傳統的細胞系開發需要好幾個月的時間,周期長,主要受限于單細胞的分選效率低、成像設備有邊緣效應、成像結果容易受到雜質干擾、ghost cell等問題。
Cytena公司推出的UP.SIGHT單克隆篩選系統是分選和成像一體機,2min即可分選一塊96孔板,在分選的同時能進行3D全孔細胞成像,孔底成像功能監控細胞生長過程,解決上述問題,助力細胞系開發駛入“快車道”

自今年1月份發布,新老客戶爭相預約UP.SIGHT Demo實驗,獲得非常好的使用體驗。現在和大家分享一波應用案例:
●孔板類型:384孔板,96孔板
●細胞:CHO-K1
1. 分選速度快速
一塊96孔板只需2min!
2.單克隆細胞來源保證圖片
1) 噴嘴成像
提供多張噴嘴圖像,從源頭上證實單細胞進入孔板

2) 3D全孔成像
UP.SIGHT在孔板托盤下方具有高清的相機,含有單細胞的液滴一滴進孔板的瞬間,底部的相機能自動聚焦,自下而上的層層掃描,覆蓋整孔的體積,直到掃描界面與單細胞進行“相遇”,記錄單細胞進孔的證據。

3D全孔成像的優勢:
●消除傳統的細胞分選需要借助離心的方式加速細胞沉降,避免細胞被甩到孔的邊緣,出現邊緣效應,或者“ghost cell”等問題
● 消除細胞沉降到底部拍照時,來自于孔板本底不干凈/雜質的干擾
3. 細胞生長監測
從Day0天起監測單細胞生長分裂,到第7天可看到明顯的單細胞克隆團。

4.結論
根據統計,一塊384孔板除去陽性對照孔,一共對378個孔進行了單細胞分選,對分選過程中的噴嘴成像、3D全孔成像以及后續的底板成像進行評估,噴嘴成像顯示得到單細胞孔378個,即單細胞率100%;3D全孔成像顯示得到的單細胞孔374個,即單細胞率98.9%;這也充分表明噴嘴成像和3D全孔成像可以相互佐證,使我們的單細胞率的正確率無限接近100%;生長7天后,330個孔成功生長成單細胞克隆團,單克隆率為88.2%。
今年二季度,Cytena將老機型c/f.sight分別升級到C.SIGHT 2.0 和F.SIGHT 2.0,并納入UP.SIGHT家族,升級后的C.SIGHT 2.0 和F.SIGHT 2.0優勢顯著。
分析對象 | c.sight | C.SIGHT2.0 | 升級后的優勢 |
外觀 | 藍色LED酷炫指示燈 | ||
聚焦 | 需要拆開外殼進行聚焦 | 外部有旋鈕進行左右調整和聚焦 | 不需要開蓋,可以通過外部旋鈕直接聚焦,減少維護,更加方便 |
升級功能 | 不能升級 | 可以升級到UP.SIGHT | 2.0保留了升級的空間 |
分離效率 | 3-5分鐘/96孔板 | 2-3分鐘/96孔板,增加focus功能,分選更快! | 速度更快,效率更高! |
耗材 | 螺絲固定 | 磁力固定 | 升級后無需螺絲固定,磁力固定,操作更簡便 |
孔板固定 | 卡夾固定 | 托盤 | 卡夾用久了容易松動,托盤則無此困惱 |
單細胞率 | 80-99% | 分選效率保持一致性 | |
細胞生長率 | 70-90% |
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