申克氏孢子絲菌的培養(yǎng)特點(diǎn)與染色反應(yīng)及診斷與治療!
一、菌種簡(jiǎn)介
申克氏孢子絲菌(學(xué)名:Sporothrix schenckii)是一種常見(jiàn)的溫感二形性真菌,也是Sporothrix屬的物種。申克氏孢子絲菌是引起孢子絲菌病的病原菌。廣泛分布于自然界,自土壤、腐木及植物表面可分離出本菌。申克氏孢子絲菌通過(guò)損傷的皮膚或粘膜感染人,可引起皮膚、皮下發(fā)生慢性結(jié)節(jié)性或潰瘍性為特點(diǎn)的孢子絲菌病。也可侵犯肺、胃腸道、骨及中樞神經(jīng)系統(tǒng)。病原菌通過(guò)血流播散,引起全身皮膚出現(xiàn)結(jié)節(jié)、膿腫。
二、形態(tài)和染色反應(yīng)
申克氏孢子絲菌是一種二形的真菌,在組織中和在37℃培養(yǎng)時(shí)生長(zhǎng)成酵母形態(tài),但在30℃培養(yǎng)時(shí)則生長(zhǎng)成絲狀真菌。在30℃培養(yǎng)時(shí),它能形成纖細(xì)、有橫隔的分支菌絲,在短的支持菌絲上或直接在主菌絲的邊上長(zhǎng)出卵圓形的臺(tái)軸分生孢子(sympodu—loconidia)。在膿汁中很難用顯微鏡找到此菌。在組織中有特征性的形態(tài)是類似長(zhǎng)形酵母的細(xì)胞,有時(shí)候被描繪為“雪茄形”,長(zhǎng)2-10/μm,寬1-3μm。
三、培養(yǎng)特點(diǎn)
此菌在所有常用的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基上都能生長(zhǎng),但在固體培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)比在液體中更為豐盛。麥芽糖能促進(jìn)生長(zhǎng)。在馬鈴薯葡萄糖瓊脂上的生長(zhǎng)也良好,特征性的棕黑色色素也看得最清楚。
在馬鈴薯斜面上于30℃培養(yǎng)時(shí),第二天便出現(xiàn)帶白色的絲狀小菌落,以后逐漸增大和變黑,直到最后幾乎成了黑色為止。菌落的表面呈羊毛狀,這是因?yàn)橛泻脷獾亩叹z的緣故。年老的培養(yǎng)物的表面有皺紋和卷曲。
在mycobiotic瓊脂上的生長(zhǎng)與馬鈴薯上的生長(zhǎng)相似,但菌落保持白色,而且粘附得很緊,因?yàn)榫z體能深入到培養(yǎng)基里去。明膠緩慢地被液化,生長(zhǎng)大多靠近表面,但沿穿刺線出現(xiàn)刺樣的生長(zhǎng),表面生長(zhǎng)可能有點(diǎn)變黑。Loeffler氏血清培養(yǎng)基在菌落下面稍凹陷,但不出現(xiàn)全面的液化。
四、流行病學(xué)和發(fā)病學(xué)
申克氏孢子絲菌是死的植物材料例如沼澤泥炭蘚上常見(jiàn)的腐生菌,因此大多數(shù)病人是林業(yè)工作者、花匠和擺弄在地下潮濕條件下存放的撐木的礦工們。分生孢子在土壤中也常見(jiàn)。此菌通過(guò)皮膚傷口而侵入,通常的侵入部位是手、腳和頭部。馬和狗比別的動(dòng)物受感染得更多。病變開(kāi)始時(shí)是一個(gè)帶紅色小結(jié)節(jié),可能淌出稀薄的漿液膿性液體。然后感染經(jīng)淋巴管道而擴(kuò)散。沿著這些管道形成了小結(jié)節(jié),結(jié)節(jié)潰破出表面,排出淡黃色的粘稠膿汁。淋巴結(jié)也腫大。腿的皮下組織可能因淋巴液的積聚而增厚,淋巴管道中的病變限制了淋巴液返回到全身淋巴循環(huán)去。病變散播到別的組織去,在馬是罕見(jiàn)的,但有時(shí)候可見(jiàn)于狗。
此菌在病變中為數(shù)稀少,通常可在巨噬細(xì)胞里面找到它。它是多形的,長(zhǎng)出許多的芽。
五、免疫性
對(duì)抗感染的應(yīng)答,既有體液的也有細(xì)胞介導(dǎo)的。在感染過(guò)程中,對(duì)抗酵母型的凝集素上升了。大約50%的病例有補(bǔ)體結(jié)合抗體。抗體效價(jià)的迅速上升表示預(yù)后良好。老的液體培養(yǎng)物的濾液(孢子絲菌素——sporolrichin)可使病畜產(chǎn)生特異性的遲發(fā)型過(guò)敏反應(yīng)。
六、診斷
使用螢光抗體技術(shù)和PAS染色方法,能最清楚地在組織和膿汁中看到申克氏孢子絲菌的微小、球形和雪茄狀的酵母體。這些方法是快速的,但是必須有標(biāo)本在腦心浸劑或mycobiotic瓊脂斜面上于37℃和30℃或室溫培養(yǎng)的培養(yǎng)物的支持。典型菌落大約在一周后可以見(jiàn)到——起先是白色和光潔的, 以后變成棕色。酵母型是在37℃培養(yǎng)時(shí)產(chǎn)生的,這使申克氏孢子絲菌與由其他孢子絲菌引起的感染區(qū)別開(kāi),后者偶然也曾在人的皮下組織中引起病變。
診斷也可以通過(guò)用組織浸漬物或滲出物腹腔內(nèi)接種小鼠來(lái)加以證實(shí)。小鼠在接種后一周產(chǎn)生腹膜炎,在腹腔滲出液中有大量的雪茄狀,多形、正在出芽的酵母型。
七、化學(xué)療法
建議用靜脈注射或口服碘化鉀來(lái)治療病馬,但常發(fā)生治療失敗。也曾建議用灰黃霉素來(lái)治療病馬。兩性霉素B對(duì)人的病例治療有效。
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