一、背景

小鼠肺大動脈平滑肌細胞試劑盒適用于分離培養小鼠肺大動脈平滑肌細胞。小鼠肺大動脈平滑肌細胞試劑盒提供了的組織分離條件，分離單個細胞的效率高。此外，小鼠肺大動脈平滑肌細胞試劑盒還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。

二、生理結構

小鼠肺大動脈平滑肌細胞分離自正常小鼠肺動脈組織，細胞呈梭形或多角形。該細胞所表達的鈣通道表面表達的ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁炎癥反應。該細胞也是多數重要動脈疾病的靶細胞。雖然肺大動脈組織機械韌性很強，但利用小鼠肺大動脈平滑肌細胞試劑盒中提供的肺大動脈組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的肺大動脈組織片能使得肺大動脈組織中成肺大動脈細胞的一些功能特性發生改變，從而將成肺大動脈細胞分離開來。

平滑肌細胞是指構成平滑肌組織。平滑肌即無紋肌的通稱，是被視為較橫紋肌原始的一種肌肉。平滑肌除作為無脊椎動物的軀體肌而有廣泛分布外，在脊椎動物除心肌之外而大部分內臟肌也是由平滑肌組成的。

三、應用

用于AS小鼠主動脈平滑肌上TRPC1-BK信號復合體分子表達量的變化研究：

冠狀動脈粥樣硬化性心臟病、缺血性腦血管病等缺血性心腦血管疾病已成為嚴重威脅人類健康的流行性非傳染病,而動脈粥樣硬化（atherosclerosis,AS）斑塊的發生和發展是其重要的病理生理基礎。AS發生機制復雜,在斑塊的形成和發展過程中,血管平滑肌細胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）的遷徙、增殖、表型轉換及細胞外基質的產生起到主要作用。因此,研究VSMCs功能在AS斑塊發生和發展中的作用對于防治冠心病具有重要意義。而VSMCs內鈣離子(calcium ion,Ca2+)不僅是VSMCs收縮和舒張的主要調節因子,而且作為第二信使對于VSMCs的遷徙、增殖、表型轉換及細胞外基質的產生也起到了關鍵的作用。

瞬時受體電位通道（Transient receptor potential channel,TRPC）是一類非選擇性的陽離子通道,為細胞感受器,包括TRPC1、TRPC2、TRPC3、TRPC4、TRPC5、TRPC6、TRPC7這七種類型,而這七種TRPC通道中,發現研究最深入的是TRPC1通道,這種通道在VSMCs上廣泛分布。與經典電壓門控性Ca2+通道不同的是TRPC1通道無電壓依賴性。當肌漿網內Ca2+耗竭時,TRPC1通道開放,Ca2+內流增加,血管收縮,故TRPC1通道功能主要是參與VSMCs收縮和增生、細胞凋亡及信號轉導等。TRPC1通過調控Ca2+內流影響機體的生理機能。

研究表明,多種病理生理狀態與TRPC通道表達量增多和減少、通道開閉活性異常存在相關性。使用抑制劑來抑制TRPC通達蛋白的表達或使用特異性TRPC通道的阻滯劑可使細胞內Ca2+濃度降低、血管舒張,目前認為,TRPC家族成員是構成細胞膜上鈣池操縱性Ca2+通道和受體操縱性Ca2+通道的分子基礎,它作為主要的Ca2+內流通道,不僅參與機體許多生理功能,還與多種病理過程相關。

采用動脈粥樣硬化組和對照組小鼠分別10只,處死后分離得到主動脈血管平滑肌組織,從組織中提取總RNA及總蛋白,使用反轉錄-聚合酶鏈式反應（reverse-transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）、免疫蛋白印記（Western blot）及免疫組化等方法檢測并比較兩組小鼠主動脈血管平滑肌組織中TRPC1、大電導鈣離子激活鉀通道α亞單位(large conductance Ca2+-activated K+channelαsubunit,BKα)及大電導Ca2+激活鉀通道β1亞單位(large conductance Ca2+-activated K+channelβ1 subunit,BKβ1)亞基m RNA和蛋白表達量的差異。

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