Thermo 89882 Zeba™ 脫鹽離心柱用戶指南
一、產品概述
Thermo 89882 Zeba™ 脫鹽離心柱是賽默飛世爾科技(Thermo Fisher Scientific)旗下Zeba™系列的核心產品,專為蛋白及生物樣品快速脫鹽設計。該離心柱采用7K MWCO(分子量截留值)高性能體積排阻色譜樹脂,通過離心操作實現高效脫鹽,同時保留大分子蛋白,適用于手動或自動液相色譜(LC)前處理流程。
二、技術規格
截留分子量(MWCO):7,000 Da
適用體積范圍:0.5 mL(單柱容量,支持30–130 µL樣品體積)
樹脂類型:專有高性能體積排阻色譜樹脂
包裝規格:25柱/盒(貨號89882)
儲存條件:4°C保存,常溫運輸
回收率:對>7,000 Da蛋白回收率≥95%,去除≥95%鹽及小分子污染物(<1,000 Da)
三、核心功能
高效脫鹽
通過體積排阻色譜原理,小分子鹽類(如NaCl、Tris等)隨緩沖液流出,大分子蛋白被樹脂截留。
兼容高鹽濃度(如1 M NaCl)樣品,無需稀釋。
高回收率
專有樹脂設計降低蛋白非特異性結合,即使低濃度蛋白(25 µg/mL)仍可保持高回收率。
快速操作
單次離心(1,000 × g,2分鐘)即可完成脫鹽,無需色譜系統或樹脂平衡步驟。
一張96孔Zeba脫鹽板可在5分鐘內處理96份樣品。
兼容性
與主流自動液相色譜系統(如AKTA)兼容,支持手動注射器或自動化工作站操作。
四、操作流程
(一)離心柱預處理
去除儲存液
掰斷柱子尾部并松開蓋子,置于15 mL離心收集管中。
1,000 × g離心2分鐘,棄去收集管中液體。
樹脂平衡
向柱子中加入1 mL緩沖液(如PBS),1,000 × g離心2分鐘,棄去液體。
重復此步驟2–3次,確保樹脂充分平衡。
(二)樣品上樣
樣品加載
將柱子置于新收集管中,緩慢加入30–130 µL樣品至樹脂中心。
可選壓層:對于<70 µL樣品,樣品吸收后加入15 µL超純水或緩沖液。
離心脫鹽
1,000 × g離心2分鐘,收集管中液體即為脫鹽樣品。
(三)后續分析
脫鹽樣品可直接用于SDS-PAGE、質譜分析、酶活性測定或液相色譜純化。
五、常見問題與解決方案
問題 | 可能原因 | 解決方案 |
---|---|---|
樣品或緩沖液無法流穿 | 離心機故障或柱子堵塞 | 檢查離心機狀態,避免接觸柱子邊緣 |
產量低 | 未使用壓層 | 對<70 µL樣品添加壓層 |
蛋白回收率低 | 蛋白不穩定 | 使用合適緩沖液平衡柱子 |
六、應用場景
蛋白質組學:去除樣品中高濃度鹽類,優化質譜分析結果。
藥物研發:快速脫鹽后進行藥物-蛋白結合研究。
生物制藥:緩沖液置換以適應下游純化工藝。
高通量篩選:結合96孔板實現自動化脫鹽。
七、注意事項
儲存條件:收到后立即4°C保存,避免樹脂干燥。
樣品兼容性:適用于>7,000 Da蛋白,小分子蛋白(如肽段)可能被截留。
安全操作:樹脂懸液含0.05%,避免接觸皮膚或吸入。
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