅菌，固體培養基需先滅菌后倒平板。
滅菌后立即使用或在無菌條件下保存，避免污染。
二、ATCC培養基操作注意事項：
1.無菌操作
在超凈工作臺或生物安全柜中進行接種、倒平板等操作，避免雜菌污染。
使用無菌器械，每次使用前需灼燒滅菌。
操作過程中避免說話、咳嗽或大幅移動，減少空氣流動導致的污染。
2.接種規范
接種前確保微生物培養物處于對數生長期或適宜階段。
控制接種量，避免過量導致菌落重疊或過少導致生長不良。
涂布平板時用力均勻，確保菌液均勻分布。
3.培養條件控制
根據微生物需求設置溫度、氣體環境和濕度。
倒置培養平板，避免冷凝水滴落沖散菌落。
三、ATCC培養基儲存與有效期：
1.儲存條件
未開封的培養基應存放在陰涼干燥處，避免光照和高溫。
已配制的培養基需密封保存，防止吸潮或污染。
2.有效期管理
固體培養基平板應在4℃保存，最好在24~48小時內使用，避免干燥或污染。
液體培養基開封后需盡快使用，避免變質。
四、常見問題與解決
1.污染問題
若培養基出現霉菌、雜菌斑點，需檢查無菌操作是否規范，器械是否滅菌徹*。
定期清潔超凈工作臺和實驗區域，使用消毒劑（如70%乙醇）擦拭臺面。
2.菌落異常
菌落形態、大小不一致：可能因接種量不均或培養基pH偏差，需重新配制培養基并規范操作。
菌落稀少或無生長：檢查培養基配方、滅菌是否充分、微生物活性是否良好。
3.培養基干裂
固體培養基平板在長期培養后可能干裂，可通過加蓋保濕或縮短培養時間改善。
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