細(xì)胞凍存技術(shù)

細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)操作，通過在低溫條件下抑制細(xì)胞的新陳代謝和生長，從而實(shí)現(xiàn)長期保存細(xì)胞的目的。一般有以下情況時(shí)我們會采用細(xì)胞凍存技術(shù)，例如，

1、細(xì)胞株需要長期保存；

2、為了規(guī)避污染風(fēng)險(xiǎn)，將F0或者F1細(xì)胞進(jìn)行凍存，即使目前傳代的細(xì)胞受到污染都能夠有新鮮細(xì)胞使用；

3、隨著細(xì)胞傳代次數(shù)逐漸增加，細(xì)胞會發(fā)生突變，為了保證前后實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致性，可以使用同樣代次細(xì)胞；

4、細(xì)胞功能和特性研究時(shí)，細(xì)胞凍存可以保證細(xì)胞質(zhì)量；

5、為了建立細(xì)胞資源庫，需要對細(xì)胞進(jìn)行凍存，以方便后續(xù)科研研究；

6、細(xì)胞治療項(xiàng)目中為了保證項(xiàng)目的延續(xù)性，凍存細(xì)胞可以持續(xù)穩(wěn)定的供應(yīng)。

由此可見凍存細(xì)胞非常重要。

實(shí)驗(yàn)室常見凍存細(xì)胞多采用90%胎牛血清和10%DMSO，其次為70%DMEM、20%胎牛血清和10%DMSO。其中胎牛血清含有豐富的蛋白質(zhì)和生長因子，可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)和保護(hù)。它還可以吸附細(xì)胞表面的冰晶，防止細(xì)胞被冰晶損傷。DMSO作為滲透性保護(hù)劑，在梯度降溫過程中隨著細(xì)胞凝結(jié)逐漸滲透到細(xì)胞內(nèi)部，降低細(xì)胞內(nèi)外溶液中的電解質(zhì)濃度，阻止細(xì)胞內(nèi)水分外滲，避免細(xì)胞過分脫水皺縮，減少冰晶的生成。

但是作為占比最大的胎牛血清存在批間差異、成分不明確且價(jià)格昂貴等問題，一直以來都是科研工作者極力想解決的痛點(diǎn)。另一方面DMSO具有毒性，凍存過程中也會導(dǎo)致一部分的細(xì)胞提前死亡。所以實(shí)驗(yàn)室工作人員會選擇多凍存幾支，但是這樣也增加了血清使用量，從而導(dǎo)致整個(gè)凍存過程成本ji高。

綜上所述使用方法和痛點(diǎn)，逐漸出現(xiàn)了無血清無DMSO的細(xì)胞凍存液，詳情見“BioProE細(xì)胞凍存液（不含蛋白、DMSO和血清）使用方法”。